簡介：安徽醫(yī)科大學碩士學位論文目錄中英文縮略詞表1中文摘要2英文摘要51引言82材料與方法1121實驗材料11211實驗細胞與細菌11212試劑112１3儀器與設備11２２實驗內(nèi)容與方法11２２１細菌培養(yǎng)11２２2革蘭氏染色122２3細胞培養(yǎng)12２２４ATBRAPIDID32A系統(tǒng)鑒定12２２５16SRDNA測序分析13２２６系統(tǒng)發(fā)育樹分析13２２７痤瘡丙酸桿菌與HACAT細胞共培養(yǎng)14２２８統(tǒng)計方法143實驗結(jié)果14３１臨床研究14安徽醫(yī)科大學碩士學位論文1中英文縮略詞表英文縮寫英文全名中文全名PMHPROGRESSIVEMACULARHYPOMELANOSIS進行性斑狀色素減少癥IFNΓINTERFERONGAMMAΓ干擾素IL6INTERLEUKIN－6白介素－６TNFΑTUMNECROSISFACTΑ腫瘤壞死因子－ΑNCBINATIONALCENTERFBIOTECHNOLOGYINFMATION美國國立生物技術信息中心NCTCNATIONALCOLLECTIONOFTYPECULTURES美國國家標準菌庫DNADEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核酸AFLPAMPLIFIEDFRAGMENTLENGTHPOLYMPHISM擴增片段長度多態(tài)性PACNESPROPIONIBACTERIUMACNES痤瘡丙酸桿菌

簡介：同等學力人員碩士學位論文論文題目協(xié)同刺激分子B7H1和B7H3在自發(fā)性流產(chǎn)患者的表達及其生物學意義研究生姓名李采霞指導教師姓名施勤專業(yè)名稱免疫學研究方向自身免疫論文提交日期2013年10月協(xié)同刺激分子協(xié)同刺激分子B7H1和B7H3在自發(fā)性流產(chǎn)患者的表達及其生物學意義在自發(fā)性流產(chǎn)患者的表達及其生物學意義中文摘要中文摘要I中文摘要目的研究可溶性B7H1SB7H1在正常、妊娠、自發(fā)性流產(chǎn)和自發(fā)性流產(chǎn)后再妊娠者外周血血清中的含量，以及可溶性B7H3SB7H3在正常、妊娠、自發(fā)性流產(chǎn)和復發(fā)性流產(chǎn)外周血血清中的含量，分析其表達的差異。同時研究B7H1和B7H3在正常妊娠行人工流產(chǎn)者（孕三個月內(nèi)）和自發(fā)性流產(chǎn)者（流產(chǎn)后三個月內(nèi)）的絨毛膜和蛻膜表達情況，探討協(xié)同刺激分子B7H1和B7H3在妊娠免疫中的生物學意義，為自發(fā)性流產(chǎn)的早期診斷提供實驗依據(jù)。方法利用酶聯(lián)免疫實驗ELISA的方法分析SB7H1在正常未孕者52例、正常妊娠者49例（孕三個月內(nèi)）、自發(fā)性流產(chǎn)者52例（流產(chǎn)后三個月內(nèi)）、自發(fā)性流產(chǎn)后再妊娠者17例（孕三個月內(nèi)）血清含量，SB7H3在正常未孕者37例、正常妊娠者123例（孕三個月內(nèi)）、自發(fā)性流產(chǎn)者147例（流產(chǎn)三個月內(nèi)）、復發(fā)性流產(chǎn)者44例（流產(chǎn)三個月內(nèi)）血清含量。利用GRAPHPADPRISM5軟件進行非配對T檢驗。收集正常妊娠行人工流產(chǎn)術組的絨毛膜（19例）和蛻膜（20例）以及自發(fā)性流產(chǎn)組的絨毛膜（21例）和蛻膜（21例），通過免疫組化的方法，分析B7H1和B7H3在不同組織中的表達情況。結(jié)果SB7H1在正常對照組、妊娠組、自發(fā)性流產(chǎn)和自發(fā)性流產(chǎn)后再妊娠組的血清標本的平均含量為0466700081NGML、0484600088NGML、0491510130NGML、0504700173NGML。SB7H1的表達在四組之間不存在顯著性差異P005；SB7H3在正常對照組、妊娠組、自發(fā)性流產(chǎn)組、復發(fā)性流產(chǎn)組的血清標本的平均含量為595104917PGML、20239793PGML、10004160PGML和76855166PGML。SB7H3外周血的表達量為妊娠組高于自發(fā)性流產(chǎn)組；自發(fā)性流產(chǎn)組高于復發(fā)性流產(chǎn)組；復發(fā)性流產(chǎn)組高于正常對照組，各組之間存在顯著性差異P005；在蛻膜的表達評分兩組存在顯著性差異，人工流產(chǎn)組評分高于自發(fā)性流產(chǎn)組P005。人工流產(chǎn)組和自發(fā)性流產(chǎn)組中B7H3在絨毛膜的表

