簡介：汕頭大學醫(yī)學院碩士畢業(yè)論文碩士學位論文碩士學位論文題目題目KIBRA基因啟動子基因啟動子表觀遺傳學修飾改變對表觀遺傳學修飾改變對乳腺癌浸潤和乳腺癌浸潤和轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移影響的影響的研究研究英文題目英文題目THEINVESTIGATIONOFTHEEFFECTOFTHEEPIGEICCHANGESOFKIBRAGENEPROMOTERONBREASTCANCERINVASIONMETASTASIS姓名姓名劉雄劉雄學號1140808411408084所屬學院所屬學院理學院理學院導師姓名導師姓名李瑤琛李瑤琛教授教授專業(yè)生物化學與分子生物化學與分子生物學生物學入學日入學日期20142014年9月答辯日期答辯日期20172017年5月汕頭大學醫(yī)學院碩士畢業(yè)論文學位論文原創(chuàng)性聲明本論文是我個人在導師指導下進行的工作研究及取得的研究成果。論文中除了特別加以標注的地方外，不包含其他人或其它機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在論文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律責任由本人承擔。作者簽名日期年月日學位論文使用授權(quán)聲明本人授權(quán)汕頭大學保存本學位論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱；學?？蓪⒈緦W位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其它復制手段保存和匯編論文；學?？梢韵驀矣嘘P(guān)部門或機構(gòu)送交論文并授權(quán)其保存、借閱或上網(wǎng)公布本學位論文的全部或部分內(nèi)容。對于保密的論文，按照保密的有關(guān)規(guī)定和程序處理。作者簽名導師簽名日期年月日日期年月日

簡介：I例犬80000V填法醫(yī)學碩士學位論文學校代號學

簡介：◆，I學校代碼研究生學號10264M080101019上海海洋大學題碩士學位論文英文題目專業(yè)研究方向姓名指導教師甌江彩鯉配套系數(shù)量遺傳學分析及其逃逸后對野生群體的影響研究QUANTITATIVEGENETICSANALYSISFORTHECOMPLETESETLINESOFOUJIANGCOLORCOMMONCARPANDGENETICINFLUENCEOFTHEIRESCAPEES●J●●●0NWILDPOPULATION水產(chǎn)養(yǎng)殖水產(chǎn)動物種質(zhì)資源與種苗工程馬玉清王成輝教授二。一一年四月碩士學位論文答辯委員會成員名單姓名工作單位職稱備注李思發(fā)上海海洋大學教授主席趙金良上海海洋大學教授委員莊平東海水產(chǎn)研究所研究員委員劉至治上海海洋大學副教授委員劉至治上海海洋大學副教授秘書答辯地點C樓217答辯日期6月17日

簡介：光遺傳學技術(shù)利用基因編碼蛋白質(zhì)表達并結(jié)合光控和激光成像的手段為生物學研究提供了一種全新、無損、可逆、非侵入、超高時空分辨率的研究方法。光遺傳學的早期主要以神經(jīng)科學研究為主，利用第一代光遺傳學元件選擇性地觀察和控制腦中某類細胞的特定神經(jīng)活動，并取得了前所未有的成果。而近年來隨著不同種類的光遺傳學元件不斷地被發(fā)現(xiàn)和開發(fā)出來，其應用領(lǐng)域也在不斷地擴展。利用光遺傳學研究信號轉(zhuǎn)導成為時下熱門研究方向，通過光控蛋白的變構(gòu)、寡聚和解聚來達到人為控制細胞內(nèi)信號蛋白的活性進而調(diào)控信號轉(zhuǎn)導的目的，為人們研究細胞信號通路提供了極大的便利。除此之外，與其配套的研究工具顯微成像系統(tǒng)，光刺激系統(tǒng)以及相應的數(shù)學分析方法也如雨后春筍一般涌現(xiàn)出來，這些工具的出現(xiàn)更是使得光遺傳學的研究蓬勃發(fā)展起來。目前，利用基因工程和蛋白工程發(fā)現(xiàn)和改造的光遺傳學元件大致分為六類。這些元件中的光敏蛋白吸收光子能量后發(fā)生光化學反應，通過變構(gòu)和蛋白間的相互作用來控制標靶蛋白的互作和定位。研究者利用這些模塊化的工具可以實現(xiàn)光控細胞內(nèi)多條信號通路以及多種生理活動的目的。