簡介：FR900098是一種天然的膦胺霉素類抗生素。在許多致病菌體內(nèi)，如惡性瘧疾原蟲，存在一條類異戊二烯合成的非甲羥戊酸代謝途徑，又稱為4二磷酸胞苷2C甲基D赤蘚糖（MEP）途徑，但在哺乳動(dòng)物包括人體內(nèi)則不存在該途徑。而FR900098可以有效的抑制MEP途徑中DXR酶的活性，卻又不會(huì)影響人類類異戊二烯的合成，因此FR900098可以作為一種有效的新型抗瘧疾藥物。目前，對于FR900098在微生物內(nèi)生物合成途徑了解較少。為了揭示FR900098合成途徑中合成酶的催化機(jī)制，本文對FR900098合成酶FRBB、FRBD進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶，并試圖利用XRAY單晶衍射的方法解析FRBB、FRBD蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，為揭示FRBB、FRBD的催化機(jī)制及FR900098的生物合成途徑提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。FR33289是一種FR900098的衍生物，是潛在的抗瘧疾藥物。序列分析顯示，F(xiàn)RBJ屬于亞鐵離子Α酮戊二酸依賴雙加氧酶，以FR900098為底物合成FR33289，還可催化膦胺霉素、甲基化膦胺霉素、甲基化FR900098，催化產(chǎn)物，可用來合成潛在的抗瘧疾藥物。本文通過對FRBJ酶進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶及晶體結(jié)構(gòu)學(xué)方法分析，利用單波長反常衍射法成功解析FRBJ蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)分析顯示FRBJ與二價(jià)鐵離子Α酮戊二酸依賴雙加氧酶家族酶在整體結(jié)構(gòu)上相似，但FRBJ擁有一個(gè)不尋常的蓋子結(jié)構(gòu)。為了進(jìn)一步研究蓋子結(jié)構(gòu)的所具有的重要作用，利用分子動(dòng)力學(xué)模擬的方法對FRBJ酶蓋子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析研究。結(jié)果顯示蓋子結(jié)構(gòu)是高度靈活的，與FRBJ對不同長度的底物廣譜性的特點(diǎn)相符合。通過通道預(yù)測，在FRBJ活性中心的背面發(fā)現(xiàn)一條通道，可能在底物缺失的情況下，作為單獨(dú)的通道負(fù)責(zé)Α酮戊二酸和輔因子的轉(zhuǎn)運(yùn)。對于FRBJ結(jié)構(gòu)分析，將有利于揭示FRBJ酶與其底物的特殊識(shí)別方式及獨(dú)特催化機(jī)制。Β咔啉生物堿是一種自然界中廣泛分布且具有重要生理活性的化合物。研究發(fā)現(xiàn)其具有重要的藥理學(xué)價(jià)值，如抗病毒、抗過敏、抗炎等，也可抑制惡性瘧原蟲。MCBB酶可以催化L色氨酸和草酰乙醛合成Β咔啉生物堿途徑中的PS反應(yīng)，還可催化氧化反應(yīng)和脫羧反應(yīng)，是一種多功能酶。本研究中獲得MCBB晶體并解析了MCBB三維結(jié)構(gòu)，根據(jù)對MCBB研究和結(jié)構(gòu)分析顯示，GLU97在MCBB催化反應(yīng)中具有極其重要的作用。對MCBB結(jié)構(gòu)的研究，將有助于揭示MCBB酶的催化機(jī)制，為酶的設(shè)計(jì)改造和開發(fā)酶新功能提供重要的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

簡介：吉首大學(xué)碩士學(xué)位論文中華獼猴桃“貝木”的生物學(xué)特性及其果實(shí)發(fā)育研究張慧二〇一七年五月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得吉首大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解吉首大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意吉首大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月日

簡介：點(diǎn)擊查看更多一例HSD11B2新突變位點(diǎn)所致的AME及新型生物學(xué)標(biāo)志物與2型糖尿病DKD進(jìn)展相關(guān)性初探.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：SEEDBIOLOGYECOLOGICALADAPTABILITYANDCHEMICALCONTROLOFASIAMINORBLUEGRASSPOLYPOGONFUGAXBYWUXIANATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFDLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEMASTERDEGREEOFAGRICULTURESCIENCESUPERVISEDBYPROFESSORDONGLIYAODEPARTMENTOFPESTICIDESCIENCE，COLLEGEOFPLANTPROTECTIONNANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING210095，ERCHINAMAY2015目錄目錄摘要IABSTRACTⅡI符號(hào)及縮略語V前言1研究背景、目的及意義VII2論文設(shè)計(jì)思路VII3研究內(nèi)容VII4技術(shù)路線一VIII第一章文獻(xiàn)綜述第一節(jié)棒頭草研究進(jìn)展L1棒頭草發(fā)生、分布及危害L2棒頭草種子生物學(xué)及生態(tài)適應(yīng)性研究進(jìn)展23棒頭草化學(xué)防除研究進(jìn)展3第二節(jié)我國夏熟作物田主要禾本科雜草種子生物學(xué)研究進(jìn)展31種子休眠特性32種子萌發(fā)特性43種子結(jié)實(shí)特性5第三節(jié)植物對逆境脅迫響應(yīng)研究進(jìn)展5L植物對高溫脅迫的響應(yīng)511高溫對植物光合作用的影響612高溫對植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響713高溫對植物抗氧化酶系的影響82植物對鹽分脅迫的響應(yīng)821鹽分脅迫對植物光合作用的影響922鹽分脅迫對植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響923鹽分脅迫對植物抗氧化酶系的影響。