簡介：EFFECTSOFDHEAONBIOLOGICALCHARACTERISTICSANDITSREGULATINGTESTOSTERONEPRODUCTIONMECHANISMINPR玎訌ARYRATLEYDIGCELLSBYLIUIINSUPERVISORASSOCIATEPROFMAHAITIANADISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFUWDLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYCOMPLETEDINAPRIL2013COMMENCEMENTINJUNE2013目錄目錄摘|要IABSTRACTV本文部分縮寫中英文對照Ⅸ引言1第一篇文獻綜述3第一章脫氫表雄酮生物學作用研究進展31DHEA的合成、代謝與分布32DHEA的生物學功能421DHEA對神經(jīng)系統(tǒng)的影響422DHEA對免疫系統(tǒng)的影響423DHEA的抗氧化作用424DHEA對心血管系統(tǒng)的影響525DHEA對骨質(zhì)代謝的影響53DHEA調(diào)節(jié)機體生理功能的作用機制531DHEA的激素樣效應532DHEA的非激素樣效應6參考文獻7第二章睪酮的生物合成及其調(diào)控機制11L睪酮的生物合成112睪酮合成途徑中關鍵因子12213B羥基類固醇脫氫酶122217B羥基類固醇脫氫酶1323芳香化酶133MAPKERK信號通路134類固醇激素與MAPKERK信號通路間的關系14參考文獻16第二篇試驗研究19第三章DHEA對原代大鼠睪丸間質(zhì)細胞增殖特性的影響191材料和方法一2011主要試劑和儀器。2012原代大鼠睪丸間質(zhì)細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定2013DHEA對原代大鼠睪丸問質(zhì)細胞增殖的形態(tài)學觀察2L14EDU法檢測DHEA對原代大鼠睪丸間質(zhì)細胞增殖的影響。2115流式細胞術檢測DHEA對原代大鼠睪丸問質(zhì)細胞周期的影響。2216REALTIMEPCR法檢測細胞周期蛋白MRNA表達水平22

簡介：論文題目英文題河南農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文CHARACTERISTICSOFAIVH9ISOLATEDSTRAINSINHENANPROVINCE導專論文提交日學位授予日致謝光陰似箭，三年的研究生生活轉(zhuǎn)眼就要結束了，在此論文完成之際，首先向我的指導老師崔保安教授致以最崇高的敬意和最真摯的感謝。崔老師淵博的學識、活到老學到老的學習精神、一絲不茍的敬業(yè)精神、寬闊的胸襟等都是我值得用一生去學習的。崔老師在本試驗和論文的撰寫過程中投入了大量的精力并給與精心的指導。感謝崔老師對我試驗和論文的指導和關心。感謝實驗室李新生副教授在試驗過程中給于的指導和幫助，他對工作的認真熱情、雷厲風行的工作作風、勇往直前的拼搏精神，也是我不斷學習和進步的榜樣。在此論文完成之際，也向尊敬的李新生副教授表示衷心的感謝感謝本實驗室的陳紅英老師在試驗和生活中給于我的幫助，陳老師在生活和學習上對學生的關心和照顧使我們感動，她處處為學生著想，為學生考慮，非常的熱情，使每一個學子都非常的敬佩她。感謝實驗室魏戰(zhàn)勇老師、張紅英老師、楊明凡老師、王學兵老師、王彥彬老師、金鉞老師、王莉老師等三年來在學習、試驗和生活中給于我的關心和幫助感謝師兄高文明、李雙亮、王澤仁、劉文杰、陳禮朋、岳旭龍、張宇耕、師姐李燕、王淑娟、郭靜、苗銀萍、陸佳、王亞丹等，在我生活和學習上給予我的關心和幫助三年的研究生生活雖然短暫，但卻給我的人生增添了不少的風采，在這行三年罩我認識了很多的朋友，跟著實驗室老師也學到了很多，使我對學習和I生活有了更深、更好的理解和詮釋，對自己也更加充滿了信心。感謝同學劉媛媛、王俊亞、吳宇陽、盧權威、鈔安軍、李坤、陳雅君、張莉娟、張元元、張鵬宇、馬莉芳、姬郭彪、李小佳、李偉豪、楊青原等與我～‘起渡過難忘的研究生學習生涯，在我困難迷惑沒有方向的時候有你們給我出謀劃策，指點迷津?！篎因為有了你們我的研究生生活JL‘豐富多彩，在此向你們表示衷心的感謝感謝師弟朱春平、周云飛、郭宮朋、陳龍彪、馬世杰、劉中原，師妹常婧竹、高曉云、寇亞楠等給予我生活和學習E的無私幫助，在此表示衷心的感謝最后，感謝我的家人和朋友，你們總是在我的身后支持著我，鼓勵著我，做我堅強的后盾，感謝你們對我的理解與寬容