在此背景下，本文首先自行開發(fā)和搭建了一套可調(diào)式LED光刺激系統(tǒng)，利用CRY2CIBN這對光遺傳學元件結(jié)合環(huán)狀TIRFM顯微成像，實現(xiàn)可調(diào)式光控細胞內(nèi)PI3K（PHOSPHOINOSITIDE3KINASE）PI3，4，5P3AKT信號通路的研究，最后將這套系統(tǒng)運用到A549肺癌細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化EPITHELIALMESENCHYMALTRANSITION，EMT的調(diào)控研究當中，課題的主要研究工作如下1查閱文獻，探討實驗可行性。在開展課題前閱讀大量文獻，了解國內(nèi)外最新研究動態(tài)，對各研究優(yōu)缺點進行總結(jié)和討論分析。確定本課題的研究思路，提出一種基于CRY2CIBN元件的可調(diào)式光遺傳學研究方法，以及確定使用LED照明矩陣作為體外大規(guī)模光刺激的輔助照明工具，并結(jié)合時下腫瘤研究領(lǐng)域熱門的EMT作為應用切入點，進行應用研究。最后，對本課題的可行性進行理論分析，并得出理論依據(jù)。2設計并搭建LED光刺激系統(tǒng)?；谇懊娴奈墨I查閱以及理論分析，在低成本、低功耗、便捷和穩(wěn)定的條件下，設計搭建LED光刺激系統(tǒng)。選取460NN465NM的藍光LED燈珠作為光源，搭建一個44LED矩陣。使用STC89C52作為整個硬件裝置的MCU，焊接硬件電路。使用VISUALC60編寫上位機控制程序，通過設置不同參數(shù)來操控LED矩陣的刺激模式。最后利用藍牙連接上位機與下位機，實現(xiàn)無線通信，以便于在培養(yǎng)箱中使用該刺激系統(tǒng)。3在HELA細胞中實現(xiàn)可調(diào)式CRY2CIBN元件調(diào)控PI3KPI3，4，5P3AKT信號通路。設計實驗方案，確定不同刺激強度的LED照明刺激方案，確定顯微成像時間，以及拍攝細胞曝光時間和信號時序。培養(yǎng)細胞進行轉(zhuǎn)染，在單細胞情況下利用環(huán)狀TIRFM成像研究細胞內(nèi)PI3，4，5P3水平與光照強度的關(guān)系。大規(guī)模LED刺激下，利用免疫熒光和蛋白電泳等技術(shù)分析細胞內(nèi)AKT磷酸化水平與光照強度的關(guān)系。4將上述光遺傳學系統(tǒng)應用于A549肺癌細胞，實現(xiàn)光控細胞EMT的發(fā)生。設計實驗方案，確定A549細胞實驗中LED照明刺激參數(shù)，使用LED光刺激系統(tǒng)對轉(zhuǎn)染了光遺傳學元件的A549進行光刺激，利用蛋白電泳技術(shù)檢測細胞內(nèi)AKT磷酸化水平以及細胞中EMT的兩種標記蛋白ECADHERIN和VIMENTIN的表達量與光照強度的關(guān)系，并最終揭示PI3K信號通路在EMT誘導過程中的重要作用。

簡介：碩士學位論文學校代碼10357密級保密期限四合木TETRAENAMONGOIICA保護遺傳學研究及三種西鄂爾多斯瀕危植物微衛(wèi)星標記的篩選CONSERVATIONGENETICSOFTETRAENAMONGOIICAANDDEVEIOPMENTOFMICROSATELIITEGENETICMARKERSFORTHREEENDANGEREDPIANTSINWESTORDOSPIATEAU學號D15201026姓名一級學科孫平生物學二級學科細胞生物學指導教師張保衛(wèi)智穎飆完成時間2018年2月答辯委員會主席簽名。污毛潑一2刪7刪4川3川0川4川3川Y摘要西鄂爾多斯國家自然保護區(qū)位于內(nèi)蒙古自治區(qū)，因其獨特氣候、地形、地貌等，使它成為了許多珍稀動植物的“避難所”。本研究中共選取了4種國家級瀕危保護植物，分別是四合木TETRAENAMONGOLICA、蒙古扁桃AMYGDALUSMONGOLICA、沙冬青AMMOPIPTANTHUSMONGOLICUS、革苞菊TUGARINOVIAMONGOLICA，其中四合木、革苞菊是國家一級重點保護野生植物，蒙古扁桃和沙冬青均為國家二級保護植物。本研究主要分兩部分進行，一方面針對四合木種群，通過已開發(fā)的多態(tài)性較高的微衛(wèi)星分子標記研究其種群的遺傳多樣性、遺傳結(jié)構(gòu)、種群歷史動態(tài)等，為其遺傳保護提供重要的科學根據(jù)。另一方面，通過高通量測序技術(shù)手段，對蒙古扁桃、沙冬青、革苞菊3種植物進行SSR微衛(wèi)星位點的篩選?；谖⑿l(wèi)星對四合木8個地理居群339個個體進行遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)等分析，得到的結(jié)果如下1種群遺傳多樣性分析平均等位基因數(shù)MNA范圍在1317一1767，位點豐富度AR范圍686010529，觀測雜合度脅的范圍在0810。