103植物對水分脅迫的響應(yīng)1031水分脅迫對植物光合作用的影響1132水分脅迫對植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響1133水分脅迫對植物抗氧化酶系的影響1L

簡介：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文人源PABPN1RRM結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究姓名葛宏華申請學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)生化與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師牛立文滕脈坤20080401摘要右依次為P4PLP3P2形成了一個(gè)PSHEET的平面，在其后方有兩個(gè)接近90。的0【HELIX。但與其他剛比較，我們發(fā)現(xiàn)有兩個(gè)特點(diǎn)使得PABPNL刪有著顯著的不同100P3的走向和二聚化作用。關(guān)鍵詞POLYA結(jié)合蛋白I喇A識(shí)別基序L礬A結(jié)合結(jié)構(gòu)域晶體結(jié)構(gòu)II5氨基酮戊酸5AMINOIEVULINICACID，ALA是四碳合成途徑當(dāng)中首要的供體，植物，藻類和一些細(xì)菌也可以通過五碳途徑從谷氨酸合成5氨基酮戊酸。在這個(gè)途徑中一系列的酶發(fā)揮著重要的作用，谷氨酸1半醛轉(zhuǎn)氨酶GLUTAMATE1SEMIALDEHYDEAMINOTRANSFERASE，GSAAT是這個(gè)途徑的最后一個(gè)酶。其他兩個(gè)重要的酶是谷氨酸TRNA合成酶和谷氨酸TRNA還原酶。我們從基因組文庫中克隆了GSAAT的CDS序列，并構(gòu)建了GSAATP28A質(zhì)粒。重組蛋白GSAATHISTAG在ECD，F(xiàn)BL21DE3中表達(dá)量很高，用NI親和柱純化后純度達(dá)到95％以上。蛋白質(zhì)在濃縮和脫鹽過程中比較穩(wěn)定，動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)證實(shí)重組蛋白是以單體的形式存在。用懸滴氣相擴(kuò)散法經(jīng)過篩選和優(yōu)化得到了GSAAT的晶體。晶體的衍射分辨率為23A并完成了晶體衍射數(shù)據(jù)的收集，晶體空間群為C2，晶胞參數(shù)為A10925A，B55。76A，C80。50A，A丫9000。，D132020。一個(gè)晶體學(xué)不對稱單位含有一個(gè)蛋白質(zhì)分子。用分子置換法已獲得結(jié)構(gòu)的初相位，最后的結(jié)構(gòu)修正參數(shù)為R因子193％，RFREE234％。通過對GSAAT三維空間結(jié)構(gòu)分析，該分子單體分別由N末端DOMAIN約65個(gè)氨基酸形成的兩段0【螺旋和三段反向的P片組成、輔基結(jié)合區(qū)65320，包括一個(gè)由7段DSHEET組成的核心和C末端DOMAIN321_430，兩段反向P折疊片和四段A螺旋組成。我們解析的結(jié)構(gòu)能夠清晰的獲得活性100P區(qū)148179的三維走向以及輔基FMN的具體定位。關(guān)鍵詞5氨基酮戊酸谷氨酸1半醛轉(zhuǎn)氨酶晶體結(jié)構(gòu)II

簡介：學(xué)校代碼分類號(hào)密級(jí)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文魔芋軟腐菌生物學(xué)特性測定及軟腐病防治方法研究AMORPHOPHALLUSSOFTROTFUNGIBIOLOGIEALCHARACTERISTICSANDSEVERITYOFTHEOCCURRENCERULES研究生袁尚勇POSTGRADUATEYUANSHANGYONG導(dǎo)師侯明生教授SUPERVISORPROFMINGSHENGHOU專業(yè)SPECIALTY農(nóng)業(yè)推廣AGRICULTURALPOPULARIZATION研究方向SUBJEET種植領(lǐng)域PLANT代ALM獲得學(xué)位名稱推廣碩士獲得學(xué)位時(shí)間華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院中國武漢DEPARTMENTOFPLANTPROTEETIONHUAZHONGAG對CULTURALUNIVERSITYWUHANPRCHINA430070華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2007屆農(nóng)業(yè)推廣碩十學(xué)位論文1，21病原菌的致病性試驗(yàn)14122藥劑的室內(nèi)毒力測定巧1221藥皿法，，，，，巧1222打孔法巧2結(jié)果與分析，，，，巧22藥劑的室內(nèi)毒力測定巧221藥皿法15222打孔法203小結(jié)與討論21第四章不同魔芋品種的豐產