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簡(jiǎn)介:蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文番茄潰瘍病菌的富集和快速分子生物學(xué)檢測(cè)方法研究姓名閔現(xiàn)華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師韓躍武劉箐20100501蘭趔太堂殛堂僮途塞PATHOGENENRICHMENTANDRAPIDMOLECULARBIOLOGYDETECTIONMETHODSFORTOMATOBACTERIALCANKERPATHOGENS,CLAVIBACTERMICHIGANENSISSUBSPMICHIGANENSISABSTRACTOBJECTIVETOMATOBACTERIALCANKERISTHEMOSTIMPORTANTBACTERIALDISEASESWHICHCAUSEDSUBSTANTIALECONOMICLOSSESINTHEWORLDWIDESEEDISTHEMAINLONGDISTANCESPREADPATHWAYASMALLAMOUNTOFBACTERIAINSEEDCANLEADTOALARGESCALEPREVALENCE,SEEDBORNCLAVIBACTERMICHIGANENSISSUBSPMICHIGANENSISCMMISDIFFICULTTODETECTBYNOMALMETHODSBECAUSEOFITSVERYLOWRATEOFINFECTEDSEEDTHEREFORE,ITISSIGNIFICANCETOPREVENTITSINVASIONANDSPREADBYESTABLISHINGALLACCURATE,RAPIDANDSENSITIVEMETHODFORCMMDETECTIONMETHODSCOMPARISONOFSEVERALMETHODSFORTHEDETECTIONOFCMMINBACTERIALSUSPENSIONSANDEXPERIMENTALLYCONTAMINATEDSEEDSAMPLESTHESEMETHODSINCLUDINGIMMUNOLOGICALMETHODSUCH嬲ELISAMOLECULARBIOLOGYMETHODSSUCHASDIRECTPCRANDNESTEDPCRASWELLASTHEMETHODSOFPATHOGENENRICHMENTCOMBINEDWITHPCRSUCHASBIOPCRANDNITROCELLULOSEMEMBRANECAPTUREPCR,THEMETHODSOFPATHOGENCONCENTRATIONCOMBINEDWITHPCRSUCHASMEMBRANEFILTERPCR,IMMUNOCAPTUREPCRICPCRANDIMMUNOMAGNETICSEPARATIONPCRIMSPCRTHENWEEVALUATETHESENSITIVITYTESTINGPERIOD,STABILITYANDTHECOSTOFTHESERESULTSTHEIMMUNOLOGICALMETHODANDMOLECULARBIOLOGYMETHODSSUCHAUSELLS八DIRECTPCRANDNESTEDPCRWEREPERFORMEDINBACTERIALSUSPENSIONSANDEXPERIMENTALLYCONTAMINATEDSEEDSAMPLESTHESERESULTSWERECOMPAREDWITHTHEMETHODSOFPATHOGENENRICHMENTORCONCENTRATIONCOMBINEDWITHPCRSUCHASNITROCELLULOSEMEMBRANECAPTUREPCR,BIOPCR,MEMBRANEFILTERPCR,ICPCRANDIMSPCRELISADETECTIONLIMITISMORETHAN106CFU/MLOFPATHOGENINALLASSAYEDSAMPLESTHEDETECTIONSENSITIVITYOFDIRECTPCRIS104CFU/MLAND106CFU/MLINBACTERIALSUSPENSIONSANDEXPERIMENTALLYCONTAMINATEDSEEDSAMPLES,RESPECTIVELYNESTEDPCRARRIVED102CFU/MLAND104CFU/MLINBACTERIALSUSPENSIONSAND2
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簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院碩士學(xué)位論文植物與核盤(pán)菌(SCLEROTINIASCLEROTIUM)互作分子生物學(xué)的初步研究姓名臧憲朋申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)植物病理學(xué)指導(dǎo)教師蔡新忠20100301浙江大學(xué)碩士論文植物與核盤(pán)菌&腸,DF加函暑幽RD砌惴M互作分子生物學(xué)的初步研究抗氧化調(diào)節(jié)4%、信號(hào)傳導(dǎo)3%、誘導(dǎo)植物防衛(wèi)反應(yīng)1%,另外有9%蛋白的功能未知差異表達(dá)蛋白中有12%與草酸合成的調(diào)控相關(guān),這些差異表達(dá)蛋白功能分析揭示了導(dǎo)致老熟茵絲中草酸合成能力下降的兩方面機(jī)理一方面是包括4個(gè)草酰乙酸乙基水解酶OXALOACETATEACETYLHYDROLASE蛋白,1個(gè)異檸檬酸裂解酶ISOCITRATELYASE,以及1個(gè)異檸檬酸脫氫酶ISOEITRATE/ISOPROPYLMALATEDEHYDROGENASE等在內(nèi)的草酸合成關(guān)鍵正向調(diào)控酶在老熟菌絲中的蛋白含量均顯著下降,另一方面是3個(gè)檸檬酸合成酶CITRATESYNTHASE在老熟菌絲中的蛋白含量則顯著增加,導(dǎo)致合成草酸的直接底物草酰乙酸顯著減少此外,與基因轉(zhuǎn)錄、蛋白合成、呼吸、核質(zhì)問(wèn)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的蛋白在老熟菌絲中的積累量均顯著下降,說(shuō)明這些活動(dòng)在老熟菌絲中受到抑制。