0。873，期望雜合度臃的范圍在08320882，因此可以看出本研究中8個四合木地理居群均具有較高的遺傳多樣性。2種群遺傳結(jié)構(gòu)分析遺傳距離FST范圍在000034004284，且大部分得到了顯著支持P005，表明8個地理居群之間的遺傳分化極其微弱。由聚類分析及相關(guān)因子分析FCA結(jié)果表明所有種群都高度重疊，這與遺傳距離的結(jié)果是一致的。所以四合木這8個地理居群應該看作一個整體的保護單元從而予以保護。通過高通量測序，對蒙古扁桃、沙冬青、革苞菊3個物種進行SSR微衛(wèi)星位點開發(fā)，結(jié)果如下1蒙古扁桃共開發(fā)出51對具有高多態(tài)性的位點，有效等位基因數(shù)ⅣA范圍是1325，觀測雜合度范圍在O875。1000，期望雜合度的范圍是08630946，。多態(tài)性信息含量PIC為O8540943，可作為蒙古扁桃群體遺傳結(jié)構(gòu)的可靠分

簡介：目的骨髓增生異常綜合征是骨髓造血干細胞惡性克隆性疾病，其起病及進展是由于造血干祖細胞形成優(yōu)勢惡性克隆而發(fā)病，本病生物學特征和發(fā)病機制是復雜的，造血微環(huán)境與造血細胞之間存在復雜的相互作用參與其無效造血過程，作為造血微環(huán)境關(guān)鍵組分骨髓間充質(zhì)干細胞具有類似的遺傳易感性及受損因素，其克隆是否受累，并藉此影響微環(huán)境生理功能導致調(diào)控造血異常而發(fā)病及進展，本研究通過建立MDS患者及正常對照的貼壁培養(yǎng)體系，體外分離擴增BMSC，初步評價MDS患者BMSC的生物學特征，包括形態(tài)學、免疫學表型及培養(yǎng)特征，并對分離所得BMSC細胞遺傳學特征進行分析，為BMSC是否參與MDS發(fā)病提供論據(jù)。方法收集我院血液科連續(xù)收治初診的22例MDS患者作為試驗組及7例正常體檢者作為對照，建立貼壁培養(yǎng)體系，分離擴增BMSC，根據(jù)形態(tài)學特征及流式細胞儀檢測表面抗原進行鑒定，初步分析MDS的BMSC的培養(yǎng)及細胞特征。進一步通過同時對造血細胞和BMSC進行胰酶GIEMSA技術(shù)GTG顯帶。根據(jù)ISCN2005要求，進行核型分析，并比較兩者間的細胞遺傳學特征。結(jié)果本研究組成功建立了體外培養(yǎng)分離擴增體系，經(jīng)光鏡、細胞化學染色流式細胞儀鑒定，證實MDS的BMSC具有典型的細長紡錘形的形態(tài)學特征及表達CD29，CD73，CD90反之不表達CD34，CD45，ALP非造血細胞的抗原特征，并初步評價其細胞培養(yǎng)特征顯示其體外細胞擴增傳代時間，細胞所獲中期分裂相與正常對照組比較無差異。明確了MDS患者BMSC也存在細胞遺傳學畸變64％，以染色體物質(zhì)不平衡畸變多見，尤其是缺失多見92％，其中克隆性缺失7例，占50％。并發(fā)現(xiàn)高比例的隨機丟失，不排除是其遺傳學不穩(wěn)定性的特征。HC與BMSC間沒有出現(xiàn)完全一致的畸變類型，HC正常核型的患者同樣也可存在畸變3例33％顯著低于異常核型患者比例92％。結(jié)論MDS患者BMSC具有典型的細長紡錘形的形態(tài)學特征及抗原特征，MDS患者BMSC體外增生及分裂增殖能力與正常對照無異。但存在細胞遺傳學畸變。染色體物質(zhì)不平衡畸變可能是其遺傳學不穩(wěn)定的標記，非造血起源的BMSC顯示有別于HC的畸變類型，提示兩者遺傳易感性相似但不完全相同。研究結(jié)果可間接的反應MDS患者BMSC存在功能性改變，盡管BMSC的染色體畸變可能沒有直接影響MDS克隆染色體畸變的類型，但是毋容置疑其在MDS發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。BMSC顯示的染色體畸變提示了其增強了MDS患者的遺傳易感性及BMSC在MDS發(fā)病機制中潛在作用，有助于我們進一步認識該疾病生物學特征，為MDS的診斷及治療提供新的途徑。