(chǎn)性及對軟腐病的23抗病性評(píng)價(jià)231材料與方法2311材料來源及田間設(shè)計(jì)2312調(diào)查內(nèi)容及方法，2313抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)242、結(jié)果與分析2421魔芋品種豐產(chǎn)、農(nóng)藝性狀2422魔芋品種抗病性253、小結(jié)與討論27第五章不同農(nóng)業(yè)措施對魔芋生長發(fā)育及軟腐病281、試驗(yàn)內(nèi)容與方法2811地膜栽培與露地栽培比較2812不同壟高比較，2813不同植物微肥比較2814不同覆蓋物比較試驗(yàn)292、結(jié)果與分析2921地膜覆蓋栽培對魔芋軟腐病的影響2922不同壟高栽培對魔芋生長特性及軟腐病影響3023不同植物微肥對魔芋生長特性及軟腐病影響，，二3024不同覆蓋物對魔芋產(chǎn)量及病害的影響31241不同覆蓋物處理與魔芋產(chǎn)量的關(guān)系31242不同覆蓋處理對魔芋軟腐病發(fā)生情況的影響323、小結(jié)與討論，33結(jié)論與展望34參考文獻(xiàn)，，二，，，，，，，，，，，二，，，，36

簡介：第一部分BAFILOMYCINA1抑制鈷納米顆粒誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒性和促炎細(xì)胞因子的釋放的實(shí)驗(yàn)研究目的研究BAFILOMYCINA1對鈷納米顆粒（CONPS）誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒性和炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用。方法（1）采用不同濃度的CONPS、CO2和BAFILOMYCINA1對RAW2647細(xì)胞進(jìn)行甲基噻唑基四唑（METHYLTHIAZOLYLTETRAZOLIUM，MTT）法檢測細(xì)胞生存率；（2）通過對照組、CONPS組、低劑量藥物組、高劑量藥物組四組MTT分析方法檢測細(xì)胞生存率比較，評(píng)估BAFILOMYCINA1對CONPS細(xì)胞毒性的抑制作用；（3）采用DAPI對RAW2647細(xì)胞核進(jìn)行染色，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)量的變化；（4）掃描電鏡觀察各組RAW2647細(xì)胞超微形態(tài)學(xué)的變化；（5）采用ELISA法檢測前炎癥因子TNFΑ、IL1Β、IL6的表達(dá)情況。結(jié)果（1）CONPS及CO2對RAW2647細(xì)胞的細(xì)胞毒性效應(yīng)呈現(xiàn)時(shí)間、濃度依賴性；BAFILOMYCINA1（8NM，16NM）對RAW2647細(xì)胞沒有細(xì)胞毒性；CONPS和CO2細(xì)胞毒性的起效濃度分別約為50、400ΜM；（2）隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增高RAW2647細(xì)胞的細(xì)胞毒性逐漸減弱（P（3）熒光顯微鏡觀察隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增高RAW2647細(xì)胞數(shù)量逐漸增加；（4）掃描電鏡觀察顯示CONPS組的RAW2647細(xì)胞偽足基本消失，且細(xì)胞明顯縮?。浑S著BAFILOMYCINA1作用濃度的增高RAW2647細(xì)胞的偽足逐漸增多，且細(xì)胞鋪展面積逐漸與對照組接近；（5）隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增高炎癥因子TNFΑ、IL1Β、IL6表達(dá)逐漸減弱（P結(jié)論CONPS對RAW2647細(xì)胞的細(xì)胞毒性效應(yīng)強(qiáng)于CO2；BAFILOMYCINA1（8NM，16NM）沒有細(xì)胞毒性。BAFILOMYCINA1對CONPS所致RAW2647細(xì)胞的細(xì)胞毒性和炎癥反應(yīng)具有保護(hù)作用。第二部分BAFILOMYCINA1抑制鈷納米顆粒誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究目的研究探索BAFILOMYCINA1對CONPS誘導(dǎo)的RAW2647細(xì)胞分化的影響。方法（1）RAW2647細(xì)胞培養(yǎng)第5D，通過倒置相差顯微鏡觀察活體破骨細(xì)胞形態(tài)改變、TRAP染色、TRAP染色陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，從細(xì)胞形態(tài)學(xué)上來評(píng)估BAFILOMYCINA1抑制CONPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的作用；（2）培養(yǎng)第6D通過REALTIMEPCR檢測破骨細(xì)胞基因表達(dá)從基因水平來評(píng)估BAFILOMYCINA1抑制CONPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的作用。結(jié)果（1）培養(yǎng)第5D，通過倒置相差顯微鏡觀察，CONPS組不規(guī)則細(xì)胞數(shù)量增加，體積增大，多核細(xì)胞亦增多，其內(nèi)的細(xì)胞核也增多。隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加，多核細(xì)胞數(shù)目逐漸減少，多核細(xì)胞體積逐漸變??