差異表達(dá)蛋白功能分析還表明在老熟菌絲中通過(guò)激活多種途徑協(xié)調(diào)保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性這些結(jié)果增進(jìn)對(duì)核盤(pán)菌菌絲老熟的生理和致病力變化及其分子機(jī)理的理解4組合采用突變體和VIGS技術(shù),篩選鑒定了一批植物對(duì)核盤(pán)菌的抗病性調(diào)控基因采用VIGS技術(shù)分析了13個(gè)本氏煙基因?qū)吮P(pán)菌的抗性調(diào)控功能,發(fā)現(xiàn)B12MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASE1、B16SMALLGTPBINDINGPROTEIN和24PROTEINDISULFIDEISOMERASE沉默后植株的菌核病病害癥狀比對(duì)照顯著加重,而B(niǎo)60LEMIR沉默后的植株病害癥狀則比對(duì)照顯著減弱,說(shuō)明B12、B16和24可能正調(diào)控、而B(niǎo)60可能負(fù)調(diào)控本氏煙對(duì)核盤(pán)菌的抗性另外,以擬南芥突變體為材料,對(duì)WRKY基因家族、MPK和AG01基因的抗病調(diào)控作用進(jìn)行了分析與野生型對(duì)照相比,接種核盤(pán)菌后A90136、WRKY6和WRKY31擬南芥突變體的病害癥狀顯著加重,而WRKY69突變體則顯著減輕,表明AG01、WRKY6和WRKY31可能正調(diào)控、而WRKY69可能負(fù)調(diào)控?cái)M南芥對(duì)核盤(pán)菌的抗性關(guān)鍵詞核盤(pán)菌;菌齡;接種方法;致病力;抗病性;草酸;果膠酶;蛋白質(zhì)組;基因沉默;WRKY;AG01;擬南芥突變體
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簡(jiǎn)介:廣西大學(xué)博士學(xué)位論文赤霉素誘導(dǎo)甘蔗節(jié)間伸長(zhǎng)的生理及分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究姓名吳建明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)作物栽培學(xué)與耕作學(xué)指導(dǎo)教師李楊瑞20091201釋放量和生長(zhǎng)素含量,改變了促進(jìn)伸長(zhǎng)的激素與抑制伸長(zhǎng)的激素之間的相對(duì)平衡狀態(tài);同時(shí)通過(guò)調(diào)節(jié)A葡萄糖苷酶、A甘露糖苷酶、A半乳糖苷酶、PN一乙酰氨基已糖昔酶和過(guò)氧化氫酶活性,其次是POD、13半乳糖苷酶和D.葡萄糖苷酶活性,最終達(dá)到促進(jìn)節(jié)間伸長(zhǎng)的效果。3.CDNAAFLP和EDNA.SRAP分析赤霉素誘導(dǎo)甘蔗節(jié)間伸長(zhǎng)的差異表達(dá)首次采用EDNA.AFLP和EDNA.SRAP兩種技術(shù)分析了赤霉素誘導(dǎo)甘蔗節(jié)間伸長(zhǎng)基因表達(dá)的差異。結(jié)果表明,GA3處理和對(duì)照甘蔗幼莖中的轉(zhuǎn)錄組具有很大的差異。兩種技術(shù)通過(guò)對(duì)回收差異片段進(jìn)行反向NORTHERN雜交驗(yàn)證扣除假陽(yáng)性后,得到80個(gè)差異明顯陽(yáng)性片段。對(duì)80個(gè)差異片段進(jìn)行克隆和序列分析并進(jìn)行了BLAST分析,按照功能可以將獲得的80條差異片段分為7類,分別為能量與代謝相關(guān)基因、未知功能蛋白、未知基因、.植物抗性相關(guān)基因、細(xì)胞壁生物合成與修飾相關(guān)基因、信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因和轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)基因。4.EDNA.SCOT的開(kāi)發(fā)利用及差異表達(dá)分析本研究首次利用CDNA.SCOT技術(shù)進(jìn)行基因差異表達(dá)分析。對(duì)不同模板、引物、.體系及擴(kuò)增條件等進(jìn)行研究的結(jié)果表明以第二鏈純化產(chǎn)物10X稀釋液為模板,擴(kuò)增35循環(huán)的效果最好。根據(jù)引物設(shè)計(jì)的原則我們又新設(shè)計(jì)了10條引物,部分引物擴(kuò)增也取得了很好的效果。CDNA.SCOT這個(gè)方法具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、假陽(yáng)性低、回收差異片段成功率高等特點(diǎn),對(duì)以后差異表達(dá)將起到重要作用。采用EDNA.SCOT技術(shù)對(duì)赤霉素誘導(dǎo)甘蔗節(jié)間伸長(zhǎng)相關(guān)基因進(jìn)行差異表達(dá)分析,得到56條差異片段。對(duì)回收的差異片段進(jìn)行反向NORTHERN雜交驗(yàn)證扣除假陽(yáng)性后,得到30個(gè)差異明顯的陽(yáng)性片段ST.TDFS,它們分別代表能量與代謝相關(guān)基因6條,占總數(shù)的20%、未知功能蛋白6條,占總數(shù)的20%、未知基因14條,占總數(shù)的46.67%、信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基N2條,占總數(shù)的6.67%、轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)基因1條,占總數(shù)的3.33%、細(xì)胞凋亡基因1條,3.33%。5EDNA.AFLP、EDNA.SRAP和EDNA.SCOT3種差異表達(dá)技術(shù)比較分析本研究首次從原理、方法、擴(kuò)增、回收等方面對(duì)CDNA.AFLP、EDNA。S凡心和EDNA.SCOT3種差異表達(dá)技術(shù)進(jìn)行比較分析,指出CDNA.AFLP、EDNA.SRAP和CDNASCOT技術(shù)均是研究基因差異表達(dá)的重要方法,得到了部分相同的差異片段,大多數(shù)的差異片段各有特點(diǎn)。研究者可以根據(jù)不同的研究方向和目的選擇自己需要的方法或不同方法結(jié)合應(yīng)用,特別是不同的差異表達(dá)技術(shù)結(jié)合應(yīng)用將能夠獲得更全面的