簡介：點擊查看更多基于CD4立體構型設計的小分子免疫抑制劑的生物學評價.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院博士學位論文CN0口腔鱗癌哨位淋巴結(jié)活檢的相關研究臨床、病理及分子生物學姓名布靜秋申請學位級別博士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師步榮發(fā)20050522軍醫(yī)進修學院博L學位論文英文縮略詞表SLNSLNBHSHIHCOSCCOMRNDSONDSNDSENTINELLYMPHNODESENTINELLYMPHNODEBIOPSYFLUORESCENCEINSITUH3BRIDIZATIONIRNMUNOHISTOCHEMISTRYORALSQUAMOUSCELLCARCINOMAOCCULTMETASTASISRADICALNECKDISSECTION，SUPRAOMOHYOIDNECKDISSECTION，．SELECTIVENECKDISSECTION，．1

簡介：四川大學碩士學位論文應用分子生物學方法鑒定從一例泛發(fā)性紅色毛癬菌病患者6個不同部位分離的菌株姓名青春申請學位級別碩士專業(yè)皮膚性病學指導教師冉玉平周光平20060501四川大學臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論文應用分子生物學方法鑒定從一例泛發(fā)性紅色毛癬菌病患者6個不同部位分離的菌株研究生青春導師冉玉平教授周光平教授摘要紅色毛癬菌是最重要的皮膚癬菌之一，常侵犯人的皮膚、指趾甲，其引起的皮膚癬菌病病程長、難治愈、易復發(fā)。傳統(tǒng)的紅色毛癬菌的鑒定依據(jù)形態(tài)學和生化特性，某些不典型株不產(chǎn)生紅色色素時，與須癬毛癬菌難以鑒別。紅色毛癬菌在傳代過程中容易喪失或改變某些表型特征，給鑒定帶來諸多困難。形態(tài)學和生化鑒定不能解決復發(fā)、再感染和多部位感染的問題，在種內(nèi)分型時也缺乏穩(wěn)定性。因此迫切需要快速準確的鑒定、分型方法來適應臨床診斷的需要。目的；將傳統(tǒng)鑒定方法和分子生物學方法相結(jié)合，鑒定和分析從一例泛發(fā)性皮膚癬菌病患者6個不同部位分離的6株紅色毛癬菌，以確定該患者6個部位是否為同一株紅色毛癬菌的感染，從而建立一種快速、穩(wěn)定的分子生物學鑒定方法。方法用形態(tài)學和生化方法初步鑒定6個部位的致病真菌。采用改良氯化芐法提取6株致病真菌的基因組DNA，利用通用引物ITSI和ITS4擴增其ITS區(qū)，通過測序和序列對比從基因水平再次鑒定6株致病真菌。根據(jù)RAPD技術和TRSI／TRS一2區(qū)擴增產(chǎn)物判斷6菌株的異同。

簡介：哺乳動物肝臟具有強大的再生能力，一般情況下，人的肝臟在受損后3天之內(nèi)啟動肝再生，23周后肝臟功能基本恢復，36個月后肝臟大小可恢復到與受損前一樣。而成年哺乳動物肝細胞大部分長期處于G0期，只有當肝臟在部分切除或受到損傷時，殘余肝細胞才能進行快速的分裂，進而使殘余肝組織代償性增生。因此，作為一種器官、組織再生的理想模型，肝臟損傷及其再生的分子生物學機制一直是人們研究的熱點課題之一。我國是一個肝病大國，病毒性肝炎、肝硬化與肝癌病人數(shù)在12億左右，因而深入肝細胞損傷與再生的分子生物學機制研究，開發(fā)治療肝損傷的藥物，具有十分重要的社會意義。肝刺激物HEPATICSTIMULATSUBSTANCE，HSS是一種能特異啟動并促進肝細胞增殖的活性物質(zhì)。近30年來，國內(nèi)外學者圍繞肝再生的機制，對動物源及人源的HSS作了大量深入的研究，對其組織來源、理化性質(zhì)、分離純化、生物學性能以及應用前景等都有了較深入的了解，但始終未能分離得到具有生物活性的HSS純品，無法確定其分子結(jié)構，對其作用機理的研究也還有待闡明。我們實驗室從上世紀80年代開始致力于肝刺激物的分離純化研究，獲得了一種相對分子量在1030103DA之間，能特異刺激肝源細胞增殖，對CCL4引起的肝損傷具治療作用的細胞組分，命名為人肝細胞生成素HEPATOPOIETIN，HPO，并于1995年獲得美國專利。但由于其純度未能達到氨基酸序列測定的標準，所以始終未能獲得其氨基酸序列，從而不能確定其真正的身份。在本研究中，我們采用DEAECELLULOSE和SOURCE15Q離子交換層析、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后割膠回收的方法從新生小牛肝臟中分離得到了三個具有體外促進肝癌細胞增殖的蛋白質(zhì)，經(jīng)多次富集后進行QTOF質(zhì)譜測序，鑒定出其中之一是一個富亮氨酸的酸性核蛋白LEUCINERICHACIDICNUCLEARPROTEIN，LANP，其同源的人源體是PP32。PP32是一個多功能的酸性核蛋白，在正常組織可自我更新的細胞和腫瘤組織中都有較高水平的表達。研究發(fā)現(xiàn)其在細胞的信號轉(zhuǎn)導、蛋白質(zhì)降解、細胞骨架動力學以及形態(tài)發(fā)生等過程中都參與作用，但體外促進肝細胞增殖方面目前沒有報道，因此我們也將次蛋白命名為HPOX。