；通過TRAP染色，CONPS組有大量TRAP染色陽性的破骨細(xì)胞形成，隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加，TRAP染色陽性的破骨細(xì)胞數(shù)目逐漸減少（P（2）培養(yǎng)第6DREALTIMEPCR檢測破骨細(xì)胞基因TRAP、RANK及CATHK的表達(dá)，所得結(jié)果規(guī)律性與活體破骨細(xì)胞形態(tài)改變、TRAP染色結(jié)果一致。結(jié)論小鼠RAW2647細(xì)胞能夠被RANKL誘導(dǎo)生成破骨細(xì)胞，CONPS能夠加速誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化，BAFILOMYCINA1能夠抑制CONPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的進(jìn)程，呈劑量依賴性。第三部分BAFILOMYCINA1對鈷納米顆粒誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞不良生物學(xué)效應(yīng)保護(hù)作用的機(jī)制研究目的研究PH值對CONPS溶解的影響，通過HATPASE抑制劑BAFILOMYCINA1抑制RAW2647對細(xì)胞內(nèi)的CONPS溶解的影響、TEM超微結(jié)構(gòu)改變及氧化應(yīng)激水平的影響，初步探討B(tài)AFILOMYCINA1對CONPS所致體內(nèi)外不良生物學(xué)效應(yīng)保護(hù)作用的機(jī)制。方法（1）通過ICPMS測量CONPS在不同PH值培養(yǎng)基中釋放CO2的水平；（2）各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞通過ICPMS測量及EDX能譜測試，評(píng)估BAFILOMYCINA1抑制細(xì)胞內(nèi)CONPS溶解作用；（3）利用TEM觀察各組RAW2647細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變；（4）收集各組RAW2647細(xì)胞抽提液，通過GSHGSSG、SOD、CAT、GPX水平檢測，評(píng)估BAFILOMYCINA1抑制細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激的作用。結(jié)果（1）培養(yǎng)基中離子釋放呈現(xiàn)時(shí)間、PH值依賴關(guān)系，各時(shí)間點(diǎn)釋放的濃度均小于CO2細(xì)胞毒性起效濃度；（2）細(xì)胞內(nèi)CONPS離子釋放呈現(xiàn)時(shí)間依賴關(guān)系，隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加，細(xì)胞內(nèi)CONPS離子釋放逐漸減少（P（3）CONPS組RAW2647細(xì)胞內(nèi)溶酶體和濾泡的數(shù)目急劇增多，CONPS被溶酶體吞噬，伴有細(xì)胞器消失；隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增高，RAW2647細(xì)胞內(nèi)溶酶體和濾泡的數(shù)目逐漸減少，同時(shí)消失的細(xì)胞器再次出現(xiàn)；（4）CONPS組GSH、SOD、GPX、CAT水平明顯降低，隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增高，GSH、SOD、GPX、CAT水平相應(yīng)升高。結(jié)論CONPS的溶解度在細(xì)胞外環(huán)境中很低，在細(xì)胞內(nèi)低PH值環(huán)境的溶酶體中更容易溶解釋放大量鈷離子，從而破壞細(xì)胞抗氧化防御機(jī)制，引起氧化應(yīng)激損傷，是CONPS引起細(xì)胞毒性反應(yīng)、炎癥反應(yīng)及誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化等一系列不良生物學(xué)反應(yīng)的根本原因。第四部分BAFILOMYCINA1抑制鈷納米顆粒誘導(dǎo)的小鼠顱骨周圍急性炎癥反應(yīng)和骨溶解作用的實(shí)驗(yàn)研究目的研究BAFILOMYCINA1對CONPS誘導(dǎo)的小鼠顱骨周圍急性炎癥反應(yīng)和骨溶解作用的影響。方法（1）建立小鼠顱骨周圍急性炎癥反應(yīng)和骨吸收注射模型，各組顱骨周圍軟組織病理學(xué)切片染色觀察及炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)分析；（2）各組顱骨病理學(xué)切片染色觀察及骨組織計(jì)量學(xué)數(shù)據(jù)測量；（3）各組MICROCT分析；（4）各組顱骨周圍軟組織促炎細(xì)胞因子的測量。結(jié)果（1）顱骨周圍軟組織病理學(xué)切片染色觀察及炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)分析結(jié)果提示CONPS組細(xì)胞浸潤最密集，滿視野均是核染成深藍(lán)色巨噬細(xì)胞或淋巴細(xì)胞，隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加，炎性細(xì)胞浸潤數(shù)目逐漸減少（P2顱骨病理學(xué)切片染色觀察及骨組織計(jì)量學(xué)數(shù)據(jù)測量結(jié)果提示CONPS組的樣本可見顱骨骨吸收明顯，伴炎性細(xì)胞浸潤。隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加，骨吸收破壞范圍減小，溶解面積減小，炎性細(xì)胞浸潤數(shù)目逐漸減少。3MICROCT分析結(jié)果提示CONPS組骨吸收明顯、隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加，骨吸收破壞范圍減小。隨著BAFILOMYCINA1作用濃度的增加BMD和BMC顯著升高P（4）顱骨周圍軟組織促炎細(xì)胞因子表達(dá)結(jié)果提示CONPS組軟組織內(nèi)TNFΑ、IL1Β及IL6蛋白表達(dá)量顯著增高（P結(jié)論CONPS可以誘導(dǎo)小鼠顱骨周圍產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，分泌參與破骨細(xì)胞調(diào)控的TNFΑ，IL1Β和IL6等炎癥性細(xì)胞因子，引起顱骨骨吸收。BAFILOMYCINA1具有抑制CONPS誘導(dǎo)的小鼠顱骨周圍產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，抑制顱骨骨吸收的作用，呈劑量效應(yīng)關(guān)系。