簡介：分類號密級UDC編號碩士學位論文昆明犬繁殖性能和成纖維細胞系生物學特昆明犬繁殖性能和成纖維細胞系生物學特征的研究征的研究STUDYONREPRODUCTIVEPERFMANCEBIOLOGICALACTERISTICSOFTHEFIBROBLASTCELLLINESINKUNMINGDOG碩士研究碩士研究生李靜生李靜指導教師戴志明戴志明教授魏紅江魏紅江教授申請學位類別申請學位類別農(nóng)學碩士農(nóng)學碩士專業(yè)動物營養(yǎng)與飼料科學動物營養(yǎng)與飼料科學培養(yǎng)學院動物科學技術學院動物科學技術學院二O一四年五月一四年五月

簡介：分類號S823學校代碼10129UDCS8512學號2010201042IBRV對牛單核巨噬細胞生物學特性及主要細胞表面分子表達的影響EFFECTSOFIBRVONBIOLOGICALACTERISTICSEXPRESSIONOFMAJCELLSURFACEMOLECULESOFBOVINEMONOCYTEMACROPHAGE論文提交日期二〇一三年六月申請人高晶學科門類農(nóng)學學科專業(yè)預防獸醫(yī)學研究方向獸醫(yī)公共衛(wèi)生指導教師周偉光副教授EFFECTSOFIBRVONBIOLOGICALACTERISTICSEXPRESSIONOFMAJCELLSURFACEMOLECULESOFBOVINEMONOCYTEMACROPHAGEABSTRACTINFECTIOUSBOVINERHINOTRACHEITISVIRUSCANCAUSEBOVINEMULTIPLETISSUESINFECTIONESPECIALLYRESPIRATYINRECENTLYYEARTHISDISEASEISPREVAILCAUSEENMOUSECONOMICLOSSESTHISSTUDYISOLATECULTUREBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESINVITRODETECTPHAGOCYTICFUNCTIONNOSECRETIONOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESAFTERINFECTEDWITHIBRVAT6122448HRESPECTIVELYANALYSETHEEFFECTOFIBRVINFECTIONONIMMUNOLOGYFUNCTIONOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESATCELLULARMOLECULARLEVELTHERESULTOFPHAGOCYTOSISOFCHICKENREDBLOODCELLTESTSHOWSTHATTHEPHAGOCYTICFUNCTIONOFMONONUCLEARMACROPHAGESDECREASEAFTERINFECTEDWITHIBRVP005APOPTOSISOFMONONUCLEARMACROPHAGESAFTERINFECTEDWITHIBRVWASNOTFOUNDEDINAGAROSEGELELECTROPHESISFLUESCENCEMICROSCOPEDETECTIONTHEEFFECTOFIBRVONNOSECRETIONOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESWASDETECTEDBYGRIESSMETHODTHERESULTSSHOWSTHATTHENOSECRETIONHIGHERTHANCONTROLGROUPAFTERINFECTEDWITHIBRVP005REACHTOTHEHIGHESTLEVELAT24HAFTERPOISONTHEDYNAMICCHANGESOFEXPRESSIONOFSURFACEMOLECULESMHCI、MHCII、CD14、CD11AOFMONONUCLEARMACROPHAGESWEREDETECTEDBYFLOWCYTOMETRYTHERESULTSSHOWSTHATTHERELATIONSHIPBETWEENIBRVINFECTIONTHEEXPRESSIONOFCD14CD11AWHICHASSOCIATEDWITHANTIINFECTIONIMMUNITYISPOSITIVEREGULATIONBUTNEGATIVEREGULATIONWITHMHCIMHCIIEXPRESSIONWHICHRELATEDWITHANTIGENPRESENTATIONTHATISTOSAYBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESINFECTEDBYIBRVCANINFLUENCETHEEXPRESSIONLEVELOFCELLSURFACEMOLECULETHERESULTPROVEDTHATINSHTTIMETHEPHAGOCYTOSISFUNCTIONANTIGENPRESENTATIONFUNCTIONWEREDECREASEIMMUNEREGULATIONFUNCTIONWASAFFECTEDOFBOVINEMONONUCLEARMACROPHAGESAFTERINFECTINGWITHIBRVPROVIDEDTHEYEVIDENCEFFURTHERSTUDYTHEPATHOGENICMECHANISMOFIBRVKEYWDSIBRV；BOVINEMONONUCLEARMACROPHAGE；PHAGOCYTOSIS；CELLSURFACEMOLECULES；APOPTOSISDIRECTEDBYPROFZHOUWEIGUANG

簡介：單核細胞增生性李斯特菌HFQ基因缺失株的構建及其生物學特性研究研究生康美琴導師殷月蘭副教授焦新安教授中文摘要單核細胞增生性李斯特菌LISTERIAMONOCYTOGENES，LM是革蘭陽性的短桿菌，營腐生和寄生生活，是重要的食源性人獸共患病原菌。該菌在環(huán)境中廣泛分布，對低溫、酸堿和高滲透壓等環(huán)境抵抗力極強，是宿主譜較廣的兼性胞內(nèi)寄生菌。LM在各種環(huán)境中適應、生存并表現(xiàn)致病力，與調(diào)控因子的網(wǎng)絡調(diào)控密切相關。HFQ蛋白是LM中新發(fā)現(xiàn)的調(diào)控因子，在該菌生長代謝及毒力調(diào)控中的作用知之甚少。不同血清型LM的生態(tài)分布和致病性存在較大差異，本文分別以血清型為1／2A的標準株EGDE和4B的高毒力菌株NTSN為研究對象，利用同源重組技術構建了HFQ基因缺失的突變株及回復株，比較其與野生株對環(huán)境脅迫及小鼠致病特性，探索調(diào)控因子HFQ在LM致病及抵抗外界壓力方面的作用。1單核細胞增生性李斯特菌HFQ缺失株及回復株的構建與鑒定利用同源重組技術分別成功構建了單核細胞增生性李斯特菌EGDE菌株及NTSN菌株辦向基因的缺失株。在擴增出待敲除基因兩翼的同源片段之后，利用SOEINGPCR方法將其拼接在一起，插入穿梭載體PKSV7中，經(jīng)電轉(zhuǎn)化導入EGDE和NTSN感受態(tài)細胞中。通過溫度和氯霉素抗性壓力，實現(xiàn)兩次同源重組，對重組克隆用PCR方法和RTPCR方法進行鑒定，將陽性克隆命名為EGDEAHFQ、NTSNAHFQ。另外，將HFQ基因及其啟動子序列構建進PERL3質(zhì)粒中，通過電轉(zhuǎn)化的方法導入感受態(tài)細胞NTSNAHFQ中，獲得物基因回復株，命名為NTSNAHFQ一桷。對親本株、物缺失株及回復株的生長曲線、生理生化特性、溶血活性進行了測定。實驗結果表明，EGDEAHFQ、NTSNAHFQ的生長趨勢與野生株相似，溶血活性未發(fā)生明顯變化，但EGDEAHFQ喪失0【葡萄糖苷酶活性，NTSNAHFQ喪失亮氨酸芳胺酶LEUA活性及乳糖氧化能力LAC，表明桷基因的缺失對細菌正常的生長未造成明顯影響，但對碳源、氮源代謝途徑中的特定代謝通路造成一定的影響。2單核細胞增生性李斯特菌HFQ基因缺失株生物學特性研究HFQ蛋白廣泛存在于革蘭陰性菌和某些革蘭陽性菌中，能同時調(diào)控大量靶標基因的表鏖羞莖墊縫紲盥塑生世奎逝掛笪魚應基國筮塞拯的掬建叢墓生物堂掛世班窺CONSTRUCTIONANDCHARACTERIZATIONOFLISTERIAMONOCYTOGENESAHFQMUTANTSTRAINSMSCANDIDATEMEIQINKANGADVISORSASSOCIATEPROFYUELANYINPROFXIN’ANJIAOABSTRACTLILLLQ11111QLLLLLLLILLITTLLLILLLLLLLTLLLY2632990GRAMPOSITIVEBREVIBACTERIUMLISTERIAMONOCYTOGENESLMISANIMPORTANTZOONOTICFOODBOMEPATHOGENENGAGINGINBOTHSAPROPHYTISMANDPARASITISMASAFACULTATIVEINTRACELLULARPARASITICBACTERIUM，LMHASRELATIVELYBROADHOSTSPECTRUMINADDITION，ITHASSTRONGABILITYTOADAPTTOCOLD，ACID，ALKALINEANDOSMOTICSTRESS，THEREFORE，ITEXISTSWIDELYINNATUREUNDERDIFFERENTENVIRONMENTALSTRESSCHALLENGES，LMCANADAPT，SURVIVEANDDISPLAYPATHOGENICITY，WHICHISASSOCIATEDWITHTHEREGULATORYNETWORKCONSISTINGOFREGULATINGPROTEINSNFQPROTEINISANEWLYDISCOVEREDVIRULENCEREGULATORYFACTOROFLM，ANDCURRENTLYITISLITTLEKNOWNABOUTTHEROLEOFHFQINBACTERIALGROWTH，METABOLISMANDVIRULENCEREGULATIONTHEECOLOGICALDISTRIBUTIONANDVIRULENCEOFDIFFERENTSEROTYPESOFLMAREOBVIOUSVARIATIONS，WECHOSETHESEROTYPE1／2ASTANDARDSTRAINEGDEANDSEROTYPE4BVIRULENTISOLATENTSNASTHEPARENTALSTRAINS，ANDSUCCESSFULLYCONSTRUCTEDDELETIONSTRAINSOFHFQWITHHOMOLOGOUSRECOMBINATIONTECHNOLOGYTHENTHEABILITYOFSTRESSRESISTANCEANDVIRULENCETOMICEOFDELETIONMUTANTSTRAINSWEREEVALUATEDANDCOMPAREDWITHTHEIRPARENTALSTRAINS，INTHISWAYTHEROLEOFLMHFQPROTEININTHESTRESSTOLERANCEANDVIRULENCEWASPROBED1CONSTRUCTIONANDIDENTIFICATIONOFHFQGENEDELETEDANDREVERSELISTERIALSTRAINSBASEDONHOMOLOGOUSRECOMBINATIONTECHNOLOGY，WESUCCESSFULLYCONSTRUCTED物GENEMUTANTSTRAINSEGDEAHFQANDNTSNAHFQ，RESPECTIVELYFIRSTLYHOMOLOGOUSFRAGMENTSOFTARGETGENEWEREAMPLIFIED，THENSPLICEDTOGETHERWITHSOEINGPCRNEXTLYTHEFUSIONFRAGMENTSANDSHUTTLEVECTORPKSV7WEREDIGESTEDWITHDOUBLEENZYMESRESPECTIVELYTHENPURIFIED，LIGATEDANDTRANSFORMEDINTOCOMPETENTCELLECOLIDH5AAFTERIDENTIFIED，THERECOMBINANTPLASMIDSWERETRANSFORMEDBYELECTROTRANSFORMATIONTOCOMPETENTCELLSOFEGDEANDNTSNRESPECTIVELYUNDER

簡介：學校代碼分類號10126論文題目學號呈至Q墨魚壘編號HFAD3轉(zhuǎn)基因小鼠來源的胚胎干細胞生物學分析THEBIOLOGICALANALYSIS0FEMBRYONICSTEMCELLSFROM月砌3TRANSGENICMICE學院生盒型堂堂院專業(yè)動物堂研究方向喧塾動塑生殖生物堂區(qū)生物這苤姓名奎塞羞指導教師奎光鵬教授2015年6月本研究得到國家科技重大專項“高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因肉牛新品種培育2013ZX08007002，，課題的支持

簡介：浙江大學博士學位論文家蠶、野蠶染色體結構變異的細胞生物學研究姓名孟智啟申請學位級別博士專業(yè)特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)指導教師徐俊良200051約為總?cè)旧wI／8長度的一段區(qū)域，LANKY缺失為中間缺失。4．采用GIEMSA法研究了野蠶染色體的核型。野蠶染色體長度偶線期在卜31．TM之間，變異范圍小，在生物界屬予小染色體類。5．在250GY劑量率1．1GY／MIN”COY射線輻照下，輻照當代仍能正常生長、交尾、產(chǎn)卵，但輻照后的雌或雄與正常的雄或雌雜交產(chǎn)生的后代均表現(xiàn)為不育，經(jīng)對輻照當代的生殖細胞染色體進行顯微觀察，發(fā)現(xiàn)了缺失、易位、倒位等染色體異常結構，據(jù)此判明染色體結構畸變是造成后代不育的主要原因。