為了進一步驗證其促增殖活性并對其作用機理作更加深入的研究，我們分別從人胎肝CDNA文庫和HL60細胞中擴增HPOX和PP32基因，測序結(jié)果顯示HPOX的核苷酸序列與PP32不完全一致，而與GENEBANK中PP32的一個同源蛋白序列號XM496065相同，但PP32的N端和C段結(jié)構域在HPOX中依然存在。分別將HPOX和PP32基因構建到原核表達載體PET24A中，獲得重組PET24AHPOX和PET24APP32質(zhì)粒，將其轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21中，并誘導表達重組蛋白。獲得HPOX和PP32的重組蛋白后，檢測其體外促進肝源細胞增殖的活性。結(jié)果表明重組HPOX蛋白能夠明顯促進SMMC7721肝癌細胞的增殖，使其DNA合成較對照提高近20倍。為驗證HPOX作為一種核蛋白在細胞中所起的作用，我們構建HPOX的真核表達載體PEGFPN1HPOX，將其轉(zhuǎn)染到肝癌細胞中表達，一方面觀察其亞細胞定位，另一方面觀察HPOX在肝癌細胞中的過表達對細胞周期的影響。結(jié)果表明EGFPHPOX融合蛋白主要在細胞核中表達，但細胞質(zhì)中也有少量表達，轉(zhuǎn)染PEGFPHPOX的SMMC7721細胞顯示出明顯生長抑制。由此可以推斷HPOX在細胞內(nèi)和細胞外有完全不同的生物學作用，可能與其作用機制的不同有關。我們還對HSS粗提物促進SMMC7721肝癌細胞系增殖的作用機制做了初步研究。首先，觀察了HSS粗提物對肝癌細胞中MAPK磷酸化的影響，之后我們又觀察了HSS粗提物對SPK的調(diào)節(jié)作用，并進一步分析了SPKS1P在HSS刺激肝細胞增殖中的作用。結(jié)果表明，HSS能顯著增加MAPK的磷酸化，并能激活SPK活性，增加細胞中S1P的水平，提示在HSS作用的信號通路中，MAPK和SPK的共同發(fā)揮作用。

簡介：目的人體各系統(tǒng)的生理活動均具有明顯的節(jié)律現(xiàn)象，從分子生化現(xiàn)象、組織器官的生理活動、直至個體的心理行為幾乎都存在著不同頻率的周期性波動。依照節(jié)律的周期長短可將之分為三種類型1、近日節(jié)律CIRCADIANRHYTHM，或稱晝夜節(jié)律，DIUMALRHYTHM，節(jié)律周期接近24小時，一般為20～28小時；2、超日節(jié)律ULTRADIANRHYTHM，節(jié)律周期明顯短于24小時，一般短于20小時；3、亞日節(jié)律INFRADIANRHYTHM，節(jié)律周期顯著長于24小時，一般長于28小時。在人類最為常見且研究最多的是近日節(jié)律，心血管系統(tǒng)的多數(shù)生理與病理現(xiàn)象均屬此類。近年研究發(fā)現(xiàn)，人體血壓呈現(xiàn)為典型的近日節(jié)律特征，并且在高血壓患者中，血壓的晝夜節(jié)律特征具有重要臨床意義。因此，充分認識血壓的時間生物學特性、深入探討血壓生物節(jié)律的調(diào)節(jié)機制對于更好的防治高血壓病具有重要意義。血壓水平的調(diào)節(jié)是一個非常復雜的過程。在這個過程中，腎素血管緊張素RAS系統(tǒng)、兒茶酚胺、血管內(nèi)皮源性活性物質(zhì)等起著至關重要的作用，上述血管活性物質(zhì)的水平或活性變化將對血壓水平產(chǎn)生顯著影響。因此，深入探討血管活性物質(zhì)的晝夜波動特征對于進一步了解血壓近日節(jié)律的調(diào)控及其機制具有重要意義。此前，國外部分學者曾對腎素REN、血管緊張素ⅡANGⅡ等物質(zhì)的血漿水平或活性進行了初步研究，證實上述物質(zhì)的血濃度或血漿活性存在典型的晝夜節(jié)律現(xiàn)象。但這些研究多數(shù)僅限于血循環(huán)水平。上述物質(zhì)的組織分布以及分子水平的表達是否存在近日節(jié)律尚不清楚，且血管活性物質(zhì)的晝夜波動與血壓晝夜節(jié)律之間的關系亦有待深入探討。生命體的各種節(jié)律現(xiàn)象是在漫長的生物進化過程中逐漸產(chǎn)生并作為一種遺傳信息保持下來的。自地球上出現(xiàn)生命伊始，伴隨著地球的公轉(zhuǎn)與自轉(zhuǎn)，生命體經(jīng)歷著周而復始的溫度一年四季的溫度差異與晝夜溫度差異與亮度主要是晝夜之間的明暗交替的周期性變化。由于年齡不同，生命體經(jīng)歷的周圍環(huán)境的周期性變化的多少有所不同；由于性別不同，為適應生存環(huán)境，生命體內(nèi)的各種生理、生化或代謝過程也不斷發(fā)生著相應的變化，并逐漸成為一種重要的遺傳特征與基本生命現(xiàn)象。本研究旨在探討不同性別的老齡大鼠和青年大鼠RAS系統(tǒng)的時間生物學特征及年齡和性別對大鼠RAS系統(tǒng)及血壓的近日節(jié)律的影響，研究了實驗鼠血內(nèi)REN、ANGⅡ、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE的時間生物學特征以及心肌組織中REN、ACE、血管緊張素Ⅱ1型受體AT1受體MRNA表達的周期性變化。