簡介：分類號分類號R76443密級密級聾病遺傳與環(huán)境相關(guān)高危因素的聾病遺傳與環(huán)境相關(guān)高危因素的流行病學研究流行病學研究ANEPIDEMIOLOGYSURVEYONTHEPREVALENCEASSOCIATEDRISKFACTSOFHEARINGLOSSINCHINA作者姓名作者姓名李倩李倩學科專業(yè)學科專業(yè)耳鼻咽喉科學專業(yè)耳鼻咽喉科學專業(yè)導師師王秋菊王秋菊教授教授答辯委員會主席答辯委員會主席論文答辯日期論文答辯日期二〇一二〇一四年五月年五月二十四二十四日院校地址院校地址北京市復興路北京市復興路28號郵政編碼郵政編碼100853軍醫(yī)進修學院軍醫(yī)進修學院研究生學位論文原創(chuàng)性聲明研究生學位論文原創(chuàng)性聲明秉承我院“敬業(yè)、勤奮、求實、創(chuàng)新”的學風，本人聲明所呈交的論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得我院或其他教育機構(gòu)的學位及證書而使用過的材料，對本文的研究作出貢獻的個人或集體，均已在文中做了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。論文作者簽名日期指導教師簽名日期軍醫(yī)進修學院軍醫(yī)進修學院研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人保證畢業(yè)離院后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為解放軍醫(yī)學院或解放軍總醫(yī)院。學院有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文原件、復印件和電子版本，可以采用影印、縮印、掃描或其他手段保存論文以供被查閱和借閱。學院可以公布學位論文的全部或部分內(nèi)容（保密內(nèi)容除外）。論文作者簽名日期指導教師簽名日期

簡介：分類號密級UDC單位代碼10435碩士學位論文不同品系比格犬部分血液學指標及遺傳多態(tài)性分析HEMATOLOGYINDEXGEICDIVERSITYANALYSISOFDIFFERENTTYPEBEAGLES研究生姓名劉宏指導教師尹燕博教授王冰副教授李楨副教授學科專業(yè)預防獸醫(yī)學研究方向動物傳染病防治與生物制品學中國青島二零一六年六月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權(quán)保留送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時間年月日導師簽名時間年月日

簡介：由于顱內(nèi)小血管病變或大血管狹窄導致長期大腦慢性缺血，進而引起腦白質(zhì)進行性損傷和認知功能障礙是造成血管性癡呆的常見原因。目前，臨床治療以預防引起血管病變的危險因素為主，除此之外并無有效的治療藥物，因此急需尋找新的具有針對性的藥物靶點和治療手段或策略。實驗室的前期研究發(fā)現(xiàn)長期慢性缺血會導致腦白質(zhì)區(qū)少突膠質(zhì)細胞死亡和髓鞘脫失，并且自身髓鞘再生也十分有限。谷氨酸能神經(jīng)元是腦內(nèi)重要的興奮性神經(jīng)元，谷氨酸可作用于少突膠質(zhì)前體細胞，并在發(fā)育過程中影響髓鞘形成。本文將解析皮層谷氨酸能神經(jīng)元調(diào)控腦白質(zhì)區(qū)的少突膠質(zhì)前體細胞的通路作用，并通過精準調(diào)控方法，研究其對慢性缺血后腦白質(zhì)區(qū)的少突膠質(zhì)前體細胞增殖及髓鞘再生的作用及機制。首先，本文利用逆軸突示蹤染料追蹤缺血損傷較為嚴重的腦白質(zhì)胼胝體區(qū)域的神經(jīng)投射，發(fā)現(xiàn)其存在大量來自運動皮層和感覺皮層的谷氨酸能神經(jīng)元的神經(jīng)投射。在慢性腦缺血早期，利用光遺傳學手段特異性激活表達光敏感通道CHR2的感覺（或運動）皮層的谷氨酸能神經(jīng)元可以明顯促進胼胝體少突膠質(zhì)前體細胞的增殖，減少缺血后少突膠質(zhì)前體細胞的丟失。但同時也發(fā)現(xiàn)，光遺傳學激活運動皮層會誘發(fā)驚厥，而激活感覺皮層未引起驚厥行為，并且也未引起感覺功能障礙，更具有安全性。進一步研究發(fā)現(xiàn)，慢性缺血后光遺傳學特異性激活皮層谷氨酸能神經(jīng)元產(chǎn)生的促進少突膠質(zhì)前體細胞增殖的作用具有強度選擇性和較寬的時間窗效應，過強或過弱的光強均不能促進前體細胞的增殖，并且在慢性缺血早期及中期激活感覺皮層谷氨酸能神經(jīng)元均有類似促進胼胝體區(qū)域少突膠質(zhì)前體細胞增殖的作用。而慢性缺血后光遺傳學激活抑制性神經(jīng)元，則不影響少突膠質(zhì)前體細胞增殖。進一步，本文利用腺相關(guān)病毒順向示蹤的手段研究其作用特點，發(fā)現(xiàn)胼胝體區(qū)域接受較多的來自上游皮層淺層（ⅡⅢ亞層）的谷氨酸能神經(jīng)元投射，且在慢性缺血早期只有光遺傳學特異性激活淺層的谷氨酸能神經(jīng)元或由其投射于胼胝體區(qū)的軸突纖維末梢能促進少突膠質(zhì)前體細胞的增殖。