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
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文檔簡介
1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文促凋亡基因PDCD5在人膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其對(duì)化療敏感性的影響姓名:李海艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):免疫學(xué)指導(dǎo)教師:張利寧20090416山東大學(xué)博士學(xué)位論文1PDCD5在人神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)狀態(tài)及其臨床意義2PDCD5表達(dá)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長及化療敏感性的影響3PDCD5影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞化療敏感性的分子機(jī)制4PDCD5與凋亡相關(guān)基因(如PDCD4)的關(guān)系方法一、PDCD5在人神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及其臨床意義1病例收集:收集
2、山東大學(xué)齊魯醫(yī)院神經(jīng)外科20032006年神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者的新鮮標(biāo)本共30例包括其中3例患者的相應(yīng)癌旁組織,以及石蠟包埋的腫瘤標(biāo)本58例。所有患者術(shù)前均未接受任何放、化療治療。2分別用RTPCR及Westernblot方法檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251、U87及神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中PDCD5mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)。3礦檢驗(yàn)分析PDCD5在不同膠質(zhì)瘤病例中的表達(dá)與膠質(zhì)瘤臨床病理生理學(xué)特征之間的關(guān)系,KaplanMeier生存曲線分析PDCD5的表
3、達(dá)與膠質(zhì)瘤患者生存率之間的關(guān)系。二、PDCD5過表達(dá)或沉默表達(dá)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系生長及化療敏感性的影響1用空載體或PDCD5重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤細(xì)胞系,應(yīng)用RTPCR及‘Westernblot及免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后PDCD5的表達(dá),建立低表達(dá)及高表達(dá)PDCD5的膠質(zhì)瘤細(xì)胞模型。2倒置顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染PDCD5后神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系形態(tài)、生長分化的變化,繪制生長曲線。3采用不同的化療藥(順鉑等),設(shè)定不同濃度,用MTT法檢測(cè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染空載體或
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