簡介：清風(fēng)藤為清風(fēng)藤科藤本植物，可用于消炎、治療病毒性甲型和乙型肝炎等，但存在白細(xì)胞減少的風(fēng)險(xiǎn)。食藥用真菌具有非常廣泛的藥理活性，同時(shí)擁有食用、保健和藥用功能，有些具有明顯的提升白細(xì)胞的作用。本課題選擇以靈芝等為主的食藥用真菌固體發(fā)酵小花清風(fēng)藤，得到復(fù)合發(fā)酵產(chǎn)物。通過成分分析，抗氧化性、對肝癌細(xì)胞生長、損傷肝細(xì)胞的保護(hù)及丙肝病毒RNA表達(dá)的影響進(jìn)行評(píng)價(jià)，探究食藥用真菌與清風(fēng)藤復(fù)配達(dá)到減毒增效的可行性，為中藥的生物炮制提供理論支持。采用同時(shí)蒸餾萃取和固相微萃取結(jié)合氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析小花、安龍和四川清風(fēng)藤揮發(fā)性物質(zhì)，同時(shí)蒸餾萃取獲得的物質(zhì)相對較多，小花、四川和安龍清風(fēng)藤中分別鑒定出65、38和26種化合物，其中棕櫚酸含量最高。固相微萃取分別只得到20、13和10種化合物。小花清風(fēng)藤經(jīng)7種食藥用真菌發(fā)酵后，揮發(fā)物中主要的苯酚類物質(zhì)含量顯著降低，即降低了小花清風(fēng)藤的毒性成分，生成了毒性較小或無毒的成分，間接降低了小花清風(fēng)藤的藥物毒性。食藥用真菌均能有效提升小花清風(fēng)藤的生物堿和三萜類化合物含量，其中福州靈芝發(fā)酵生物堿的含量提升最高；靈芝EN2發(fā)酵三萜類化合物的含量提升最高，且顯著提升齊墩果酸的含量；食藥用真菌均顯著降低了小花清風(fēng)藤中黃酮的含量，但福州靈芝和裂褶菌DS1顯著提高槲皮素的含量。探討了小花清風(fēng)藤經(jīng)7種食藥用真菌發(fā)酵后的水提取物對肝癌HEPG2細(xì)胞和人正常肝細(xì)胞L02增殖的影響。結(jié)果表明，4種靈芝發(fā)酵提取物均對HEPG2細(xì)胞的增殖有顯著的抑制作用，不同靈芝菌株間呈現(xiàn)差異。小花清風(fēng)藤對人正常肝細(xì)胞L02的增殖具有一定促進(jìn)作用，靈芝EN2發(fā)酵提取物對L02細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用加強(qiáng)，4種靈芝發(fā)酵物均能提高對肝過氧化氫損傷細(xì)胞的保護(hù)作用。小花清風(fēng)藤對丙肝病毒RNA的表達(dá)有一定的抑制作用，而真菌發(fā)酵后提取物作用效果不顯著。

簡介：ZHEJIANGAFUNIVERSITYDISSERTATIONFORTHEDEGREEOFMASTEREFFECTSOFDIFFERENTLYINDUCEDRESISTANCEINBRASSICACAMPESTRISLONPHYSIOLOGICALANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFSPODOPTERAEXIGUALEPIDOPTERANOCTUIDAEANDMETEORUSPULCHRICORNISHYMENOPTERABRACONIDAECANDIDATEHUANGJUANJUANADVISERLIUYAHUI，ASSOCIATEPROFESSORSPECIALTYPLANTPROTECTIONDATEOFSUBMISSIONDECEMBER21，2015ZHEJIANGAFUNIVERSITYLIN’AN，ZHEJIANGPROVINCE，PRCHINADECEMBER2015摘要摘要植物具備抵御植食性昆蟲危害的防御策略，并且在外界因子作用下植物的防御功能能被誘導(dǎo)增強(qiáng)。當(dāng)前一些研究表明植物誘導(dǎo)抗性對植食性昆蟲生長發(fā)育有抑制作用，但對寄生蜂生長發(fā)育的影響尚不清楚。甜菜夜蛾是我國重要的農(nóng)業(yè)害蟲，發(fā)生嚴(yán)重且難防治；斑痣懸繭蜂作為廣寄生性寄生蜂，能寄生多種鱗翅目幼蟲，對生物防治有重要意義。為了評(píng)價(jià)植物誘導(dǎo)抗性在植物一植食性昆蟲一寄生蜂三級(jí)營養(yǎng)關(guān)系中的作用，本文重點(diǎn)研究了以下內(nèi)容1甜菜夜蛾取食損傷、機(jī)械損傷和外源噴施茉莉酸甲酯對十字花科作物菜薹抗性的誘導(dǎo)作用；2幾種誘導(dǎo)抗性對甜菜夜蛾和斑痣懸繭蜂生物學(xué)特性的影響；3不同誘導(dǎo)抗性對甜菜夜蛾生理代謝的影響，探討植物防御酶活性與昆蟲解毒酶活性的關(guān)系；4誘導(dǎo)抗性和斑痣懸繭蜂寄生雙重選擇壓力下甜菜夜蛾幼蟲的保護(hù)酶活性和免疫功能。獲得以下主要研究結(jié)果1不同處理菜薹對甜菜夜蛾幼蟲和斑痣懸繭蜂生物學(xué)特性有顯著影響，取食損傷和茉莉酸甲酯處理誘導(dǎo)的植物反應(yīng)會(huì)影響甜菜夜蛾的存活和大小，進(jìn)而抑制斑痣懸繭蜂生長。2不同處理24H后顯著誘導(dǎo)菜薹苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶和過氧化物酶活性升高，同時(shí)影響取食后甜菜夜蛾幼蟲中腸羧酸酯酶和谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶活性。O1MMOL／L茉莉酸甲酯處理誘導(dǎo)幼蟲解毒酶活性升高的時(shí)間早于取食損傷。3誘導(dǎo)抗性對甜菜夜蛾免疫功能有顯著影響，其中取食損傷和茉莉酸甲酯處理可抑制幼蟲酚氧化酶活性。誘導(dǎo)抗性對免疫功能的影響隨著斑痣懸繭蜂寄生而不明顯，寄生成了影響免疫功能的主要因素。被寄生48H的寄主幼蟲血細(xì)胞數(shù)量和蛋白質(zhì)含量明顯下降，酚氧化酶活性顯著上升。關(guān)鍵詞斑痣懸繭蜂，誘導(dǎo)抗性，生物學(xué)特性，防御酶，解毒酶，酚氧化酶，生理代謝

