簡介：貴州大學(xué)碩士學(xué)位論文喜樹小綠葉蟬生物學(xué)、生態(tài)學(xué)及防治研究姓名龍同申請學(xué)位級別碩士專業(yè)動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師熊繼文20060501貴州大學(xué)2006屆碩士學(xué)位論文ABSTRACTEMPOASCAACUMINATESPNOVASTHEDOMINANTPESTOFCAMPTOTHECAACUMINATADECNEWASANEWSPECIESTHEBIOLOGIEALANDECOLOGICALCHARACTERSANDCONTROLOFITWASSYSTEMICALLYSTUDIEDFORTHEFIRSTTIMETHESUMMARYWEREASFOLLOWS1ANALYSISONSEASONALDYNAMICSOFPOPULATIONNUMBEROFEACUMINATEONCACUMINATESHOWEDTHAT也EREWASONLYONEPEAKPMODOFTHEPOPULATIONNUMBEROFITINLIUZHIOFGULZHOUPROVINCEIN2005ITSPEAKPERIODRANGEDFROMSEPTOOCT2213EACUMINATEWERECATCHEDBY100COLLECTINGNETSWHICHWEREUSEDTOCATCHINSECTSPECIALLYEACUMINATEHIBERNATEDINWEEDSDURINGWINTERBYADULTS2HITHEFIELDCOMMUNITYOFCACUMINATEFROMSEPTEMBER13TO17TLLEDIVERSITYANDSTABILITYOFTHEMAINNATURALENEMIESANDEACUMINATEWEREANALYZEDTHERESULTSHOWEDTHATINSECTPOPNLATIONOFLUOBIEWASMORETHANOTHERFIELDS；THEINDEXOFSIMPSONANDSHANNONWIENERINACHAWERE07974AND23384RESPECTIVELYWHICHWERETHEHIGHESTTHANOTHERONES；ANDINSECTCOMMUNITVWASTHESTABLESTBECAUSECACUMINATEWASPLANTEDWITHOTHEREROPS；THEHARMSOFEACUMINATEINLUOBIEANDSUOGAWEREHEAVILYBECAUSECACUMINATEWEREPLANTEDINBIGFIELDWITHLITTLEOTHERCROPSANDTTEESWHICHCAUSEDTHELOWDIVERSITYANDTHEUNSTABLEINSECTCOMMUNITYTEMPORALNLCHESOFEACUMINATEANDDOMINANTNATURALENEMIESINCACUMINATEFIELDWEREESTIMATEDFROMMARCH2005TOJANUARY2006THETEMPORALDISTRIBUTIONOFTHISSPECIESONSEP29WASHIGHESTOCCUPING2485PERCENTTHEPOPULATIONOFTHESPIDERCATEGORYFOUOWEDTHEPOPULATIONOFEACUMINATECLOSELYTHEHARMOFEUSEELINARECATEGORYANDEACUMINATENFIXEDHEAVILYTHEINDEXOFOVERLAPNIEHESBETWEENEACUMINATEANDSPIDERCATEGORYWAS05981ITSHOWEDTHATSPIDERCATEGORYASAKINDOFNATURALENEMYOFPESTCONLDHAVEAGOODCONTROLOFPEST3THESPATIALDISTRIBUTIONPATTERNANDSAMPLINGTECHNIQUEOFEACUMINATEWERESTUDIED，THEREWASNOOBVIOUSDISTINETIUNAMONGTHESAMPLINGMETHODSOFTFIVEPOINTTYPE，RANDOMTYPEANDMONODIAGONALTYPESAMPLINGTECHNIQUESNLEDENSITIESOFNYMLOLHSANDADULTSOFTILESPECIESWEREDISTINCTLYDIFFERCNTINEASTSOUTH，WESTNORTH，ITWASBIGGESTINTHENORTH；BUTTHEREWASNOOBVIOUSDISTINETIONIN16LEAVESAIIINDEXESINDICATEDTHATTHEDISTRIBUTIONOFEACUMINATEINTLLELEAVESACCORDEDWITHTHEAGGREGATEPATTERNTHENYMPHSANDADULTSACCORDEDWITHTHEMODEOFNEGATIVEBINOMIALDISTRIBUTION4THEDEVELOPMENTALPERIODOFEACUMINATEWASSHORTERWITHHIGHERTEMPERATUREASAWHOLETHETHRESHOLDTEMPERATURESFORTHEEGGPREOVIPOSITIONANDCOMPLETEGENERATIONWERE801，1202，1019℃THEEFFECTIVETEMPERATURESLIMSFORTHESESTAGESWEREASSESSEDAT21833，19422AND62359DEGREEDAYRESPECTIVELY5THEDEATHRATEOF也EFIRSTINSTARNYMPHTHESECONDINSTARNYMPHOFEACUMINATEWEREHIGHINERVERYTEMPERATURENLCRATIOOFSEXWASNEARLYL111LEADULTSWERESTRONG，THEADAPTINGABILLTYWASHIGHTHEFIRSTINSTARTHESECONDINSTARWERETHEBESTSTAGESTOBECONTROLCD，ESPECIALLYTHEORIGINALINSTARUNDERTHECONDITIONOF18士1℃THELIFEOFPERFEMALEITSTHELONGESTONEINTHESEEXPERIMENTSWAS1229332DAYSITWAS447143DAYSAS也ESHORTESTUNDER27士1℃皿EHIGHERTHETEMPERATUREWAS，THEBIGGERTHEINTRINSICRATEOFINELEASERWASITWASHIGHESTUNDERTHEROOMTEMPERATURETHEAVERAGETEMPERATUREWAS26℃，BUTITWASLOWESTUNDER15士1℃THENETREPRODUCTIVERATEROWEREINLINEWITHTHETRENDINDEXOF4

簡介：狂犬?。≧ABIES）是由狂犬病病毒（RABIESVIRUS，RV）引起的一種人獸共患病。人和大多數(shù)溫血?jiǎng)游镆赘校R床上以怕光，精神沉郁，進(jìn)行性麻痹和最終死亡為主要特征，致死率幾乎100％。RV有N、P、M、G和L共5種結(jié)構(gòu)蛋白，其中，G蛋白是決定RV致病性的關(guān)鍵蛋白。許多研究表明G蛋白某些氨基酸位點(diǎn)的突變會改變RV的致病性以及病毒的一些生物學(xué)屬性，如胞間擴(kuò)散，膜融合，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等。而RV其它蛋白對其致病性是否有影響卻知之甚少。2006年，SHIMIZUK等人利用反向遺傳學(xué)技術(shù)把NICE（由固定毒株NISHIGAHARA在雞胚成纖維細(xì)胞中連續(xù)傳100代后獲得的，對成年小鼠無致病性）M蛋白基因替換成NISHIGAHARA株（固定毒株，腦內(nèi)接種可致死成年小鼠）M蛋白基因后，重組病毒CE（NIM）重新獲得了致病力，腦內(nèi)接種可致死成年小鼠。此結(jié)果為人們對RV致病機(jī)制的深入研究打開了新的篇章。因此，從多個(gè)角度進(jìn)一步探討M蛋白對RV致病性的影響對于明確RV的致病機(jī)制和有效防控狂犬病具有重要意義。本研究以探討單獨(dú)的M蛋白接種對RV致病性的影響為目的，進(jìn)行了如下試驗(yàn)1表達(dá)狂犬病病毒M蛋白的重組桿狀病毒的構(gòu)建和鑒定。試驗(yàn)內(nèi)容①以RTPCR技術(shù)擴(kuò)增狂犬病病毒BD06株M蛋白基因；②將M蛋白基因序列插入桿狀病毒載體質(zhì)粒PFASTBACI中，構(gòu)建重組質(zhì)粒PFASTBACIM；③用鑒定正確的重組質(zhì)粒PFASTBACIM轉(zhuǎn)化DH10BACECOLI感受態(tài)菌，構(gòu)建重組穿梭質(zhì)粒BACM，并以PCR法鑒定；④以脂質(zhì)體LIPOFECTAMINE2000介導(dǎo)重組穿梭質(zhì)粒BACM轉(zhuǎn)染SF9昆蟲細(xì)胞，獲取重組桿狀病毒ACMNPVM，取細(xì)胞病變上清，以電鏡觀察重組病毒形態(tài)；⑤用小鼠抗HIS標(biāo)簽單克隆抗體、兔抗RV陽性血清和犬抗RV陽性血清通過WESTERNBLOT方法鑒定重組M蛋白的表達(dá)及其反應(yīng)原性。