6．對于Y射線輻照后的野蠶生殖細胞染色體顯微觀察發(fā)現(xiàn)了染色體斷裂一重接易位的細胞學證據(jù)。根據(jù)這一細胞學證據(jù)，關于野蠶染色體數(shù)地域差異的成因推論認為古野蠶染色體數(shù)N28，在棲息進化過程中，日本等地的野蠶因某種環(huán)境條件刺激，其中一條染色體發(fā)生斷裂，大的斷裂片段易位到非同源染色體后融合形成一條大染色體，小的片段在遺傳傳遞過程中丟失，致使染色體數(shù)N27，其后在進化演變過程中，該種群穩(wěn)定遺傳不斷擴大延續(xù)至今，形成了中國和日本二個地域野蠶亞種群。7．應用RAPD法對帶有性連鎖平衡致死基因L。、L。的雌蠶進行了PCR擴增。結果發(fā)現(xiàn)引物B1_OS’CTGCTGC_KBAC3’PCR擴增條帶在W“ZL“”和W“Z眥之間呈現(xiàn)多態(tài)性，即在W“1Z11。和WNZL?有一個約900BP的共同擴增片段ZWAL，但在WⅢZ”。上分別有一個650BPZWA3和800BPZWA2左右的特異片段，在W“1Z“M上分別有一個510BPZWALL和450BPZWAL2左右的特異片段。這四個片段可作為性連鎖平衡致死基因L，和L的特有標記。8．將上述四個特異性片段亞克隆，測序后通過互聯(lián)網(wǎng)向DDBJDNADATABASEOFJAPAN同源性檢索表明，ZWALL片段與家蠶的黃嘌呤脫氫酶基因的5’側(cè)翼區(qū)域有90％的同源性，初步斷定ZWALL是一個與喋啶類化合物代謝有關的基因片段；ZWA3片段與家蠶的BML反轉(zhuǎn)座因子的5’側(cè)翼區(qū)域有93％同源性，據(jù)此斷定ZWA3是BML反轉(zhuǎn)座因子片段；ZWA2和ZWAL2分別是FALCOPEREGRINUSCLONE5，L衛(wèi)星DNA片段和MLLEAGRISGALLOPAVO衛(wèi)星DNA片段。Ⅳ

簡介：單位代碼106350學號1120133170012900碩士學位論文碩士學位論文硬骨魚類膠質(zhì)細胞源神經(jīng)營養(yǎng)因子硬骨魚類膠質(zhì)細胞源神經(jīng)營養(yǎng)因子GDNF的分離鑒定、表達及生物學活性研究的分離鑒定、表達及生物學活性研究論文作者劉林燕指導教師魏靜（副教授）學科專業(yè)生物化學與分子生物學研究方向分子免疫與分子藥學提交論文日期2016年4月17日論文答辯日期2016年5月28日學位授予單位西南大學中國?重慶2016年4月理學碩士學位論文理學碩士學位論文生物化學與分子生物學專業(yè)碩士研究生生物化學與分子生物學專業(yè)碩士研究生劉林燕劉林燕指導教師指導教師魏靜魏靜副教授副教授西南大學生命科學學院西南大學生命科學學院二零一六年四月二零一六年四月中國中國重慶重慶

簡介：中國科學技術大學碩士學位論文同步輻射小麥引起的生物學效應血源與基因工程Α干擾素抑制貯脂細胞增殖及膠原合成的比較研究姓名趙凌申請學位級別碩士專業(yè)細胞生物學指導教師顧月華200141中國科學技術人學預上學位論文第一部分同步輻射對小麥引起的生物學效應摘要研究了不同劑量的同步輻射軟X射線源輻照小麥種子后產(chǎn)生的生物學效應，以期從細胞和分子水平蛋白質(zhì)、酶及DNA等上揭示同步輻射軟X射線源對生物體的誘變效應及其作用機制，為其應用于輻射育種提供理論依據(jù)。I我們進行了以下研究I檢測小麥幼苗細胞的脂質(zhì)過氧化作用及保護酶活性。可以看出，隨著同步輻射軟X射線劑量的增加，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛MDA的含量也隨之增加；在保護酶系統(tǒng)中，過氧化氫酶CAT、過氧化物酶POD、超氧化物歧化酶SOD的活性變化不表現(xiàn)出同步性，表明三者之間存在相互協(xié)調(diào)的關系，處理組葉綠素含量及葉綠體中關鍵的保護酶抗壞血酸過氧化物酶APX的活性始終低于空白對照組。結果表明同步輻射軟X射線輻照對于小麥細胞保護酶活性及脂質(zhì)過氧化作用的影響很大。II采用單細胞凝膠電泳方法檢測了同步輻射軟X射線源對DNA造成的單鏈損傷，通過測定DNA遷移效應，表明DNA損傷程度與輻照劑量呈顯著的正相關性。1ID采用TUNEL方法來進行原位細胞凋亡檢測，并結合DAPI熒光染色，表明同步輻射軟X射線源輻照小麥種子可以使之產(chǎn)生不同程度上的細胞凋亡。通過統(tǒng)計細胞凋亡率，也表明損傷程度與輻照劑量成『F相關性。以上實驗表明，作為一種新的誘變源，同步輻射軟X射線輻照麥類作物種子的生物學效應顯著，它不僅能夠?qū)π←溂毎z傳物質(zhì)造成損傷同時也能對相關的體內(nèi)保護酶系統(tǒng)產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用，因此應用同步輻射進行農(nóng)業(yè)育種將有、極大的發(fā)展?jié)摿颓熬啊?關鍵詞同步輻射軟X射線源；小麥細胞；脂質(zhì)過氧化；保護酶系統(tǒng)；單細胞凝膠電泳；細胞凋亡