簡介：目前國內(nèi)少有的一些研究表明入主要感染人隱孢子蟲（CRYPTOSPIDIUMHOMINIS），但CHOMINIS群體遺傳結(jié)構(gòu)尚不清楚，從而不能推斷人隱孢子蟲病的感染來源和傳播機(jī)制。本課題對開封地區(qū)人源隱孢子蟲分離株以基于SSURRNA基因的PCRRFLP方法為主要工具進(jìn)行種類和基因型鑒定、以GP60基因位點(diǎn)進(jìn)行亞型分析，從而解析CHOMINIS群體遺傳結(jié)構(gòu)，初步總結(jié)出入隱孢子蟲病的流行規(guī)律和傳播機(jī)制。并用CHOMINIS不同亞型分離株感染蒙古沙鼠、新生仔豬和羔羊，觀察其臨床癥狀和病理變化，從而研究不同亞型之間的生物學(xué)差異。同時(shí)對國內(nèi)主要CHOMINIS和微小隱孢子蟲CPARVUM基因亞型進(jìn)行致病性研究，了解國內(nèi)醫(yī)學(xué)上主要隱孢子蟲種生物學(xué)特性，以期為隱孢子蟲公共衛(wèi)生安全屏障的建立起到有效推動(dòng)作用。開封是國家精品旅游城市，以其獨(dú)特的旅游資源和深厚的旅游文化，每年接納數(shù)億海內(nèi)外游客，人員流動(dòng)性大，有利于機(jī)會(huì)性人獸共患寄生蟲傳播流行。為了解開封地區(qū)臨床病人隱孢子蟲感染狀況，用飽和蔗糖溶液漂浮法、甲醛乙酸乙酯改良抗酸染色法對該地區(qū)門診和住院病人6093份糞便樣品進(jìn)行了檢查。結(jié)果檢出隱孢子蟲感染率為01％，秋季為感染高峰期，6歲以下兒童感染率較高。所有分離株均為CHOMINIS，IB亞型家族占56，IA亞型家族16。研究表明開封地區(qū)臨床病人隱孢子蟲感染率較低，但仍應(yīng)進(jìn)一步開展健康教育，普及衛(wèi)生知識(shí)，提高自我保健意識(shí)和自我保健能力，預(yù)防食源性寄生蟲病的發(fā)生和流行。目前國內(nèi)一些研究表明入主要感染人隱孢子蟲CRYPTOSPIDIUMHOMINIS，但已獲取且傳代保存的國內(nèi)CHOMINIS分離株較少，CHOMINIS生物學(xué)特性研究未見報(bào)道。在本試驗(yàn)自感染前第10D起，采用胃導(dǎo)管灌服地塞米松抑制蒙古沙鼠MEIIONESUNGUICULATAUS免疫力直至排卵囊結(jié)束后14D，對國內(nèi)CHOMINISIB亞型分離株進(jìn)行生物學(xué)特性研究。結(jié)果顯示，感染后3D，感染組有卵囊排出，感染后第6D出現(xiàn)高峰期，此后還漸下降直至感染后10或11D排卵囊結(jié)束。感染前后基于18SRRNA和GP60基因分析，表明遺傳學(xué)無差異。建立了持續(xù)穩(wěn)定的CHOMINISIB亞型分離株嚙齒動(dòng)物模型，為CHOMINIS卵囊擴(kuò)增和進(jìn)一步研究其生物學(xué)特性等提供了重要的參考依據(jù)。為了尋求更為經(jīng)濟(jì)有效的CPARVUM卵囊保種傳代方法，將19日齡蒙古沙鼠隨機(jī)分成5組，免疫抑制對照組和感染組采用胃導(dǎo)管灌服地塞米松080MG只12D1，10D后，感染組沙鼠灌胃接種CPARVUM卵囊，對排卵囊規(guī)律，臨床表現(xiàn)及組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察。結(jié)果感染后第2D有卵囊排除，顯露期OPG值近似于犢牛實(shí)驗(yàn)，且持續(xù)時(shí)間較犢牛感染長，為CPARVUM卵囊保種傳代提供了更為經(jīng)濟(jì)的實(shí)驗(yàn)方法。為了初步確定人隱孢子蟲同一亞型家族內(nèi)不同亞型是否存在生物學(xué)表型差異，用分離自開封地區(qū)某醫(yī)院的CHOMINIS分離株ZZH1IBA20G2和WJH35IBA19G2感染新斷奶蒙古沙鼠，3日齡羔羊和仔豬；通過比較感染后動(dòng)物的臨床癥狀、蟲體寄生部位、寄生量和病理變化并測定感染動(dòng)物的排卵囊規(guī)律、體重變化等一系列指標(biāo)來初步確證不同亞型人隱孢子蟲致病性差異。研究結(jié)果顯示，不同亞型人隱孢子蟲的致病作用存在一定差異，為下一步隱孢子蟲毒理的深入研究奠定了理論基礎(chǔ)。為了研究人隱孢子蟲（CRYPTOSPIDIUMHOMINISIBA19G2）和微小隱孢子蟲CPARVUMⅡDA19G1對新生仔豬的致病性差異。將3日齡新生仔豬隨機(jī)分為三組，經(jīng)口感染不同基因型隱孢子蟲，對排卵囊規(guī)律，臨床表現(xiàn)及病理變化進(jìn)行觀察。結(jié)果CHOMINIS感染后潛隱期和顯露期均較CPARVUM長，顯露期CPARVUM平均OPG值大于CHOMINIS，感染后仔豬體重變化存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，CHOMINIS對體重影響較為嚴(yán)重。表明兩蟲株對新生仔豬致病性存在差異。