而皮層深層（Ⅴ和Ⅵ亞層）谷氨酸能神經(jīng)元則未見向胼胝體投射的軸突纖維，光激活深層谷氨酸能神經(jīng)元對少突膠質(zhì)前體細胞的增殖無影響。此外，在胼胝體區(qū)觀察到特異性激活谷氨酸能神經(jīng)元能促進谷氨酸能神經(jīng)元少突膠質(zhì)突觸聯(lián)系的形成。本文還構(gòu)建了少突膠質(zhì)前體細胞表達光敏感通道CHR2的轉(zhuǎn)基因小鼠，在慢性腦缺血早期光遺傳學直接激活胼胝體區(qū)的少突膠質(zhì)前體細胞，發(fā)現(xiàn)也能促進其增殖并促進慢性缺血后期的髓鞘再生。進一步研究發(fā)現(xiàn)，光遺傳學特異性激活感覺皮層谷氨酸能神經(jīng)元引起的增殖的少突膠質(zhì)前體細胞可以分化為成熟少突膠質(zhì)細胞，并有利于腦白質(zhì)修復，表現(xiàn)為髓鞘堿性蛋白MBP表達的增加、有髓軸突數(shù)目比例的增加和在新事物識別、水迷宮等模型中學習記憶能力明顯提高。綜上所述，本文利用光遺傳學手段特異性激活皮層淺層的谷氨酸能神經(jīng)元可以通過激活皮層淺層胼胝體的谷氨酸能神經(jīng)元少突膠質(zhì)細胞投射，明顯促進慢性缺血后胼胝體區(qū)域少突膠質(zhì)前體細胞增殖，并有利于髓鞘再生修復腦白質(zhì)和認知功能障礙的改善，這種調(diào)控作用具有較寬的作用時間窗，以及光強選擇性、腦區(qū)選擇性。本研究提示皮層淺層的谷氨酸能神經(jīng)元到腦白質(zhì)胼胝體的神經(jīng)元少突膠質(zhì)突觸聯(lián)系通路可能是潛在的對少突膠質(zhì)細胞進行精準干預的新途徑，為將來藥物研發(fā)及臨床精準治療慢性缺血引起的白質(zhì)損傷及認知功能障礙提供新的手段或策略。

簡介：背景眼皮膚白化病OCULOCUTANEOUSALBINISM，OCA是一組由于調(diào)控黑色素合成的基因發(fā)生遺傳變異而導致眼、皮膚和毛發(fā)色素沉著減少或缺乏的常染色體隱性遺傳病，常伴有眼部的病癥，例如畏光、斜視、中度到重度的視力障礙和眼球震顫等。由于患者的特征外貌比較引人注意，所以OCA也是最早被研究的遺傳性疾病之一。在中國漢族人群中，該病發(fā)病率約為1∶18000。OCA具有高度遺傳異質(zhì)性，目前至少已發(fā)現(xiàn)16個與OCA有關(guān)的基因，這些基因參與調(diào)節(jié)黑色素的合成和分布，臨床上可將其分為兩組非綜合征型和綜合征型。其中非綜合征型OCA，即僅有眼、皮膚和毛發(fā)受累的典型OCA，又可根據(jù)遺傳基因分成獨立的四種亞型OCA1～4，相關(guān)基因依次為TYR、OCA2、TYRP1、SLC45A2。四種OCA亞型無法從臨床上鑒別診斷，僅能根據(jù)其致病基因進行分型。目的對非綜合征型眼皮膚白化病患者進行遺傳學分析，查明致病原因，明確OCA分型，并為患兒父母再生育時的產(chǎn)前診斷提供依據(jù)。方法根據(jù)非綜合征型眼皮膚白化病各亞型在我國所占比例，對臨床確診或懷疑為OCA的患者，聯(lián)合運用SANGER測序和多重鏈接探針擴增技術(shù)MLPA依次對TYR、OCA2、SLC45A2、TYRP1基因進行突變分析，直至發(fā)現(xiàn)致病突變?yōu)橹?，并對檢出的未知突變在相關(guān)的家系成員和正常人群中作進一步的檢查。結(jié)果11名患者中9名檢出兩個致病突變，2名僅檢出一個，共檢出突變16種點突變13例、插入突變2例、大片段缺失1例，其中6種為未見報道的突變。根據(jù)致病基因劃分非綜合征型眼皮膚白化病亞型，11名患者中5例為OCA1（TYR基因）、5例為OCA2OCA2基因、1例為OCA4SLC45A2基因。結(jié)論聯(lián)合運用SANGER測序及MLPA技術(shù)可對非綜合征型眼皮膚白化病進行快速準確的診斷和分型，同時能在一定程度上提高該病基因突變的檢出率。

簡介：“ABCDEFGHIG11J1J