同時研究了RAS系統(tǒng)的近日節(jié)律與血壓晝夜波動特征之間的關系，旨在進一步揭示人體血壓近日節(jié)律的機制。方法將96只SD大鼠分為三組，每組各32只組1M組為雄性17月齡大鼠重量400G～440G，組2F組為雌性17月齡大鼠重量380G～420G，組3D組為健康雄性3月齡大鼠重量250G～275G。大鼠被放在與周圍環(huán)境隔離的控制室，溫度控制在25±3℃，自由進食，給予嚴格的12小時光照12小時黑暗。飼養(yǎng)12周后，分別于同日24小時內(nèi)不同時間點0200、0800、1400、2000每6小時一批隨機處死M組、F組、D組中的各8只大鼠并留取血漿、血清、和心肌組織。分別檢測大鼠血中REN、ACE、ANGⅡ的濃度或活性與心肌組織RENMRNA、ACEMRNA與AT1MRNA的表達水平。應用余弦擬合法分析三組實驗動物血及心肌組織中各指標含量或活性的時間生物學特征，采用零振幅檢驗ZEROAMPLITUDETEST評價各檢測指標的近日節(jié)律是否確實存在，應用方差分析法比較各均值之間差異的顯著性，P005視為有統(tǒng)計學顯著性差異。結(jié)果1、方差分析顯示，D組血中REN活性、ACE、ANGⅡ水平均顯著高于M組和F組P0001，而F組較M組有降低趨勢，但未達統(tǒng)計學顯著性差異。提示不同年齡的大鼠其RAS系統(tǒng)的活性水平亦不同青年雄性大鼠血漿或血清中的REN、ACE、ANGⅡ的水平或活性顯著高于老齡雄性和雌性大鼠。老齡雄性大鼠與老齡雌性大鼠的REN活性、ACE、ANGⅡ的水平或活性無統(tǒng)計學顯著性差別。結(jié)果表明，大鼠RAS的活性水平隨年齡增長而降低，性別對老齡大鼠RAS的活性水平無顯著影響。2、對M組、F組、D組大鼠心肌組織RENMRNA、ACEMRN與AT1MRNA的表達水平行方差分析顯示，青年雄性大鼠即D組RENMRNA、ACEMRNA的表達水平顯著高于M組和F組；M組與F組，無顯著差別。與之相反，AT1MRNA的表達水平在D組最低，而在F組最高。3、余弦擬合分析與零振幅檢驗示，M組、F組、D組大鼠血漿或血清REN、ACE、ANGⅡ濃度或活性均呈現(xiàn)典型的近日節(jié)律P005。M組REN活性、ACE、ANGⅡ的最高值分別位于2317、2333、2320，F(xiàn)組大鼠REN活性、ACE、ANGⅡ的峰值分別位于2327、000、2353。而D組三種物質(zhì)的峰值較M組、F組均提前，峰值時刻分別為2113、2148、2036。此外，M組、F組各物質(zhì)余弦曲線的振幅均較D組減小，提示老齡大鼠組血清REN、ACE、ANGⅡ的晝夜波動幅度較青年大鼠組減小。4、大鼠心肌組織RENMRNA、ACEMRNA與AT1MRNA的表達水平均具有晝夜節(jié)律，其節(jié)律特征與血中REN、ACE等物質(zhì)相似，即三組的峰值相位出現(xiàn)于夜間時段，而D組較M組和F組提前出現(xiàn)。在老齡雄性和雌性大鼠組，兩種物質(zhì)的節(jié)律振幅均減低。而AT1MRNA的節(jié)律特征卻與前兩種物質(zhì)不同，M組、F組、D組AT1MRNA的峰值時刻依次為2044、2026、2209，F(xiàn)組較M組提前，D組最晚出現(xiàn)，且M組與F組節(jié)律振幅均較D組增大。5、血中REN、ACE、ANGⅡ與心肌組織RENMRNA、ACEMRNA，其節(jié)律的時間生物學特征基本一致。說明血中與心肌組織中RAS系統(tǒng)的晝夜波動節(jié)奏是基本同步的。但RENMRNA與ACEMRNA的節(jié)律峰值時刻略晚于相應組血中REN或ACE的峰值時刻。6、對M組、F組、D組大鼠的血壓，應用最小二乘法進行余弦擬合，得出各自的擬合曲線及特征值。經(jīng)零振幅檢驗示，各測量值均呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律變化P005，M組、F組、D組血壓的峰值分別位于042、341及2319。D組較M組、F組提前，F(xiàn)組血壓的峰值出現(xiàn)最晚，且M組、F組、D組血壓的節(jié)律振幅大致相同。上述結(jié)果表明，大鼠血中REN、ACE、ANGⅡ與心肌組織RENMRNA、ACEMRNA、AT1MRNA的表達水平均具有近日節(jié)律性，各指標之節(jié)律特征相似，且其節(jié)律的峰值時刻與血壓基本一致。這種節(jié)律可能是內(nèi)源性的，并影響著血壓的晝夜節(jié)律。RAS系統(tǒng)各組分濃度或活性的晝夜波動可能發(fā)生在分子水平。