簡介：目的缺氧HYPOXIA被認(rèn)為是血管形成的關(guān)鍵因素因?yàn)槿毖鯒l件下可引起血管形成的關(guān)鍵因子血管內(nèi)皮生長因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACTVEGF形成。VEGF可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移、增加血管通透性因此被確認(rèn)為是血管生成的主要原因而血管內(nèi)皮生長因子刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管型的形成是通過與其相對應(yīng)特異性血管內(nèi)皮生長因子受體VULARENDOTHELIALGROWTHFACTRECEPTVEGFR結(jié)合產(chǎn)生效應(yīng)。缺氧對血管內(nèi)皮細(xì)胞功能及生長因子的作用仍不明確所以本實(shí)驗(yàn)嘗試研究在缺氧條件下對培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUMANUMBILICALVEINENDOTHELIALCELLSHUVEC血管內(nèi)皮生長因子以及膜表面受體表達(dá)的變化及其缺氧條件下對HUVEC生物學(xué)功能的影響。方法本實(shí)驗(yàn)以購買HUVEC細(xì)胞株為究對象HUVEC細(xì)胞傳代培養(yǎng)至第三代或第四代備用。分別在缺氧與常氧條件下培臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞比較兩種狀態(tài)下HUVEC增殖、遷移以及體外管腔能力免疫熒光染色比較VEGFR1、VEGFR2蛋白的表達(dá)變化RT–PCR檢測兩種條件下VEGFMRNA表達(dá)水平的改變。以上原始實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS130軟件分析數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差X±S表示兩樣本均數(shù)比較使用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)多個(gè)樣本兩兩比較先使用方差分析ANOVA然后使用多樣本兩兩比較中的SNK法進(jìn)行比較以P結(jié)果1、缺氧組與常氧組在24H、48H時(shí)無明顯差異性P005在96H缺氧組和常氧組比較細(xì)胞的增殖差異明顯P005在24H的時(shí)相點(diǎn)VEGF表達(dá)量開始增加P005。結(jié)論HUVEC在缺氧的作用下表現(xiàn)出了細(xì)胞增殖、遷移、體外管腔形成能力的減低VEGFR1、VEGFR2蛋白同時(shí)減少的但同時(shí)其比值大幅增加且VEGFMRNA表達(dá)增加。其結(jié)果表明缺氧時(shí)阻斷VEGF與VEGFR2結(jié)合產(chǎn)生的對內(nèi)皮細(xì)胞刺激反應(yīng)保持內(nèi)皮細(xì)胞相對的穩(wěn)定狀態(tài)以最大限度地保留血管內(nèi)皮細(xì)胞活力和恢復(fù)能力同時(shí)也為缺氧區(qū)血管新生創(chuàng)造了條件。

簡介：，J，7L爭午密級(jí)MT％ⅧLⅫ咿幽撼跨碩士學(xué)位論文￡ZO置塾壁鮑盒璧童堡燮壁蘭塑堂重絲學(xué)位中請人一單師娃廈職稱空艷鐘創(chuàng)光剮教授專業(yè)2稱堂塑芏中山大學(xué)碩士學(xué)位論文死亡率為O％，而且沒有明顯的中毒癥狀。通過紫外可見分光光度法研究了富勒胺A對02一和OH‘自由基的清除作用，結(jié)果表明富勒胺A對02”和OH。均有一定的清除效果。對于02”來說，當(dāng)富勒胺A在8779739UEDIILL濃度范圍內(nèi)時(shí)，清除率隨濃度增大而增大，富勒胺A濃度為58435UG／ND時(shí)，最高清除率達(dá)到5842％；對于OH’來說，當(dāng)富勒胺A在87500131250UG／ND濃度范圍內(nèi)時(shí)，清除率也隨濃度增大而增大，濃度為131250UG／ML時(shí)，最高清除率達(dá)到3614％。關(guān)鍵詞CM，NI13，合成，表征，急性毒性，超氧陰離子自由基，羥自由基Ⅱ

簡介：RAC1CDC42的效應(yīng)子PAK被不同的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)活化包括酪氨酸激酶受體和INTEGRINS受體并且它也調(diào)控著大量的生物學(xué)過程如細(xì)胞增殖和細(xì)胞遷移等。PAK的活化曾被報(bào)道對RAFMEKMAPK信號(hào)通路的最大活化是必須的可能是因?yàn)镻AK能夠同時(shí)活化PAF和MEK的緣故。在本論文中我們證實(shí)了起初被鑒定為ARAF激酶特異負(fù)調(diào)節(jié)子的TH1在細(xì)胞中也和PAK1有相互作用。熒光共聚焦顯微鏡分析顯示TH1和PAK1在細(xì)胞核和胞漿中都有共定位這種現(xiàn)象和我們目前的結(jié)果相一致。GSTPULLDOWN和免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)證實(shí)了TH1和PAK1能直接相互作用并且選擇性的結(jié)合到PAK1C端的激酶域上。TH1和PAK1結(jié)合的能力隨著PAK1的活化而增強(qiáng)和PAK1的這種結(jié)合形式暗示了他們間的相互作用部分是被PAK1激酶活性所調(diào)控的。正如體外激酶活性分析和WESTERNBLOT檢測所顯示的TH1抑制了PAK1激酶活性并且負(fù)調(diào)節(jié)了MAPK信號(hào)的傳導(dǎo)。有趣的是TH1在體內(nèi)和體外都和MEK1ERK結(jié)合但并不直接抑制他們的激酶活性。此外我們還觀察到TH1定位于遷移細(xì)胞前沿的粘附斑和纖維偽足上并且通過影響肌動(dòng)蛋白和粘附動(dòng)力學(xué)變化干擾了細(xì)胞的遷移。基于這些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)我們提出了一個(gè)模型TH1和PAK1相互作用并通過MAPK通路的上游特異地限制了MAPK模塊的活化從而影響了細(xì)胞的遷移。