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簡(jiǎn)介:中山大學(xué)博士學(xué)位論文植物OPR基因家族系統(tǒng)發(fā)育分析及水稻OPR家族基因分子生物學(xué)功能研究姓名李文燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)遺傳學(xué)指導(dǎo)教師王金發(fā)20100601基因進(jìn)行分子生物學(xué)研究,以探究水稻OPR家族基因的蛋白結(jié)構(gòu)、生化特性及可能的生理功能。1在植物OPR基因家族系統(tǒng)發(fā)育方面本研究采用綜合生物信息學(xué)和系統(tǒng)發(fā)育的研究方法進(jìn)行比較基因組學(xué)研究,以探究植物OPR基因家族的系統(tǒng)發(fā)育、結(jié)構(gòu)進(jìn)化及可能的功能分化,取得了以下結(jié)果①利用公共數(shù)據(jù)庫(kù)資源,在植物基因組中鑒定了105個(gè)OPR基因;其中,在6個(gè)不同譜系的11個(gè)代表性物種藻類萊茵衣藻和團(tuán)藻;苔蘚小立碗蘚;蕨類卷柏裸子植物云杉;單子葉植物水稻、玉米和高粱;雙子葉植物擬南芥、楊樹(shù)和苜蓿中鑒定了74個(gè)OPR基因,均以多基因家族形式存在。②通過(guò)系統(tǒng)發(fā)育分析發(fā)現(xiàn),在植物基因組中,存在7個(gè)保守的OPR亞家族其中,在水生植物中,僅存在一個(gè)OPR亞家族即SUB.Ⅶ;而在陸生植物中,則存在六個(gè)OPR亞家族即SUBS.I~Ⅵ。進(jìn)一步分析提示,在水生和陸生植物分化后,譜系特異擴(kuò)增尤其是串聯(lián)重復(fù)是陸生植物OPR基因家族擴(kuò)增與進(jìn)化的主要機(jī)制,并導(dǎo)致多個(gè)OPR皿家族的產(chǎn)生。③通過(guò)EXON.INTRON結(jié)構(gòu)分析表明,不同譜系物種中的OPR基因內(nèi)含子的數(shù)目和長(zhǎng)度呈現(xiàn)多樣性,而內(nèi)含子的位置和相位卻十分保守;這一研究結(jié)果并結(jié)合系統(tǒng)發(fā)育分析提示,在OPR家族基因結(jié)構(gòu)進(jìn)化過(guò)程中,不同譜系間及同一譜內(nèi)的OPR基因發(fā)生持續(xù)內(nèi)含子丟失,從而導(dǎo)致OPR基因結(jié)構(gòu)的多樣性。基于上述研究結(jié)果,提出了一個(gè)關(guān)于OPR家族基因結(jié)構(gòu)演化的模型。④通過(guò)功能分化分析揭示,在進(jìn)化過(guò)程中,由于受到局部正選擇作用,不同OPR亞家族及其成員間發(fā)生了功能分化,并且導(dǎo)致功能分化的關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)主要分布于OPR蛋白三維結(jié)構(gòu)的外側(cè),即A螺旋和底物結(jié)合區(qū)。2在OOPR家族基因分子生物學(xué)功能方面本研究在植物OPR基因家族系統(tǒng)發(fā)育分析基礎(chǔ)上,選擇分別代表五個(gè)不同OPR亞家族的OSOPR基因即OSOPR047SUB.I、OSOPR081SUB.II、OSOPR061SUB.II、OSOPR017SUB.IV和OSOPR021SUB.V,采取同源建模、原核表達(dá)、半定量RTPCR及轉(zhuǎn)基兇方法研究水稻不同OPR亞家族基因的蛋白結(jié)構(gòu)、生化及生理功能,取得了以下結(jié)果①通過(guò)瀏源建模及蛋白結(jié)構(gòu)比較分析顯示,盡管不同亞家族OPR蛋白的
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簡(jiǎn)介:論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名占天上,中2,。L勺每占艮7EL關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名導(dǎo)師簽名矽FO年多月卅日Ⅵ。年∥月717日1鉑RI。卜坼1◆缸辮四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩上學(xué)位論文中文摘要本文采用三種分子生物學(xué)方法ERICPCRAGE、ERICPCRDGGE和V3PCRDGGE聯(lián)合活菌計(jì)數(shù)法分析肉雞呼吸道菌群結(jié)構(gòu)的多樣性,枯草芽孢桿菌PAB02噴霧劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和呼吸道菌群的影響以及PAB02預(yù)防和治療金黃色葡萄球菌感染的效果,結(jié)果如下1選取48只7日齡健康肉公雞,隨機(jī)分為2組,每組24只,CK組為對(duì)照組,P組為噴霧芽孢桿菌PAB02組。P組動(dòng)物房?jī)?nèi)每日8時(shí)噴霧IMUM3的PAB02制劑108CFU/M1,28日齡時(shí)對(duì)肉雞稱重。結(jié)果,與CK組相比,P組凈增重提高了9409,平均日增重提高了2689,全期耗料降低1259,平均日耗料降低5599,料肉比降低002,但差異性均不顯著尸O05。結(jié)果表明通過(guò)噴霧枯草芽孢桿菌PAB02對(duì)肉雞的采食量、日增重、料肉比等生長(zhǎng)性能有所提高,但無(wú)明顯作用。2采用活菌計(jì)數(shù)法和三種分子生物學(xué)分析法對(duì)28和49日齡肉雞呼吸道細(xì)菌結(jié)構(gòu)及多樣性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果,49日齡時(shí)呼吸道細(xì)菌總數(shù)略高于28日齡時(shí);喉部的細(xì)菌總數(shù)比氣管高一個(gè)數(shù)量級(jí),喉部細(xì)菌總數(shù)為106CFU/G,氣管細(xì)菌總數(shù)為105CFU/G;噴霧PAB02后,喉部細(xì)菌數(shù)顯著增高氏O05,氣管細(xì)菌數(shù)量略有增多尸帕05;49日齡時(shí)呼吸道各段的條帶數(shù)量顯著多于28日齡P,005,兩個(gè)日齡段之間呼吸道各段菌群相似性為59%~84%;喉部的條帶數(shù)量顯著多于氣管PO05,相似性提高了11~16個(gè)百分點(diǎn)。說(shuō)明噴霧PAB02能增加呼吸道細(xì)菌數(shù)量和多樣性,并能提高菌群的相似性,但是對(duì)不同部位的調(diào)節(jié)能力不同,對(duì)肉雞喉部的調(diào)節(jié)作用較大,對(duì)氣管的調(diào)節(jié)作用較弱。3利用金色葡萄球菌G1分別通過(guò)滴鼻感染兩組肉雞,然后采用活菌計(jì)數(shù)和分子生物學(xué)方法檢測(cè)菌群結(jié)構(gòu),結(jié)果,在感染GL前和后均噴霧PAB02不能顯著改變喉部的細(xì)菌總數(shù)尸005,但能顯著減少氣管中的細(xì)菌總數(shù)和整個(gè)呼吸道喉部和氣管中的葡萄球菌數(shù)尸005,但能顯著減少呼吸道中的葡萄球菌數(shù)I
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)1839211密級(jí)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬脂肪誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄基因H丁的分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究MOLECULARBIOLOGICALANALYSISOFPORCINEFATINDUCINGTRANSCRIPTGENE研究生李德臻指導(dǎo)教師熊遠(yuǎn)著院士指導(dǎo)小組張沅教授陳煥春院士鄭用璉教授鄧昌彥教授蔣思文教授讞向分確副描黼獲得學(xué)位時(shí)間2010年6月農(nóng)業(yè)部豬遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室二。一O年六月唧IIIFLLLLRLILRLLLLLI\1799492華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書(shū)學(xué)位論文是否保密冱如需保密,解密時(shí)間年月日獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說(shuō)明,并表示了謝意研究生簽名蒼笛銥時(shí)間溯年廠月筇日學(xué)位論文使用授權(quán)書(shū)本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存,使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本;學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版,并提供目錄檢索和閱覽服務(wù),可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表,傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,同時(shí)本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)力注保密學(xué)位論文即涉及技術(shù)秘密,商業(yè)秘密或申請(qǐng)專利等潛在需要提交保密的論文在解密后適用于本授權(quán)書(shū)學(xué)位刪粼尉京撇名絲蟛’簽名日期矽如年羅耳日簽名日期加F。年歹月7尹日注請(qǐng)將本表直接裝訂在學(xué)位論文的扉頁(yè)和目錄之間
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簡(jiǎn)介:MOLECULAREPIDEMIOLOGYOFNEWCASTLEDIVIRUSFRQIMD1ANDSTUD“ISEASEVSLROUCKSANDIESDONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSTHESISSUBMITTEDTOQINGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMYSUNFENGCHUNDEPARTMENTOFANIMALSCIENCEANDVETERINARYSUPERVISORPROFWUYANGONGPROFSHANHUQINGDAO,CHMAJUNE,2010116病料及棉拭子1312方法。14121病毒的分離14122血凝HA和血凝抑制III試驗(yàn)14123NDV分離株F基因的RTPCR擴(kuò)增14124F基因及其推導(dǎo)的F蛋白序列同源性比較15125F蛋白裂解位點(diǎn)的氨基酸組成及毒力分析16126NDV毒株系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建16127NDV分離株基因型的確立162結(jié)果1821病毒分離結(jié)果1822血凝HA和血凝抑制0N試驗(yàn)1823分離株F基因的RTPCR擴(kuò)增1824分離株F基因核昔酸和F蛋白氨基酸序列同源性比較1925F蛋白裂解位點(diǎn)的氨基酸組成及毒力分析2226NDV毒株系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建2327NDV分離株基因型的確立263討論26研究二鴨源新城疫病毒生物學(xué)特性研究29試驗(yàn)1鴨源新城疫病毒NDV09023株部分生物學(xué)特性的鑒定29前言291材料與方法2911捌F料29111SPF雞胚和雛雞29112病毒純化用試劑29113NDV、H5、H9、EDS76標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清30114主要儀器設(shè)備3012方法。30121病毒的蝕斑純化30