簡介：廣州中醫(yī)藥大學博士學位論文葉下珠復方抗HBV、人肝癌裸鼠移植瘤及其分子生物學機制探討姓名魯玉輝申請學位級別博士專業(yè)中醫(yī)臨床基礎指導教師符林春20060401包埋切片，常規(guī)HE染色，光鏡觀察病理切片并拍照。3取對數(shù)生長期的HEPG細胞消化、計數(shù)，以25104／孔種植于96孔板中，培養(yǎng)24小時后，加入不同濃度的葉下珠復方50UG／ML、100UG／ML、200UG／ML、500UG／M1分別培養(yǎng)24H、48H和72H，對照組加入等體積培養(yǎng)液，每濃度組每時間段設6個平行孔。根據(jù)MTT法檢測葉下珠復方的半數(shù)有效濃度和各濃度的細胞增殖抑制率，用流式細胞儀分析細胞周期和各藥物處理組不同時間段的凋亡率，透射電鏡觀察葉下珠復方對HEPG。細胞超微結(jié)構的影響。制作細胞爬片，葉下珠復方處理后用HOECT33258熒光染色，熒光顯微鏡觀察細胞凋亡率。4將人肝癌HEPG。細胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期，用含002％EDTA的0125％胰酶消化，PBS洗滌細胞兩次，1000RPM離一TL3MIN，生理鹽水調(diào)整細胞懸液濃度至1108／ML，每只裸鼠項肩部皮下注射02ML。接種細胞第二天后，將裸鼠隨機分為3組，分別是葉下珠復方治療組，生理鹽水組陰性對照，5一FU組陽性對照組。治療組每天用葉下珠復方灌胃LOG／KG，陰性對照組每天口服同體積生理鹽水，5一FU組陽性對照組，腹腔注射5一FU20MG／KGD，每周給藥二次。觀察裸鼠成瘤情況和精神、飲食、活動、大小便等～般情況，每周用游標卡尺測量瘤體最大長度A、寬度B和高度C，根據(jù)公式VAB2／2，計算腫瘤體積，并畫出腫瘤體積時間生長曲線。給藥35天后經(jīng)裸鼠眼眶靜脈叢取血后處死裸鼠分離血清一20。C凍存?zhèn)溆?，剝離瘤組織，并稱瘤重，迅速置于液氮罐中凍存。放免法檢測各組裸鼠血清中外周血甲胎球蛋白AFP含量，瘤體經(jīng)10％中性福爾馬林固定，石蠟切片，HE常規(guī)染色，光鏡下觀察、拍照，觀察其病理組織學改變。5將各組裸鼠瘤組織的RNA提取后逆轉(zhuǎn)錄，RTPCR擴增P53和CMYC基因。應用NIHIMAGE160軟件分析不同實驗組P53和CMYCPCR產(chǎn)物的電泳條帶，對擴增產(chǎn)物進行半定量分析。將表達的P53基因與PTARGET”載體的連接，轉(zhuǎn)化入JML09感受態(tài)菌中，篩選陽性克隆提取細菌質(zhì)粒進行酶切鑒定，菌液送英駿廣卅L測序公司測序。裸鼠瘤組織以石蠟包埋制成4UM厚的切片，以SP法檢測P53蛋白和CMYC蛋白表達。四、結(jié)果1在半數(shù)毒性濃度下，葉下珠復方濃度為250UG／ML、125UG／ML、625UG／ML、3125UG／M1、156UG／ML時對2215細胞分泌HBSAG的抑制率分別為548％、436％、374％、267％、146％，其TI值為61；對HBEAG的抑制率分別為786％、II

簡介：蘇州大學博士學位論文共刺激分子CD40CD40L和OX40OX40L在乳腺癌中的表達及其生物學意義姓名施勤申請學位級別博士專業(yè)內(nèi)科學（血液）指導教師張學光20030501小有關PO05，同時也與CD40、P53分子表達無明顯相關性。進一步分析，發(fā)現(xiàn)乳腺癌中CD40與P53的表達存在一定的相關性P001，R052，提示兩者在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中有密切的關系。兩者的表達對于乳腺癌的臨床評估具有重要的診斷價值，同時在進行以CD40分子為靶分子的生物治療中要充分考慮到P53基因功能狀態(tài)。二、CI40信號對乳腺癌細胞株生物學行為的影響兩株商表達CD40的乳腺癌細胞MDAMB231、MDAMB435細胞，經(jīng)RHCD40L激發(fā)后，其HLADR分子有不同程度的上調(diào)，腫瘤細胞自身高表達CD44和CD54可通過與各自相應配體結(jié)合，穩(wěn)定細胞間接觸，增強免疫原性和促進T細胞活化。同時。RTPCR結(jié)果顯示腫瘤上皮細胞經(jīng)CD40激發(fā)后T細胞活化和趨化因子RANTES的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)，推測其編碼的蛋白可能參與了對T細胞的趨化和活化。因此，腫瘤細胞CD40分子的激發(fā)可以促使機體產(chǎn)生有效的抗腫瘤免疫應答，通過粘附分子／共刺激分子上調(diào)，改善或糾正T細胞對腫瘤細胞的免疫無能，可以認為這是CD40信號作用于腫瘤細胞和擴大抗腫瘤效應的間接機制。我們的實驗結(jié)果顯示RHCD40L影響MDAMB231、MDAMB435生長抑制和／或凋亡，同時RHCD40L可提高腫瘤細胞對化療藥物阿霉素、羥基喜樹堿和細胞因子IFN。Y的敏感性。在本實驗中，單用RHCD40L、化療藥物、IFNY僅導致腫瘤細胞的部分生長抑制，而RHCD40L聯(lián)合化療藥物或IFNY則導致更有效的腫瘤生長抑制。細胞周期的檢測結(jié)果顯示MDAMB435、MDAMB231分別在CD40激發(fā)后48、72LLR進入G1期阻滯，不同的細胞周期阻滯的機制尚不完全清楚，推測與細胞生長周期或不同的細胞周期蛋白激酶有關。RHCD40L對MDAMB231、MDAMB435的生長抑制隨著RHCD40L劑量的增加而增加，這種抑制作用不僅與細胞周期阻滯有關，還與細胞凋亡有關。PIANNEXINV熒光標記方法的結(jié)果表明，MDAMB435、MDAMB231在CD40激發(fā)后48HR即出現(xiàn)不同程度的凋亡，MDAMB435比MDAMB231凋亡顯著，這與MDAMB435、MDAMB231分別在CD40激發(fā)后48、72HR進入G1期阻滯結(jié)果相一致，正是GL期阻滯使得腫瘤細胞不能進入正常的細胞周期而發(fā)生細胞凋LI