簡介：中國農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文綿羊胚胎期血漿促性腺激素生物學活性的變化和垂體細胞體外無血清培養(yǎng)模型的建立姓名曹興元申請學位級別碩士專業(yè)生理學指導教師崔勝200261里奎些查堂墮主絲苧90、120天和分娩時分別為10．190．27NG／ML、9．320．13NG／ML、7．320．21NG／ML、7．02／0．29N咖1。∥／上洶研究結果提示『血漿B．FSH和B．LH在妊娠前期生物學濃度較骶，在妊娠中期生物學濃度達到最高，隨后生物學活性下降或保持恒定。并且雌雄胚胎BFSH和BLH之問存在著性別差異。與先前RIA方法對FSH和LH的研究相比，存在著較大的差異，說明促性腺激素生物學活性的測定方法比RJA方法更能準確反應胚胎期FSH和LH的生理功能。此外，本實驗還建立了綿羊垂體細胞體外無血清培養(yǎng)模型，并且對培養(yǎng)不同時間的垂體細胞進行了LHB的免疫細胞化學染色，以檢測培養(yǎng)過程中垂體細胞自主分泌LH的能力。結果在無血清培養(yǎng)4天后的垂體細胞，LHFL免疫陽性染色的細胞顯著性增加，說明此時垂體細胞具有較強的LH合成能力?！螇騊切紹論『2關鍵詞卵泡刺激素，促黃體生成素，綿羊胚胎，生物學活性，細胞培養(yǎng)，垂體，”1。。VX

簡介：揚州大學碩士學位論文馬立克氏病病毒類白細胞介素8基因表達及生物學特性研究姓名張鑫宇申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師秦愛建20030501塑矍盔蘭矍查蘭壘笙苧一一2分離盤滇，靂闋接受疫熒光法檢測撓俸滾度。蘇PERIL8擺矮粒與黼活疫鎣聯(lián)合免疫雛雞。試驗結果表明，試驗組與對照組抗體滴度無顯著荔異，這些結果表明，上述免疫途徑簸方法船入辯VLL一8，對梳體俸液免疫無疆顯靜調(diào)節(jié)依靂，然而透過其它途徑能否對機體免疫有調(diào)節(jié)作用還裔特進一步的研究。關鍵詞馬立克氏病病毒；病毒類白細胞介素8；序歹0分祈；表達；趨化性；兔疫源性；免疫調(diào)節(jié)

簡介：沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文利用分子生物學與細胞學技術檢測小型昆蟲的共生微生物沃爾巴克氏體（WOLBACHIA）姓名張照琳申請學位級別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導教師叢斌200361沈陽農(nóng)業(yè)大學硬士學位論文攘要沃爾巴克氏體WOLBACHIA是廣泛分布于節(jié)肢動物體內(nèi)的～類共生菌，通過生殖細胞盼細胞質(zhì)傳播，參與多種調(diào)控其宿主生糠活動的稅鑭，W隧誘導宿主發(fā)生生殖不親和、產(chǎn)雌弧雌生娥、雌性化等現(xiàn)象。研究沃爾巴克氏體對于了解昆蟲瓣生殖生物學、住剮決定稅制、物種遴純及天工調(diào)控昆蟲生殖行為方面意義麓大。試驗驀在建立沃爾澄克氏侮WOLBACHIA懿PCR技術襝溺體系，利用這一體系檢測沃爾巴克氏體在不同分類階元的小型昆墩中的分布；利用細胞學技術麓察沃爾巴克氐俸的努酃形態(tài)。附試驗綴采進行分拆，德弱戳下結論1利用三種昆蟲總DNA攝取的方演一SDS法、單個昆蟲總DNA提取法、CTAB法分裂褥蘩供試琵蟲卷娥券眼蜂TRICHOGRAMMACACOECIAE、食憝赤眼蜂TEMBRYOPHAGUM、玉米蠛赤眼蜂TOSTRINIAE、稻水象甲LISSORHOPTRUSORYZOPHILUSKUSCHE玟瀣室自羧氳TRIALEURODESVAPORARIORUMWESTWOOD、桃蚜MYZUSPERSICAESULZER和煙蚜黻蜂APHIDIUSGIFUENSISASHMEAD的總￡雕A。2三種昆蟲總DNA提取方法的OD比值和DNA濃度P∥P1的結果如下，SDS法138、066，L，57、14，L。43、06，154、L。2，L。38、0。54，L。56、150；單個昆煦總DNA提取法195、129，L，79、O75，150、O54，152、0。