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簡(jiǎn)介:PATHOGENⅡENTIFICATIONANDPHYLOGENETICANALYSISESOFTHE“PEARBROWNDRIPPYDISEASE”BYZHANGZHIFENGSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFUWLLLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEMASTERDEGREESUPERVISEDBYPROFESSORHUBAISHICOLLEGEOFPLANTPROTECTION,NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING210095PI乙CHINAJUNE2011甘錄目錄摘要IABSTRACTIⅡ引言VT篇1第一章梨樹(shù)病害概述11梨樹(shù)病害概述111梨樹(shù)真菌病害1111梨黑星病1112梨輪紋病2113梨銹病一3114梨黑斑。4115梨褐腐5116梨樹(shù)疫腐病5117梨樹(shù)干枯病6118梨白粉病一7119梨樹(shù)腐爛病一81110梨炭疽病912梨樹(shù)病毒病害10121梨石痘病10122梨環(huán)紋花葉病1L123梨脈黃化病1L13梨樹(shù)細(xì)菌病害12131梨根癌病13132梨火疫病1314梨銹水病病害現(xiàn)狀14141危害癥狀15142梨銹水病病原物15143發(fā)病條件152DICKEYACHRYSANTHEMI的分類學(xué)地位一1621DICKEYACHRYSANTHEMI的分類學(xué)地位1622DICKEYACHRYSANTHEMI的分類現(xiàn)狀1623DICKEYACHRYSANTHEMI的危害癥狀及特點(diǎn)16第二章DICKEYACHRYSANTHEMI病原檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展171傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)182多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)及其他綜合技術(shù)1921多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)2022其他綜合性技術(shù)21下篇22第一章梨銹水病病原菌分離鑒定。231實(shí)驗(yàn)材料。2411菌株與其他材料2412主要試劑及儀器2413基礎(chǔ)培養(yǎng)基252方法25
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)S51211單位代碼QQ8魚(yú)學(xué)號(hào)2008286小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的分子特征和生物學(xué)功能研究MOLECULECHARACTERIZATIONANDCORRESPONDINGBIOLOGICALFUNCTIONSOFPHOSPHATETRANSPORTERGENESINWHEATTRITICUMAESTIVUML學(xué)位申請(qǐng)人張立軍指導(dǎo)教師肖凱教授學(xué)科專業(yè)作物栽培學(xué)與耕作學(xué)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士授予單位河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期二。一一年五月廠摘要磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是介導(dǎo)植株對(duì)磷素吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主體,在調(diào)控植株磷素吸收和利用效率中具有重要作用。本項(xiàng)研究針對(duì)迄今有關(guān)小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因研究和報(bào)道較少的現(xiàn)狀,利用現(xiàn)代生物信息學(xué)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù),對(duì)11個(gè)小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的分子特征和表達(dá)特性進(jìn)行較全面的研究。主要研究結(jié)果如下1、通過(guò)在國(guó)際生物信息學(xué)網(wǎng)站進(jìn)行小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的查找,獲得11個(gè)尚未進(jìn)行系統(tǒng)研究的小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,作者依次命名為T(mén)APTL,TAPT2,TAPT3,TAPT4,TAPT5,TAPT6,TAPTTTAPT8,TAPT9,TAPTIO和TAPTLL。2、TAPTL~TAPTII的開(kāi)放閱讀框在660BPTAPTLJ至1707BPTAPT3之間,編碼氨基酸數(shù)量在219AATAPTLL至568AATAPT3之間;通過(guò)跨膜域分析,小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的跨膜域數(shù)目在315個(gè)之間。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,供試11個(gè)小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因可能具有不同的祖先。3、以磷高效小麥品種石新828為材料,對(duì)11個(gè)供試小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因TAPTL~TAPTLL的表達(dá)特性進(jìn)行研究,結(jié)果表明TAPTL、TAP心、TAPT8和TAPTIO表達(dá)水平一致,對(duì)外界磷濃度的變化不產(chǎn)生應(yīng)答;TAPT2、TAPT3、TAPT5、TAPT6、TAPT7、TAPT9和TAPTLL受磷素脅迫誘導(dǎo),其中TAPT2、TAPT3、TAPT6和TAPT7呈上調(diào)表達(dá),TAPT5、TAPT9和死P盯J呈下調(diào)表達(dá)。