簡介：老年乳腺癌分子分型、相關生物學指標和輔助治療與預后關系的研究THEDIFFERENTMOLECULARSUBTYPES，THEBIOLOGICALPARAMETERSANDADJUVANTTHERAPIESASSOCIATEDWITHPROGNOSISOFCHINESEELDERLYBREASTCANCERPATIENTS●I■●I■R，▲■R●目錄一、目錄1二、中文摘要2三、英文摘要3四、引言5五、正文老年乳腺癌分子分型、相關生物學指標和輔助治療與預后關系的研究目的7材料與方法8結(jié)果13討論24結(jié)論28參考文獻29六、綜述MICRORNA與人類腫瘤綜述正文32參考文獻38七、致謝42八、附錄43

簡介：分類號密級公開國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學學位論文新疾病外傷后細菌性致死性肉芽腫新疾病外傷后細菌性致死性肉芽腫痤瘡丙酸桿菌腦感染的分子生物學及形態(tài)學證據(jù)痤瘡丙酸桿菌腦感染的分子生物學及形態(tài)學證據(jù)（題名和副題名）楊怡（作者姓名）指導教師姓名高天文教授（主任醫(yī)師）指導教師單位第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院全軍皮膚病研究所申請學位級別醫(yī)學碩士專業(yè)名稱皮膚病與性病學論文提交日期200905答辯日期200905論文起止時間2008年3月至2009年5月學位授予單位第四軍醫(yī)大學新疾病外傷后細菌性致死性肉芽腫痤瘡丙酸桿菌腦感染的分子生物學及形態(tài)學證據(jù)研究生楊怡楊怡學科專業(yè)皮膚病與性病學皮膚病與性病學所在單位第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院皮膚科第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院皮膚科導師高天文教授（主任醫(yī)師）高天文教授（主任醫(yī)師）輔導教師武勝昔教授武勝昔教授關鍵詞關鍵詞外傷后細菌性致死性肉芽腫；痤瘡丙酸桿菌；聚合酶鏈式反應；原位雜交；中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學2009年5月

簡介：背景和目的全球每年約5％10的成年人和200的兒童被流感病毒感染。病毒的不斷進化可致疫苗保護性下降甚至失效，產(chǎn)生抗藥毒株。除季節(jié)性流感，過去已發(fā)現(xiàn)大量禽流感感染人類并引起嚴重疾病如H5N1、H7N9、H10N8和H5N6等。兒童是感染流感的高危人群之一，且可傳染成人看護者，因此在兒童中監(jiān)測流感對防控流感有重要意義。本研究旨在監(jiān)測汕頭兒童中流感流行活動及H3N2和H7N9的分子變異特征和進化規(guī)律。方法使用RTPCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應）對ILI標本進行流感分型。在某些情況下，用MDCK細胞分離病毒，對比RTPCR與細胞分離法在流感檢出效率上的差異。選出陽性標本測序，分析分子變異特征和進化規(guī)律。比較不同流感患者的人口統(tǒng)計學和臨床特征。為了解H7N9的傳播途徑，還在本地菜市場活禽中開展了小規(guī)模采樣監(jiān)測。結(jié)果流感在汕頭幾乎全年流行。甲型H1N1和H3N2基本處于此消彼長的形態(tài)。2014年夏出現(xiàn)抗原性漂移的H3N2毒株。檢出一例兒童H7N9輕癥，和汕頭報導的4例重癥H7N9的病毒基因組各片段的進化距離都非常近。未出現(xiàn)人傳人的突變組合和神經(jīng)氨酸酶抑制劑耐藥性的突變，但有優(yōu)先結(jié)合SAΑ26GAL受體的突變（HAT160A、Q226L和T221P），抗離子通道抑制劑類藥物的突變（M2S31N和V27I）和在小鼠感染中增強毒力的突變（M1N30D和T215A，NS1A42S，NA6973位缺失），然而能在小鼠感染中增強病毒復制能力的兩個氨基酸位點保守未變PB2E627和D701?；钋菔袌鐾瑫r檢出H7N9和H9N2?！?歲更易感染流感；結(jié)論1流感在汕頭幾乎全年流行。甲型H1N1和H3N2基本處于此消彼長。22014年夏發(fā)現(xiàn)抗原性漂移的H3N2毒株，對20142015和20152016年疫苗的保護性均具挑戰(zhàn)。3不同型流感患者在人口統(tǒng)計學和臨床特征上的某些顯著性差異，可為醫(yī)生診斷、治療流感提供參考。4在汕頭兒童普通流感監(jiān)測中成功篩查出輕癥病例，說明在兒科普通流感監(jiān)測中檢測H7N9十分必要。5人感染H7N9的威脅仍來自環(huán)境。H7N9和H9N2在禽類中仍在進行內(nèi)部基因交換。但該時期汕頭的H7N9基因多樣性還比較穩(wěn)定。