簡介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NOCODE10224NO1103117DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREESTUDYONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTIC，MYCELIALCOMPATIBILITYGROUPANDGENETICDIVERSITYOFSCLEROTINIASCLEROTIORUMINHEILONGJIANGPROVINCECANDIDATELIYICHUSUPERVISORPROFZHANGJUNHUADEGREECATEGORYMASTEROFAGRARINGENIEURCOLLEGENORTHEASTAGRICULTURALUNIVERSITYFIRSTLEVELDISCIPLINEPLANTPROTECTIONSECONDLEVELDISCIPLINEPLANTPATHOLOGYHARBINCHINAJUNE2014東北農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學碩士學位論文312菌落生長速度的測定27313菌核形成位置的觀察30314菌核大小形狀的測量31315菌核數(shù)量和重量的測量33316溫度對菌株的影響35317光照對菌株的影響39318PH值對菌株的影響4232黑龍江省不同地區(qū)大豆菌核病菌菌絲融臺群分析一4433黑龍江省大豆菌核病病菌SSR遺傳多樣性分析46331SSR引物篩選46332菌株SSR擴增結(jié)果47333菌株的聚類分析484討論5041菌株間形態(tài)學差異性分析5142菌株生長條件差異性分析5243菌絲親和群遺傳差異性研究5244SSR分子標記技術(shù)的遺傳差異性分析535結(jié)論54致謝一54參考文獻55攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文63

簡介：目的對1例臨床高度懷疑PRADERWILLI綜合征且合并橋本氏甲狀腺炎的患者進行快速準確的分子遺傳學診斷，以利于早期治療，并對其合并橋本氏甲狀腺炎的致病機制進行簡單的探討。資料與方法對門診以肥胖和矮小就診的1例患者根據(jù)1993年HOLM等提出的臨床診斷標準，高度懷疑PRADERWILLI綜合征，采用鹽析法提取基因組DNA并經(jīng)亞硫酸鹽修飾，應用甲基化特異性PCR，擴增產(chǎn)物以瓊脂糖凝膠電泳分離。結(jié)果2個正常對照顯示母源174BP和父源100BP兩條帶，而患者只顯示母源174BP一條帶，這提示該患者存在父源等位基因缺陷。未經(jīng)處理的DNA則一條帶也未顯示，這是由于這兩對引物設計來自修飾后的DNA模板。該患者確診為PRADERWILLI綜合征。根據(jù)患兒甲狀腺功能檢測結(jié)果及臨床表現(xiàn)確診為PRADERWILLI綜合征合并橋本氏甲狀腺炎。結(jié)論甲基化方法結(jié)果與臨床診斷吻合度高，是PRADERWILLI綜合征快速又準確的診斷方法，可應用于臨床上胎兒期對于胎動減少的胎兒進行產(chǎn)前檢查，新生兒期對伴有肌張力低下、喂養(yǎng)困難等癥狀的新生兒進行臨床篩查，以及對門診以肥胖和矮小就診的不典型患者進行確診。PRADERWILLI綜合征合并橋本氏甲狀腺炎的機制可能由于PWS患者內(nèi)分泌紊亂導致機體內(nèi)環(huán)境失衡而影響到機體的免疫系統(tǒng)，其機制還有待于進一步研究。

簡介：先天性脊柱側(cè)凸CONGENITALSCOLIOSIS，CS是一種脊柱側(cè)向彎曲大于10°的先天性椎體畸形。據(jù)報道CS在新生兒的發(fā)病率約為051‰，約占全部脊柱側(cè)凸畸形的519％，居脊柱側(cè)凸的第二位。CS的脊椎畸形可以獨立存在，也可合并其他系統(tǒng)畸形，如中樞神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)、消化道和心血管系統(tǒng)等畸形。本病具有進展快、畸形重、并發(fā)癥多等特點，嚴重時可造成患者身心問題甚至癱瘓，給家庭和社會造成極大負擔。由于其確切病因不明，目前尚無有效的預測手段，治療仍以支具或手術(shù)治療來緩解病情發(fā)展為主，因此探尋其發(fā)病原因，對于從病因?qū)W領(lǐng)域控制發(fā)病率、早期診斷和早期干預這種嚴重致殘性脊柱畸形疾病、緩解家庭和社會負擔具有重要意義。CS可由基因異?；颦h(huán)境因素變化導致，隨著越來越多的遺傳學病因報道，遺傳因素在CS發(fā)病中起到的作用逐漸被人們重視。脊柱是由胚胎時期的體節(jié)發(fā)育而來。因此體節(jié)發(fā)育過程所涉及的基因變異可導致椎體畸形的發(fā)生。體節(jié)的周期性生成與前體節(jié)中胚層中同步的基因表達振蕩密切相關(guān)，即體節(jié)分節(jié)時鐘。體節(jié)形成過程中主要受NOTCH、FGF和WNT信號通路調(diào)節(jié)，其中NOTCH信號在分節(jié)時鐘和體節(jié)邊界形成中均起重要作用。