上述7個(gè)小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因可能以不同的機(jī)制,參與了小麥植株對(duì)磷素逆境信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)、響應(yīng)或抵御過(guò)程。4、以中國(guó)春為材料,對(duì)11個(gè)小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因在正常供磷和低磷脅迫下表達(dá)的晝夜節(jié)律分析表明,正常供磷下TAPT3和TAPT5及低磷脅迫下TAPTLL在根葉中呈組成型表達(dá);此外,呈組成型表達(dá)的還包括正常供磷下根系TAPT2和TAPT6、葉片勱P(guān)矽、低磷脅迫下根系TAPT2、TAPT5、TAPT6和葉片而腳、TAPT7、TAPT9。低磷脅迫下,根系TAPTL在光照下的表達(dá)量高于黑暗下的表達(dá)量,根系TAPT4在光照下的表達(dá)量低于黑暗下的表達(dá)量。正常生長(zhǎng)下根系TAPT5、葉片TAPT3和TAPT7以及低磷脅迫下根系和葉片TAPT5、葉片TAPT3和TAPT7具有高水平表達(dá)。由此,TAPT3,TAPT5和TAPT7在磷素的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)方面可能發(fā)揮著更重要的作用。5、利用DNA重組技術(shù)和遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),建立了異源表達(dá)上述基因的煙草轉(zhuǎn)基因系。結(jié)果表明超表達(dá)TAPTL、TAPT3和TAPT4的煙草植株,在低磷脅迫條件下植株吸收磷素的能力增強(qiáng),表現(xiàn)為低磷脅迫后植株在單葉鮮、干重和磷累積量較對(duì)照植株明顯增加。此外,在低磷脅迫下,轉(zhuǎn)基因植株較對(duì)照植株具有較高的光合色素含量及可溶性蛋白含量。研究表明,轉(zhuǎn)基因植株低磷處理后植株體內(nèi)磷素吸收數(shù)量增多,使植株體內(nèi)磷素脅迫逆境得到相對(duì)緩解,對(duì)于改善植株的生理功能,進(jìn)而改善植株的生長(zhǎng)發(fā)育狀況具有重要作用。6、初步建立了農(nóng)桿菌浸染小麥莖尖轉(zhuǎn)化體系,獲得了將小麥磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
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簡(jiǎn)介:論文單位代碼10389學(xué)號(hào)2080401甘蔗梢腐病病原菌一串珠鐮刀菌分子生物學(xué)研究初探學(xué)科門(mén)類農(nóng)學(xué)一級(jí)學(xué)科名稱植物保護(hù)二級(jí)學(xué)科名稱植物病理學(xué)研究方向分子植物病理學(xué)研究生洪偉雄指導(dǎo)教師魯國(guó)東教授論文完成時(shí)聞二0一一年四月’1●,USAR工U田BIOLOGYDISCIPLINECLASSAGRICULTUREPRIMARYSUBJECTPLANTPROTECTIONSECONDARYSPECIALTYPLANTPATHOLOGYMOLECULARRESEARCHDIRECTIONMOLECULARPLANTPATHOLOGYSTUDENTHONGWEIXIONGDIRECTORLUGUODONGSUBMITTEDTIMEAPRIL,2011
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)Q93996密級(jí)福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文\\刪R77V17RZ番石榴焦腐病病原鑒定、生物學(xué)特性及分子檢測(cè)技術(shù)研究學(xué)科門(mén)類一級(jí)學(xué)科名稱二級(jí)學(xué)科名稱研究方向研究生指導(dǎo)教師完成時(shí)間理學(xué)生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)微生物分子生物學(xué)高新明王宗華研究員陳慶河副研究員二。一一年四月CLASSIFICATIONQ93996DEGREEOFSECRETSUNITCODE10389STUDENT’SNUMBER1081615THEMASTER’SDISSERTATIONOFFUJIANAGRICULTUREANDFORESTRYUNIVERSITYIDENTIFICATION,BIOLOGICALCHARACTERISTICSANDPCRDETECTIONOFBOTRYOSPHAERIARHODINABRANCHESOFKNOWLEDGESCIENCEPRIMARYSUBJECTBIOLOGYSECONDARYSUBJECTBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYRESEARCHDIRECTIONMICROBIALMOLECULARBIOLOGYPOSTGRADUATEGAOXINMINGSUPERVISORPROFWANGZONGHUAASSOCIATEPROFCHENQINCHENGSUBMITTEDTIMEAPRIL2011