96，18E、O27，194、105；CTAB法16、ET3；L。9、L。77，L。57、O99，166、228，171、144。雖然三種方法的結果與研磨稷度、昆搬種類、蟲體大，L、稆個數(shù)套一定關系，但綜會寒說，CTAB法在試驗成本、聯(lián)提取惑DNA的濃度和質(zhì)量、PCR反應的效果和重復性三方砸優(yōu)于其他兩種方法，怒一種適臺提毅小型瞧蟲惑DNA的遙熙方法。3建立并驗證了沃爾巴克氏體的PCR技術檢測體系。PCR反應體系的終髂積為209L，含騫TUTAQDNA聚合酶期50～200NG模扳DNA。反應程序94。C3MIN94℃LMIN，55℃LMIN，72℃1RAIN，循環(huán)30次_72℃7MIN。4利用沃爾豈克氏體WSP基因的一對通用弓|物81F，691R，以7葶孛供試昆蟲的總DNA為模板進行PCR反應。從卷蛾赤眼蜂TCACOECIAP、食胚赤跟蜂TEMBRYOPHAGUM和稻水象甲三ORYZOPHILUS的總DNA中擴增到

簡介：中國林業(yè)科學研究院木材工業(yè)研究所博士學位論文毛白楊的形成層活動及其木材形成的組織和細胞生物學研究姓名殷亞方申請學位級別博士專業(yè)木材科學與技術指導教師姜笑梅20020625摘要摘要從組織和細胞水平上研究形成層細胞向木質(zhì)部細胞的分化，揭示木材的形成過程，是了解木材各種性質(zhì)成因的前提，也是開展木材形成的分子生物學研究的基礎。盡管已經(jīng)針對體外培養(yǎng)模式系統(tǒng)和針葉樹種開展了許多工作，但對于木質(zhì)部細胞類型多且木材結構復雜的闊葉樹種，己有的研究對其術材形成的過程和機理了解得還遠遠不夠。本研究是以形成層細胞向木質(zhì)部細胞的分化為主線，在組織和細胞水平上，從形成層的活動規(guī)律和木質(zhì)部細胞的分化過程，以及形成層細胞與其衍生木質(zhì)部細胞在解剖形態(tài)上的關系這三個方面，系統(tǒng)地研究了闊葉樹模式樹種MODELHARDWOODSPECIES毛白楊POPULUSTOMENTOSACARR．的木材形成過程。在形成層活動規(guī)律的研究中，通過光學顯微鏡LM觀察，明確了毛白楊形成層一個完整活動周期的活動式樣以及次生組織的分化方式。并采用聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE和過氧化物酶POD組織化學染色，了解了不同時期形成層帶POD的分布、POD同工酶的變化及其對次生木質(zhì)部分化的影響。利用透射電子顯微鏡TEM首次得到了毛白楊完整活動周期內(nèi)不同階段形成層帶超微結構的變化信息。在木質(zhì)部細胞分化過程的研究中，通過TEM和細胞化學染色技術，了解了細胞分化過程不同階段細胞壁和原生質(zhì)體超微結構的變化方式，并首次提出了闊葉樹種不同類型細胞分化過程的示意圖。采用冰凍切片和直接碳復型技術DCR，首次揭示了各類型細胞分化過程中纖維素微纖絲CMFS在細胞壁上的沉積方式，并提出了木纖維細胞壁上CMFS沉積方式的模式圖。應用免疫細胞化學方法結合激光共聚焦顯微鏡CLSM，首次得到了各類型細胞分化過程中周質(zhì)微管CMTS排列方式的動態(tài)變化情況，并討論了其與細胞壁上CMFS沉積方式的相互關系，研究結果為樹木木質(zhì)部細胞分化過程中CMTS排列方式控制細胞壁上CMFS沉積方式的假設提供了新的證據(jù)。通過KMN04溶液染色方法結合TEM觀察，了解了木質(zhì)素在細胞壁上的沉積方式。最后采用酶細胞化學定位方法，觀察了細胞分化過程中POD在細胞壁上的分布，并討論了POD的位置與細胞壁上木質(zhì)素沉積之間的關系。在形成層細胞與其衍生木質(zhì)部細胞解剖形態(tài)關系的研究中，應用定量解剖學和顯微圖像分析技術，得到了兩者的解剖特征在活動期的變化情況；采用X射線微密度測定技術，了解了同一生長輪內(nèi)木材密度沿徑向方向上的變異，討論了其與木質(zhì)部細胞解剖特征的關