簡介：CLASSIFIEDINDEX8533COILFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO100675DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEEXIANDANTIVIRDACTIVI‘ANA1“EXORESSIONANDANTIVIRALACTIVTYANALYSISLOFTHEGOOSEINTERFERONALPHAAMINOACIDSWITHNOREDUNDANCYINPICHIAPASTORISCANDIDATEZHUYONGMEISUPERVISORPROFESSORWANGJUNWEIDEGREECATEGORYMASTEROFAGRICULTURECONEGEVETERINARYMEDICINEFIRSTLEVELDISCIPLLINEVETERINARYSCIENCESSECONDLEVELDISCIPLINEPREVENTINEVETERINARYSCIENCESHARBINCHINAJUNE2013東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文24高密度發(fā)酵工藝的初步研究21241種子液的制備21242發(fā)酵罐的組裝與滅菌2L243高密度發(fā)酵重組畢赤酵母2L244發(fā)酵重組蛋白的檢測2125鵝洳干擾素抗病毒活性的測定。21251病毒的制備及效價(jià)測定。21252重組GOIFNA蛋白抗病毒活性的測定223結(jié)果與分析。2431鵝甜干擾素多克隆抗體的制備2431。L重組菌BL21／PWLGOLFNA的鑒定243I2大腸桿菌表達(dá)鵝洳干擾素表達(dá)與純化24313多克隆抗體血清效價(jià)檢測結(jié)果2532鵝小干擾素在畢赤酵母中的分泌表達(dá)26321PPICZAAGOLFNA酵母表達(dá)載體的構(gòu)建26322重組酵母的鑒定293。23GOLFN噸在畢赤酵母中的表達(dá)及鑒定3L324DOTELISA比較重組酵母的表達(dá)量。34325不同甲醇誘導(dǎo)濃度對蛋白表達(dá)量的影響3433高密度發(fā)酵表達(dá)重組GOLFNA36331不同時(shí)間點(diǎn)酵母菌體濕重36332間接ELISA法檢測重組GOLFNA蛋白的表達(dá)37333SDSPAGE檢測重組蛋白的表達(dá)及蛋白表達(dá)量。3734重組GOLFN噸抗病毒活性分析39341搖瓶發(fā)酵表達(dá)的重組GOIFN伍蛋白抗病毒效價(jià)39342高密度培養(yǎng)畢赤酵母表達(dá)重組蛋白的抗病毒活性40343不同時(shí)間點(diǎn)表達(dá)重組蛋白的抗病毒活性40344不同濃度重組鵝CI干擾素對病毒增殖的影響41345重組GOIFNA蛋白的抗病毒活性阻斷分析424討論4441表達(dá)載體的選擇4442獲得無冗余氨基酸鵝小干擾素的策略4443不同轉(zhuǎn)化方法的選擇4544重組鵝IFNA生物學(xué)活性4645糖基化修飾對蛋白的影響4646提高外源蛋白表達(dá)策略47IL

簡介：CHARACTERIZATIONOFBZIPTRANSCRIPTIONFACTORMOGCN4IN死陰孫陰尸D匠ZWED吠12么五ANDEFFECTOFCHEMICALCOMPOUNDSPOROTHRIOLIDEON』幽GMPDR冊飧弦4EBVZHANGJINLONGATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEMASTERDEGREEOFAGRICULTURESUPERVISEDBYPROFESSORZHANGZHENGGUANG一，一DEPARTMENTOFPLANTPATHOLOGYCOLLEGEOFPLANTPROTECTIONNANJNGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING210095，PRCHINAJUNE2015目錄目錄摘要IABSTRACTIII第一章GCN4生物學(xué)功能研究進(jìn)展11GCN4參與調(diào)控氨基酸的生物合成12GCN4參與調(diào)控未折疊蛋白反應(yīng)421PERKEIF2A介導(dǎo)的生存信號(hào)途徑一422ATF6介導(dǎo)的生存信號(hào)523IRE1介導(dǎo)的生存信號(hào)53GCN4參與氧化脅迫應(yīng)答64GCN4參與調(diào)控細(xì)胞壁完整性7參考文獻(xiàn)LO第一章稻瘟病菌BZIP轉(zhuǎn)錄因子MOGCN4的生物學(xué)功能分析171材料與方法1811供試菌株的培養(yǎng)及保存方法1812稻瘟病菌基因組DNA、RNA提取及EDNA的制各1913MOGCN4敲除突變體的獲得1914MOGCN4基因敲除突變體的生長速率測定2115MOGCN4基因敲除突變體致病力分析2116MOGCN4基因敲除突變體產(chǎn)孢測定2217MOGCN4基因敲除突變體對氧化脅迫耐受性分析2318MOGCN4基因敲除突變體對細(xì)胞壁脅迫耐受性分析2319MOGCN4基因敲除突變體對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力脅迫劑DTTTM敏感性測定242結(jié)果分析2421稻瘟病菌MOGCN4敲除突變體及其互補(bǔ)菌株的獲得一2422MOGCN4不參與調(diào)控稻瘟病菌的營養(yǎng)生長2523MOGCN4參與調(diào)控稻瘟病菌分生孢子的產(chǎn)生2624MOGCN4參與調(diào)控稻瘟病菌的致病力2725MOGCN4基因參與調(diào)控稻瘟病菌對氧化脅迫的應(yīng)答2826MOGCN4基因不參與調(diào)控稻瘟病菌對細(xì)胞壁脅迫的應(yīng)答29