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)S85221學(xué)校代碼10129UDC619學(xué)號(hào)08201061綿羊肺腺瘤病毒的分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)DETECTIONOFEXOGENOUSJAAGSIEKTESHEEPRETROVIRUSBYMOLECULARBIOLOGYTECHNIQUES申請(qǐng)人趙澤赟學(xué)科門(mén)類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物生理學(xué)指導(dǎo)教師劉淑英教授論文提交日期二〇一一年五月DETECTIONOFEXOGENOUSJAAGSIEKTESHEEPRETROVIRUSBYMOLECULARBIOLOGYTECHNIQUESABSTRACTTODETECTJAAGSIEKTESHEEPRETROVIRUSACCURATELYSENSITIVELYTHISSTUDYWASDESIGNEDTHREEEXPERIMENTSSUCHASNESTEDRTPCRHEMINESTEDRTPCRDOTBLOTINGTODETECTTHEMPAIRSOFSPECIFICPRIMERSSPECIFICPROBESOFTHEEXJSRVENVGENEU3SEQUENCESWEREDESIGNEDFTHENESTEDRTPCRTHEHEMINESTEDRTPCRDOTBLOTINGTODETECTTHEOPACOMPARETHESETHREEMETHODSTHERESULTSSHOWEDTHATTHEHOMOLOGYOFENVGENEU3OFTHENESTEDRTPCRWERE96?RESPECTIVELYTHEHEMINESTEDRTPCRWERE968?COMPAREDWITHTHEEXOGENOUSJAAGSIEKTESHEEPRETROVIRUSPUBLISHEDINGENBANKASDEMONSTRATEDBYTHESPECIFICITYTESTTHEPRIMERSOFTHENESTEDRTPCRTHEHEMINESTEDRTPCRDESIGNEDINTHEPRESENTSTUDYCOULDNOTBEAMPLIFIEDFROMTHELUNGRNAOFHEALTHYSHEEPMICERABBITSASWELLASTHEKIDNEYLIVERSPLEENOFSPASHEEPTHESPECIFICITYRESULTSOFTHEDOTBLOTINGALSOCOULDNOTBEDETECTEDFROMTHELUNGDNAOFHEALTHYSHEEPMICETHELOWESTVALUEOFSENSITIVITYOFTHEENVGENENESTEDRTPCRHEMINESTEDRTPCRASPROVEDBYTHESENSITIVITYTESTSWERE48FG048PGRNAOFTHESTARDTEMPLATESEPARATELYWHEREASU3WERE48PG480NGRNATHELOWESTVALUEOFSENSITIVITYOFTHEENVGENECONVENTIONALRTPCRASPROVEDBYTHESENSITIVITYTESTWAS048NGRNAOFTHESTARDTEMPLATEWHEREASU3WAS48NGRNACOMPAREDWITHTHECONVENTIONALRTPCRNESTEDRTPCRAPPEAREDTOBEMESENSITIVEBUTONLYENVGENEOFHEMINESTEDRTPCRAPPEAREDTOBEMEATTHESAMETIMETHENESTEDRTPCRAPPEAREDTOMESENSITIVECOMPARINGWITHTHEHEMINESTEDRTPCRTHELOWESTVALUEOFSENSITIVITYOFTHEENVGENEU3DOTBLOTINGASPROVEDBYTHESENSITIVITYTESTSWERE7458PG07458NGDNAOFTHESTARDTEMPLATESEPARATELYCOLLECTIVELYFROMTHESETHREEEXPERIMENTSWECANCONCLUDENESTEDRTPCRISTHEMOSTSENSITIVEATTHESAMETIMETHESENSITIVEOFENVGENEISMETHANU3INTHESETHREEEXPERIMENGTSSOTHENESTEDRTPCRISMESENSITIVEPRACTICABLEFDETECTINGOVINEPULMONARYADENOMATOSISWHILETHEDOTBLOTINGALSOHASMESENSITIVEPRACTICABLEMEANWHILEITHASTHEADVANTAGESOFSIMPLEOPERATIONFASTSOTHEEXPERIMENTALCONDITIONSDONTENOUGHGRASSROOTSDOTBLOTINGMAYPRACTICALITYWILLBEPRACTICABLEKEYWDSOVINEPULMONARYADENOMATOSIS;ENJSRV;NESTEDRTPCR;HEMINESTEDRTPCR;DOTBLOTING
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簡(jiǎn)介:DYNAⅣⅡCCLIANGESOFBACTERIALCOMM刪ITYINUTERUSOFPOSTN蝴UMDAIRYCOWSBYCULTUREANDMOLECI丁IART垣ETHODBYPENGYUSUPERVISEAPHANGSUQ“SORASUQJNRATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFUWDLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYANIMALNUTRITIONANDFEEDSCIENCECOMPLETEDINDECEMBER2011COMMENCEMENTINDECEMBER2011目錄目錄摘要IABSTRACTV縮略符號(hào)Ⅸ文獻(xiàn)綜述11奶牛子宮內(nèi)膜炎研究進(jìn)展L11子宮內(nèi)膜炎病因及臨床診斷112子宮內(nèi)膜炎治療413子宮內(nèi)膜炎對(duì)奶牛子宮和卵巢的影響62生殖道微生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展721人生殖道微生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展922動(dòng)物生殖道微生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展103微生物區(qū)系分子水平研究進(jìn)展1231分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用基礎(chǔ)1232分子水平的微生態(tài)研究技術(shù)134研究目的、意義和內(nèi)容1741奶牛產(chǎn)后子宮內(nèi)細(xì)菌菌群研究存在問(wèn)題1742研究目的意義和主要內(nèi)容18參考文獻(xiàn)。18第一章奶牛產(chǎn)后子宮內(nèi)菌群動(dòng)態(tài)變化及子宮粘液性狀與細(xì)菌種類關(guān)系的研究251材料與方法2611試驗(yàn)動(dòng)物2612試驗(yàn)儀器2613奶牛產(chǎn)后子宮粘液的采集2614培養(yǎng)基的配制2615子宮粘液中PMN計(jì)數(shù)2716子宮粘液中細(xì)菌的分離和純化2717細(xì)菌的鑒定2718統(tǒng)計(jì)分析282結(jié)果和分析28