簡介：天津醫(yī)科大學碩士學位論文肺癌組織芯片中AKT2、GALECTIN3和MMP2表達的生物學意義及相關分子機制的研究姓名黃曦申請學位級別碩士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師王新允20090501天灃醫(yī)科大學碩士學位論文4AKT2、GALECTIN3和MMP2在不同組織學類型、分化程度、肉眼類型、年齡、性別間表達的差別無統(tǒng)計學意義PO05。5MMP2與AKT02和GALECTIN3的表達呈顯著正相關RS_0386，P005；RS0415，P005，而AKT2與GALECTIN3的表達無相關性。結(jié)論1AKT2蛋白在原發(fā)性肺癌組和轉(zhuǎn)移癌組的陽性率顯著高于正常組和癌前病變組，提示AKT2促進了肺癌的發(fā)生和進展，在肺癌發(fā)生的早期階段就起到重要作用。原發(fā)性肺癌中AKT2蛋白表達強度與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達陽性率要明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，在IIIIV期肺癌中的陽性率顯著高于III期。這些結(jié)果提示AKT2可以促進肺癌的浸潤和轉(zhuǎn)移，與肺癌進展和不良生物學行為相關，并可以作為預后估計的參考指標。2GALECTIN3蛋白在原發(fā)性肺癌中的表達顯著高于正常組織，提示GALECTIN3促進了肺癌的發(fā)生和進展，在肺癌發(fā)生的早期階段就起到重要作用。原發(fā)性肺癌中GALECTIN3蛋白與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關，表明GALECTIN3表達的增加促進了肺癌細胞的惡性轉(zhuǎn)化和進展，提示GALECTIN3可能具有促進腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的作用，對預后估計有一定的參考價值。3MMP2蛋白在原發(fā)性肺癌和轉(zhuǎn)移癌組中的表達顯著高于正常組織和癌前病變組，原發(fā)性肺癌中MMP2蛋白的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期顯著正相關，提示MMP一2可能通過促進腫瘤細胞的增殖和促進腫瘤血管形成等方式參與腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移，MMP2可以作為預后估計的參考指標。4AKT2和MMP2的表達呈顯著正相關；MMP2和GALECTIN3的表達呈顯著正相關。AKT2的活化可以上調(diào)MMP一2的表達；而GALECTIN3作為MMP2的底物，被MMP2分解后參與了細胞與細胞外基質(zhì)的相互作用來促進癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。AKT2能通過調(diào)節(jié)細胞的侵襲性和腫瘤的生長，調(diào)節(jié)多種腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能；GALECTIN3的表達增加了細胞的粘附性；MMP2則可以增強細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力，并且促進腫瘤的血管形成。三者在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中呈線性調(diào)節(jié)關系。5組織芯片具有高通量、高效率、節(jié)省試劑和時間等優(yōu)點，并且使各組織的實驗條件相同，減少了實驗誤差，在大樣本研究中具有明顯的優(yōu)勢。關鍵J聞組織芯片肺癌癌前病變AKT2GALECTIN3MMP2免疫組織化學LI