2重組M蛋白的純化及多克隆抗體的制備。試驗(yàn)內(nèi)容①利用鎳離子親和層析柱純化重組M蛋白；②用純化的重組M蛋白免疫大耳白兔，每次免疫后1周，耳緣靜脈采血并分離血清；③通過WESTERNBLOT試驗(yàn)分析兔抗M蛋白多克隆抗體同狂犬病病毒AG株、PV2061株、SRV9株、CVS11株、ERA株和BD06株M蛋白之間是否存在交叉反應(yīng)；④以FAVN試驗(yàn)測定兔抗M蛋白多克隆抗體是否具有病毒中和活性。3M蛋白生物學(xué)特性初步研究。以探索接種M蛋白后對腦內(nèi)與外周攻毒小鼠潛伏期、發(fā)病率的影響為目的。具體試驗(yàn)步驟如下①將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為腦內(nèi)攻毒組和外周攻毒組兩個(gè)大組，兩組中又分別設(shè)立了高劑量攻毒組和低劑量攻毒組；②將純化的M蛋白與等體積油佐劑混合后分別于0D，7D，14D通過腹腔注射免疫四個(gè)大組中的小鼠，同時(shí)大組內(nèi)設(shè)立透析液組、ACMNPV組作為對照；③第3次免疫后，于第5天對小鼠進(jìn)行斷尾采血并分離血清，用WESTERNBLOT試驗(yàn)分析重組M蛋白免疫原性；④第3次免疫后1周，對兩大組小鼠分別進(jìn)行腦內(nèi)和外周肌肉注射攻毒試驗(yàn)，攻毒后連續(xù)觀察14天，記錄小鼠攻毒后的潛伏期、發(fā)病數(shù)以及死亡數(shù)。通過以上試驗(yàn)，獲得以下結(jié)果1成功構(gòu)建了重組桿狀病毒ACMNPVM，且該重組病毒電鏡下具有典型的桿狀病毒形態(tài)，其感染SF9昆蟲細(xì)胞后，通過SDSPAGE試驗(yàn)鑒定，重組桿狀病毒表達(dá)了一約25KD的蛋白，用小鼠抗HIS標(biāo)簽單抗、兔抗RV陽性血清和犬抗RV陽性血清通過WESTERNBLOT試驗(yàn)對其反應(yīng)原性鑒定，在25KD附近也出現(xiàn)了單一的條帶。2變性條件下純化的重組M蛋白SDSPAGE條帶單一，純度良好；透析復(fù)性后，以該純化M蛋白免疫大耳白兔制備的兔抗M蛋白多克隆抗體與現(xiàn)有主要狂犬病疫苗株及流行毒株M蛋白反應(yīng)性能良好，WESTERNBLOT鑒定結(jié)果顯示在25KD左右均出現(xiàn)了一特異性條帶；FAVN試驗(yàn)結(jié)果顯示，兔抗M蛋白多克隆抗體的病毒中和效價(jià)為0。3小鼠攻毒試驗(yàn)結(jié)果顯示，單獨(dú)接種M蛋白后，腦內(nèi)接種3LD50或50LD50狂犬病病毒CVS24株時(shí)，不同小組動(dòng)物的潛伏期、發(fā)病和死亡率均無明顯差異；外周接種100LD50狂犬病病毒BD06株時(shí)，ACMNPVM組的小鼠全部發(fā)病，透析液組和ACMNPV組小鼠死亡率為80（810）；外周接種3LD50狂犬病病毒BD06株時(shí)，ACMNPVM組、透析液組和ACMNPV組的小鼠均無發(fā)病。通過以上研究結(jié)果，得出以下結(jié)論1成功構(gòu)建了重組桿狀病毒ACMNPVM，且該重組病毒表達(dá)的M蛋白具有良好的反應(yīng)原性，為后續(xù)研究M蛋白其它生物學(xué)特性奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。2可用鎳離子親和層析法對桿狀病毒表達(dá)的M蛋白進(jìn)行純化；重組M蛋白免疫原性良好；制備的兔抗M蛋白多克隆抗體與現(xiàn)有狂犬病疫苗株及流行毒株均有良好反應(yīng)性；M蛋白誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的抗體無病毒中和活性。3單獨(dú)的M蛋白接種對不同組別中腦內(nèi)攻毒小鼠的潛伏期、發(fā)病率和死亡率的均無明顯影響；對不同劑量外周攻毒的小鼠的潛伏期也無明顯影響，但有提升小鼠的發(fā)病率的趨勢。