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簡(jiǎn)介:硒代蛋氨酸對(duì)肉雞的生物學(xué)效應(yīng)及其分子機(jī)理研究⑧論文作者簽名至垂魚(yú)指導(dǎo)教師簽名&叁量答辯委員會(huì)主席委員1委員2委員3委員4THEBIOLOGICALEFFECTSOFSELENOMETHIONINEONBROILERSANDAPPROACHTOTHEMOLECULARMECHANISMAUTHOR’SSIGNATURESUPERVISOR’SIGNATURESUPERVISORSSIGNATUREZH扒又I們幾’ZH扒JIFI“∥L,EXTERNALREVIEWERS△DQDY盟IYEXAMININGCOMMITTEECHAIRPERSON苧型圣LQDG£QF皇墨Q圣B皇IL旦DG型旦IY皇苧I主YEXAMININGCOMMITTEEMEMBERSE坌凸G型皇IB坐坌旦£Q皇苧苧Q圣B皇II坌DG墮DIY皇蘭L主Y圣B坌凸G£坌IGI坌Q巳QF金墨苧Q圣B金II坌DG墮凸IY金蘭I主Y圣B坌凸丕L垡坌旦£Q皇蘭Q圣B金II坌DG墮凸IY皇苧L主Y圣Q豎丕I坌QLDG£Q皇墨墨Q圣B金IL坌DG墮DLY皇苧IYDATEOFORALDEFENEE』望望寶Z2Q曼一
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簡(jiǎn)介:STUDIESONTHEPHYSIOLOGICALANDMOLECULARMECHANISMOFINTERNODEELONGATIONINDUCEDBYGAINAPPLE,。R、‘‘‘LHCSLSSUBMIREDTOQ薌NGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMY1一一DENGXIAOYUNCOLLEGEOFLANDSCAPINGANDHORTICULTURESUPERVISORPROF.DAIHONGYIQINGDAO.CHINAJUNE,2012赤霉素調(diào)控蘋(píng)果節(jié)間伸長(zhǎng)的生理及分子生物學(xué)機(jī)制研究摘要以國(guó)光特拉蒙雜交后代柱型和普通型蘋(píng)果MALUSDOMESTICABORKH組培苗為試材,分別進(jìn)行不同濃度和不同天數(shù)的外源GA3處理,測(cè)定不同濃度GA3處理后組培苗的酶活性、內(nèi)源激素含量的動(dòng)態(tài)變化。以柱型和普通型蘋(píng)果莖尖為試材,克隆得到蘋(píng)果的內(nèi)根.貝殼杉烯合成酶ENT.KAURENESYNTHASE,KS基因和古巴焦磷酸合酶COPALYLPYROPHOSPHATESYNTHASE,CPS基因,并對(duì)這兩個(gè)基因進(jìn)行組織表達(dá)和生物信息學(xué)分析,以期探討蘋(píng)果赤霉素合成途徑上游的調(diào)控機(jī)制。獲得的研究結(jié)果如下1.外施GA3明顯促進(jìn)蘋(píng)果組培苗新梢的生長(zhǎng),柱型蘋(píng)果對(duì)GA3的反應(yīng)較普通型蘋(píng)果不敏感。外施GA3能明顯提高柱型蘋(píng)果0T。淀粉酶活性,普通型蘋(píng)果反應(yīng)相對(duì)不明顯;高濃度的GA3對(duì)SOD酶活性有抑制作用,隨處理天數(shù)先抑制后促進(jìn),不同的是,與對(duì)照組相比,GA3處理抑制柱型蘋(píng)果SOD酶活性促進(jìn)普通型蘋(píng)果SOD酶活性;外施GA3后柱型蘋(píng)果的POD酶活性高于普通型蘋(píng)果,隨處理天數(shù)大致表現(xiàn)上升趨勢(shì)。2.內(nèi)源激素的測(cè)定結(jié)果表明,柱型蘋(píng)果組培苗IAA含量低于普通型植株,外施低濃度GA3顯著提高了柱型蘋(píng)果IAA含量,高濃度則抑制;而外施GA3降低了普通型蘋(píng)果隊(duì)A含量,隨處理天數(shù)大致呈上升趨勢(shì);柱型蘋(píng)果組培苗ZR含量高于普通型植株;外施GA3略微降低了柱型蘋(píng)果ZR的含量,高濃度的GA3抑制作用更為顯著,普通型蘋(píng)果ZR含量前16D變化不明顯;柱型蘋(píng)果ABA含量高于普通型,外施GA3前8D柱型和普通型蘋(píng)果ABA含量均顯著降低,之后上升;柱型蘋(píng)果GA3含量略低于普通型植株,外施GA3提高了兩種株型的內(nèi)源GA3含量,且隨處理天數(shù)大致呈上升趨勢(shì);柱型和普通型蘋(píng)果G~含量差別不明顯,外施GA3后兩種株型GA4含量均顯著上升,且上升程度均大致與外施GA3的濃度呈正相關(guān)。3.以蘋(píng)果莖尖為試材,同源克隆得到KS的CDNA全長(zhǎng)序列,命名為MDKS,開(kāi)放閱讀框ORF全長(zhǎng)2214BP,編碼737個(gè)氨基酸,推斷相對(duì)分子量為83.7244KDA,等電點(diǎn)為5.47;氨基酸同源性及聚類分析表明,MDKS與已報(bào)道的其它11種植物的KS氨基酸序列具有52%一98%的相似性,該基因最先和梨聚類,其次是板栗;捌嬲曷于萜類合成酶亞家族,具有DDXXD結(jié)構(gòu)域。4.從柱型蘋(píng)果中克隆得到CP。S基N2187BP的CDNAFL/段,氨基酸序列同源性及聚類分析表明,MDCPS與板栗屬于同一進(jìn)化支,同源性達(dá)69%,與毛果楊屬于同一分支,同
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