簡介：立克次體RICKETTSIAS為原核細胞型、革蘭染色陰性的專性細胞內(nèi)寄生菌。分類學屬于變形綱立克次體目RICKETTSIALES，下屬的立克次體科包括立克次體屬RICKETTSIA、恙蟲病東方體屬IENTIATSUTSUGAMUSHF、埃立克體屬EHRLICHIEA，其中立克次體屬又分為斑疹傷群寒、斑點熱群，自然界已發(fā)現(xiàn)有20余種對人類致病。近年新病種和新疫區(qū)不斷被發(fā)現(xiàn)，立克次體病已成為世界性關注的疾病。由于非特異的臨床表現(xiàn)，實驗室診斷成為主要依據(jù)。目前PCR方法已被廣泛用于立克次體的實驗室診斷，但多數(shù)方法只針對單個屬或種特異，靈敏度往往也達不到實際檢測要求。為提供更快速、靈敏的檢測方法，本研究以PCR技術為基礎，應用克隆、測序及序列分析等分子生物學、生物信息學手段建立靈敏、特異地立克次體屬和恙蟲病東方體屬多種屬立克次體的檢測方法，并應用此方法對自然界鼠宿主、媒介生物、臨床病人標本進行檢測、產(chǎn)物測序、序列分析等研究。獲得了以下結(jié)果1以PCR為基礎的多種屬立克次體檢測方法建立根據(jù)立克次體屬和恙蟲病東方體屬熱休克蛋白編碼基因GROEL的保守區(qū)設計外引物，以文獻屬特異引物對為內(nèi)引物組成巢式PCR。通過產(chǎn)物片段大小、測序或PCRRFLP鑒定不同屬、種甚至不同型別立克次體。特異性地擴增立克次體屬和恙蟲病東方體屬立克次體DNA，每個反應可檢測到110拷貝數(shù)標準模板，比普通PCR靈敏度提高10倍。適于地方性斑疹傷寒、流行性斑疹傷寒、斑點熱和恙蟲病地同時檢測。2方法的應用對從云南省玉溪市紅塔區(qū)收集的各鼠肝臟、脾臟及部分鼠全血，鼠蚤、螨及病人標本進行GROEL基因巢式PCR檢測。3478﹪的鼠有陽性擴增，斑疹傷寒、恙蟲病和斑點熱擴增陽性率分別為2812﹪、1913﹪、029﹪。從蚤提取的DNA中擴增到斑疹傷寒片段，從螨提取的DNA中擴增到恙蟲病片段。8例可疑立克次體病病人血標本中，4例擴增出斑疹傷寒片段，其中1例同時擴增出恙蟲病片段。部分產(chǎn)物序列比較分析發(fā)現(xiàn)斑疹傷寒、恙蟲病和班點熱片段序列分別與GENEBANK中已知的莫氏立克次體RTYPHFW、87100、ETHIOPIANAZ322株，恙蟲病OTKARP型和西伯利亞立克次體RSIBIRICA核苷酸和推定氨基酸同源性最高，多數(shù)100﹪同源，21株斑疹傷寒和恙蟲病產(chǎn)物核苷酸序列有堿基替換，呈99﹪同源，其中7株推定的氨基酸序列有替換突變，呈99﹪，98﹪同源。間接免疫熒光實驗INDIRECTFLUESCENTANTIBODYTEST，IFA鼠血清RTYPHIW株、康氏立克次體RCONIF、OT，KARP型、KATO型、GILLIAM型抗體陽性率分別為4136﹪、3182﹪、3545﹪、3136﹪、2591﹪。從分子生物學和血清學方面證實了紅塔區(qū)有地方性斑疹傷寒、恙蟲病及班點熱的流行，有地方性斑疹傷寒和恙蟲病的核苷酸和氨基酸突變株存在。各鎮(zhèn)鼠標本地方性斑疹傷寒和恙蟲病擴增陽性率均有顯著性差異P005。斑點熱在洛河鄉(xiāng)以外的其它鄉(xiāng)鎮(zhèn)有流行，地方性斑疹傷寒和恙蟲病疫源地范圍已擴大到全區(qū)，地方性斑疹傷寒在研和鎮(zhèn)、春和鎮(zhèn)、北城鎮(zhèn)、州城有高度流行，恙蟲病在全區(qū)各鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有高度流行。PCR檢測發(fā)現(xiàn)1位病人和1333﹪的鼠標本有地方性斑疹傷寒、恙蟲病雙重擴增，140996的鼠血清中同時存在RTYPHFW和OTKARP型抗體，懷疑自然鼠宿主和病人有地方性斑疹傷寒和恙蟲病的雙重感染，紅塔區(qū)可能為生態(tài)結(jié)構復雜的自然疫源地。應用新建的巢式PCR方法同時完成了對紅塔區(qū)全區(qū)各類型標本的立克次體屬和恙蟲病東方體屬立克次體的檢測及分群、分型鑒定，進一步證實了此新建方法的實用性，為流行病學調(diào)查提供科學依據(jù)。

簡介：全文由兩部分組成第一部分乙酰乳香酸BC4抗腫瘤作用的分子機制乙酰乳香酸BC4是提取自中藥乳香BOSWELLIACARTERIIBIRDW的五環(huán)三萜類成分初期的藥物篩選表明其對白血閏有較強的誘導分化作用該研究還BC4抗惡性細胞增殖、誘導腫瘤細胞分化、凋亡以及抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移等作用了研究并進一步探討了其發(fā)揮腫瘤作用的分子機理第二部分黑色素瘤細胞基本生物學特性的研究1、小鼠黑色素瘤細胞的侵襲性能與共基本生物學特性的相關性研究研究同一起源而轉(zhuǎn)移潛力不同的小鼠黑色素瘤細胞系B16B16F10B16BL6的生物學特性與其侵襲潛能的相關性2、高分子量黑色素瘤相關抗原HMWMAA在黑色素瘤細胞運動中的作用激光共聚焦顯微鏡觀察顯示MV3細胞表面表達豐富的HMWMAA隨著細胞運動狀態(tài)的不同HMWMAA在細胞表面的分布變不同同時觀察到在MV3細胞的運動狀態(tài)下細胞表面HMWMAA的分布不同推測在黑色素瘤細胞運動過程中存在HMWMAA循環(huán)3、穩(wěn)定表達紅色及綠色熒光蛋白的MV3細胞系的建立采用分子克隆技術及轉(zhuǎn)染技術建立了穩(wěn)定表達紅色及綠色熒光蛋白的MV3細胞系完成了建立轉(zhuǎn)移鼠METAMOUSE模型的上游工作