近期發(fā)現(xiàn)的TBX6基因的缺失等高致病性無效變異聯(lián)合一個TBX6亞效等位基因可導致CS，解釋了約10％的CS患者的發(fā)病機制。目前認為，TBX6基因?qū)е伦刁w畸形的作用機制主要為TBX6基因通過調(diào)節(jié)與體節(jié)發(fā)育相關(guān)通路的基因轉(zhuǎn)錄，調(diào)控下游DLL1、MESP2和RIPPLY2等基因表達來影響脊柱的發(fā)育，而DLL1是NOTCH信號通路的直接靶點。因此，TBX6基因與NOTCH信號通路有明確的相互作用。NOTCH信號通路在CS致病機制中可能同樣起到重要作用。研究目的1明確NOTCH信號通路中骨骼畸形相關(guān)基因。2從信號通路角度出發(fā)，通過NOTCH信號通路相關(guān)基因外顯子捕獲測序（后簡稱捕獲測序）明確NOTCH信號通路在CS中的貢獻率。3篩選捕獲測序檢測陰性的病例，通過全外顯子測序WHOLEEXOMESEQUENCING，WES，明確是否存在捕獲測序未檢測到的NOTCH信號通路相關(guān)基因，并進一步探索CS遺傳學病因。研究方法確立入組和排除標準，在前期研究基礎(chǔ)上繼續(xù)收集就診于北京協(xié)和醫(yī)院的CS患者的臨床資料和外周血樣標本，擴大研究隊列。通過美國國家生物技術(shù)信息中心NATIONALCENTERFBIOTECHNOLOGYINFMATION，NCBI和京都基因與基因組百科KYOTOENCYCLOPEDIAOFGENESGENOMES，KEGG公共數(shù)據(jù)明確NOTCH信號通路基因列表，并通過檢索和回顧文獻，篩選出與骨骼畸形相關(guān)的基因。通過NOTCH信號通路相關(guān)基因外顯子捕獲測序，對非TBX6突變的CS患者進行基因檢測和分析。再篩選捕獲測序結(jié)果陰性的患者，收集核心家系進行全外顯子測序，明確是否存在捕獲測序基因未覆蓋的NOTCH信號通路基因，并進一步探索CS的遺傳學病因。研究結(jié)果1明確了NOTCH1，NOTCH2，JAG1等NOTCH信號通路中的11個基因與骨骼畸形相關(guān)。2在292例散發(fā)CS患者中，通過捕獲測序發(fā)現(xiàn)了8個高致病性NOTCH信號通路相關(guān)基因變異。3通過WES，4個核心家系均未發(fā)現(xiàn)捕獲測序測序基因以外的NOTCH信號通路相關(guān)基因的高致病性變異。而其中1例患者發(fā)現(xiàn)了MYH3基因突變，可能是新的CS致病基因。研究結(jié)論1NOTCH信號通路對CS發(fā)病有重要貢獻，其相關(guān)基因可能是CS的關(guān)鍵致病基因。2該捕獲測序可較好的檢出骨骼畸形相關(guān)NOTCH信號通路基因突變。而WES可作為捕獲測序檢測的補充，可能發(fā)現(xiàn)捕獲測序基因以外的NOTCH信號通路基因，并且可能發(fā)現(xiàn)新的致病基因。3MYH3基因可能是CS的重要致病基因。

簡介：動脈粥樣硬化（ATHEROSCLEROSIS）是一類嚴重影響人類身體健康的疾病，由動脈粥樣硬化導致的心腦血管疾病包括冠心病、腦卒中已經(jīng)成為現(xiàn)代社會中最主要致死和致殘的原因。動脈粥樣硬化疾病的發(fā)生由環(huán)境因素和遺傳因素共同決定，且多呈復雜性遺傳模式。通過家系定位克隆和候選基因關(guān)聯(lián)分析，已經(jīng)認識到一些基因在動脈粥樣硬化的過程中發(fā)揮著作用。近年來，隨著全基因組關(guān)聯(lián)分析（GENOMEWIDEASSOCIATIONSTUDY）的開展，發(fā)現(xiàn)了一些基因和SNP位點對于人群中動脈粥樣硬化發(fā)生風險相關(guān)，在很大程度上增加了我們對動脈粥樣硬化分子遺傳機制的理解。但目前的大多數(shù)全基因組關(guān)聯(lián)分析是在歐洲裔白人群體中進行，其研究結(jié)果并不一定能夠完全適用于中國人群，因此尋找中國人群特異性與動脈粥樣硬化相關(guān)的基因和位點，以及發(fā)現(xiàn)已報道位點在中國人群中是否具有不同的遺傳表現(xiàn)形式，是我們在動脈粥樣硬化疾病分子遺傳學研究的重點之一。本研究通過病例對照研究，對兩個SNP位點與中國漢族人群動脈粥樣硬化的關(guān)聯(lián)進行了研究。第一部分多態(tài)RS11206510與中國漢族人群冠心病、缺血性腦卒中和低密度脂蛋白濃度的關(guān)聯(lián)研究之前的多個不同的全基因組關(guān)聯(lián)分析研究結(jié)果均顯示，位于染色體1P32區(qū)域的SNP位點RS11206510的大等位T與歐洲裔白人群體中血清低密度脂蛋白濃度（LDLC）以及冠心?。