簡介：浙江大學博士學位論文EGCG與銅離子的相互作用及其細胞生物學行為姓名于海寧申請學位級別博士專業(yè)茶學指導教師沈生榮20040201摘要據(jù)調(diào)查，在歐美，人類因患前列腺癌引起的死亡率現(xiàn)已位居第二，僅次于肺癌。據(jù)流行病學調(diào)查、細胞和動物實驗研究初步證實EGCG具有一定的預防、治療前列腺癌的作用。銅離子是人體必需的微量元素，過量積累或缺乏會導致多種疾病的發(fā)生，包括癌癥。金屬離子與兒茶素的相互作用是近年來茶葉生物化學和生物無機化學的研究熱點，而銅離子與EGCG的相互作用及其細胞生物學行為至今國內(nèi)外少有報道。本文利用前列腺癌細胞包括激素依賴型前列腺癌細胞LNCAP和非激素依賴型前列腺癌細胞PC一3培養(yǎng)體系研究了EGCG、CU”對前列腺癌細胞生長的影響和損傷機理；EGCG與CU2共存對前列腺癌細胞生長的影響，及兩者生物學活性的變化；細胞培養(yǎng)條件下EGCG含量變化速度；EGCG、CU2存在及兩者共存時，F(xiàn)12培養(yǎng)液發(fā)光強度的動態(tài)變化和自由基的產(chǎn)生情況。MTT法實驗結果發(fā)現(xiàn)，EGCG與CU2均能抑制LNCAP細胞和PC．3細胞的生長，并與劑量呈正相關，EGCG與CU2抑制作用的最佳作用時間均為24小時；加入CU“，只有EGCG與CU”的相對濃度較高時，EGCG對CU2誘導的LNCAP細胞毒性有一定的抑制作用，否則促進細胞死亡；在PC一3細胞培養(yǎng)體系中，CU”存在下，EGCG對CU”誘導的PC3細胞的毒性明顯減弱；LNCAP細胞培養(yǎng)體系中，當后加入CU”時，CU2對EGCG誘導的細胞毒性有極顯著促進作用，在同樣水平下，CU2對EGCG誘導的PC3細胞毒性無顯著影響。增加PC．3細胞體系中EGCG的濃度，CU2對EGCG誘導的PC．3細胞毒性有促進作用。而在EGCG存在下，CU2對LNCAP細胞的毒性顯著降低。PC3細胞體系中，低濃度EGCG對CU2誘導的細胞毒性明顯減弱，但高濃度EGCG對低濃度CU2誘導的PC．3細胞的毒性無影響，只有高濃度CU2誘導的PC．3細胞的毒性才能被抑制。當后加入EGCG時，只有EGCG與CUZ濃度比達到一定值時CU2對LNCAP細胞的毒性被抑制，而PC．3細胞體系中，EGCG對CU2誘導的毒性無影響。凝膠電泳及流式細胞儀測定結果表明，壞死是導致LNCAP細胞和PC．3細胞生長受到抑制的主要原因。利用透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)處理后的前列腺癌細胞多數(shù)呈壞死癥狀，細胞膜有不同程度的損傷，細胞膜是EGCG、CU2或兩者相互作用時對細胞損傷的主要作用位點。

簡介：浙江大學博士學位論文大麥根尖和邊緣細胞鋁毒生物學特性及其機理研究姓名潘建偉申請學位級別博士專業(yè)遺傳學指導教師朱睦元200251不可逆的過程。通過基因工程方法導入凋亡抑制基因是作物抗逆性遺傳改良的一條新策略，也是細胞凋亡研究成果的具體應用，目前國內(nèi)仍未見正式報道。本研究試圖通過農(nóng)桿菌介導法將凋亡抑制基因CED09導入煙草，獲得高耐鋁性的轉(zhuǎn)基因植株。結果表明，利用PGEM一7Z“載體上的SACI和XBAI位點，將PBS載體上的CED9基因成功地克隆到表達載體PBIL21含CAMV35S上，定名為PBITED一9。通過農(nóng)桿菌感染煙草葉盤，經(jīng)篩選、誘導和分化后，共獲得96株再生植株TO。經(jīng)PCR檢測和SOUTHERN雜交表明，目的基因CED9已整合到煙草基因組中。有關轉(zhuǎn)基因植株的CED9表達活性及其對生長發(fā)育的影響、耐鋁性鑒定將在TL、T2、T3代進行。根邊緣細胞BC研究是最近幾年植物學和遺傳學的新領域之一。本實驗表明，大麥CVHANG981BC發(fā)育啟動與根發(fā)育幾乎同步，這與豆科植物BC發(fā)育不同。在懸空氣培中，大麥BC發(fā)育屬于非組成型表達的過程。在水培中，每個根每天仍釋放300350個BC，屬于組成型表達過程。根冠PME活性檢測表明，大麥BC發(fā)育與PME活性具有密切的相關性，PME活性在BC游離過程中起著重要作用。溫度對大麥根伸長有明顯的抑制作用，但對BC發(fā)育影響不大。鋁毒對離體收集的BC活性影響非常明顯。大麥耐鋁品種CVHUMAI16的BC經(jīng)20和501TMOI／LAI處理后，其活性無顯著性差異，而敏感品種CV20002的BC活性卻受到顯著抑制，說明BC的耐鋁性與其個體植株水平的耐鋁性相一致。到目前為止，國內(nèi)外有關鋁毒對植物BC發(fā)育的影響仍未見正式報道。本實驗表明，鋁毒對大麥BC發(fā)育有明顯的抑制作用。20“M01／LAI對CV20002的BC發(fā)育有顯著性抑制PO05，但對CVHUMAI16的BC發(fā)育的影響不大。50UMOL／LAL對這兩個品種的BC發(fā)育均有顯著性抑制POOI。PME活性檢測表明，鋁毒很可能通過抑制根冠細胞壁PME活性從而抑制BC發(fā)育。另外，根據(jù)我們的實驗，BC及其粘液對鋁毒誘導的大麥根伸長抑制的保護功能很小。但在低濃度鋁或短時間護作用。關鍵詞細胞程序性死亡基因工程根邊緣細胞、／∥。V一定的保／甲基酯酶