–AD）的風險顯著相關(guān)，但是該位點是否也與中國漢族人群LDLC濃度和CAD風險相關(guān)，以及是否與缺血性腦卒中相關(guān)需要進一步的研究。通過對一個1415例樣本的普通人群群體的研究，我們分析了RS11206510與中國漢族人群血清LDLC是否存在關(guān)聯(lián)，結(jié)果顯示RS11206510的小等位C，而非大等位T對于中國漢族人群血清LDLC濃度的增加具有風險（矯正后PADJ0002）。同時，我們在一個包含1543例CAD病例和1240例冠心病對照的群體中，研究了RS11206510與冠心病之間的關(guān)聯(lián)。結(jié)果顯示RS11206510小等位C顯著增加早發(fā)型冠心病群體中（男性≤50歲，女性≤55歲，病例380例，對照1240例）冠心病發(fā)生的風險（PADJ0002，189），但在總冠心病群體和遲發(fā)型冠心病群體中二者沒有顯著關(guān)聯(lián)（總冠心病群體PADJ082，遲發(fā)型冠心病群體PADJ050）。為研究RS11206510是否也與缺血性腦卒中相關(guān)，我們在兩個獨立的缺血性腦卒中群體中對RS11206510與缺血性腦卒中的關(guān)聯(lián)進行了研究。在樣本主要來自中國北方地區(qū)居民的GENEIDNTH群體中（1205例病例樣本，1205例對照樣本），RS11206510小等位C顯著增加缺血性腦卒中發(fā)生的風險（PADJ113X105，171。在另外一個獨立群體GENEIDCENTRAL中，樣本主要來自華中地區(qū)，其中病例692例，對照樣本882例，RS11206510小等位C亦與缺血性腦卒中發(fā)生風險顯著相關(guān)（PADJ932X105，170）。我的研究結(jié)果顯示RS11206510的小等位C與中國漢族人群LDLC濃度和早發(fā)型CAD是顯著相關(guān)的，并且，我們首次發(fā)現(xiàn)RS11206510與缺血性腦卒中顯著相關(guān)。第二部分APJ基因多態(tài)性與中國漢族人群動脈粥樣硬化以及左室收縮功能不全的關(guān)聯(lián)分析動物模型和細胞學研究發(fā)現(xiàn)，APELIN和其受體APJ組成的信號通路與心衰、血壓調(diào)節(jié)等顯著相關(guān)，此外還發(fā)現(xiàn)其可能與動脈粥樣硬化相關(guān)。之前的GWAS研究發(fā)現(xiàn)，位于APJ受體基因5’上游的一系列SNP位點與腦卒中顯著相關(guān)，且其中位于APJ核心啟動區(qū)域的SNP位點RS9943582具有功能性改變，能夠通過改變與SP1轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合能力而影響啟動子的轉(zhuǎn)錄活性，該位點可能是一個重要的具有功能學意義的致病位點，其與動脈粥樣硬化的關(guān)系需要進一步研究，而且APJ受體與心衰的發(fā)生具有較強的聯(lián)系，RS9943582還可能與心衰具有關(guān)聯(lián)。我們通過一個冠心病研究群體（1751例病例，1022例對照樣本）和一個缺血性腦卒中研究群體（1158例病例，1265例對照樣本），發(fā)現(xiàn)RS9943582與中國漢族冠心病和腦卒中均無顯著關(guān)聯(lián)（冠心病群體PADJ022，缺血性腦卒中PADJ086）。在兩個群體中，對性別和高血壓進行分層分析之后，也沒有發(fā)現(xiàn)顯著關(guān)聯(lián)。將1751例CAD患者根據(jù)心臟超聲左室射血分數(shù)LVEF分為CAD伴左室收縮功能障礙組（LVEF＜40％，431例）以及CAD且左室收縮功能正常組（LVEF＞50％，1046例）之后，發(fā)現(xiàn)CAD伴左室收縮功能障礙組與CAD且左室收縮功能正常組相比，RS9943582的A等位顯著增加CAD病人中左室收縮功能障礙的風險（PADJ671105，值為143）。此外，在RS9943582還與心臟超聲檢查數(shù)量性狀如舒張末期左室內(nèi)徑、左房大小以及LVEF顯著相關(guān)。通過我們的研究，發(fā)現(xiàn)RS9943582可能與中國漢族人群冠心病和缺血性腦卒中無顯著關(guān)聯(lián)，但是可能顯著增加冠心病發(fā)生后發(fā)生左室收縮功能障礙的風險。我們的研究結(jié)果從遺傳學的角度揭示APJ基因可能與心衰發(fā)生過程相關(guān)，RS9943582可能用于預測冠心病的預后，特別是左室收縮功能障礙的發(fā)生。