提示單獨(dú)接種M蛋白可能會影響狂犬病病毒致病性。論文創(chuàng)新點(diǎn)1利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)了狂犬病病毒BD06M蛋白，建立了純化方法，制備了抗M蛋白多克隆抗體，為深入研究M蛋白的生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)。2探索了單獨(dú)的狂犬病病毒M蛋白接種對狂犬病病毒致病性的影響，為進(jìn)一步明確狂犬病病毒致病機(jī)制提供了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

簡介：20142014屆博士學(xué)位論文屆博士學(xué)位論文分子生物學(xué)中核心概念的語義分析分子生物學(xué)中核心概念的語義分析作者姓名楊維恒指導(dǎo)教師郭貴春教授學(xué)科專業(yè)科學(xué)技術(shù)哲學(xué)研究方向科學(xué)哲學(xué)培養(yǎng)單位科學(xué)技術(shù)哲學(xué)研究中心學(xué)習(xí)年限2010年9月至2014年6月二〇一四年六月THESISFDOCT’SDEGREESHANXIUNIVERSITY2014SEMANTICANALYSISOFTHECENTRALCONCEPTINMOLECULARBIOLOGYSTUDENTNAMEWEIHENGYANGSUPERVISPROFGUICHUNGUOMAJSEMANTICANALYSISOFTHECENTRALCONCEPTINMOLECULARBIOLOGYSPECIALTYPHILOSOPHYOFSCIENCEDEPARTMENTRESEARCHCENTERFPHILOSOPHYOFSCIENCETECHNOLOGYRESEARCHDURATION201009201406JUNE2014

簡介：分類號R73941密級公開JIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY3336620⑩單位代碼10422學(xué)號。羚14羔205耋7∥聲煮辦季～～一‘一，一蛙A州UU烈UU烈IVBK■1Y憧堂佶袷寺L零丁山一了J_二K影U天I。DISSERTATIONFORD0CTORAL_DEGREE專JK學(xué)位論文題目MED27在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的生物學(xué)功靛及機(jī)制研究STUDYON。THEBIOLOGICAL，F(xiàn)UNCTIONANDMECHANISMOFMED。27I‘NGLIOMA作者姓名馮斌一‘’“。_“墻養(yǎng)單位L曬床醫(yī)學(xué)院專業(yè)名稱外科學(xué)神經(jīng)外科’指導(dǎo)教師套肫娶師I4LRW7‘R2017年12月2罔原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名喇日期P哆，，關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印嘲洪他復(fù)制手段俯存論赫日匯編本學(xué)信僦實(shí)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文儲虢盟翩躲硪巫2

簡介：南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文高磷對乳鼠心肌細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)及聚磷菌的除磷作用姓名陳燕申請學(xué)位級別碩士專業(yè)營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師曹郁生20110609摘要量、骨橋蛋白OSTEOPONTINOPN含量及表達(dá)量情況的影響。高磷對乳鼠心肌細(xì)胞有著增殖抑制作用，與對照組相比，0D和第2D時(shí)各濃度之間對乳鼠心肌細(xì)胞增殖抑制無顯著差異PO05，從第4D起，所有高磷組細(xì)胞增殖抑制率均高于對照組PO05。鈣沉積影響結(jié)果表明，與對照組相比，三個(gè)高磷組鈣沉積量均明顯高于對照組P005，且鈣沉積含量與作用時(shí)間及濃度有密切關(guān)系。OPN含量及表達(dá)量含量結(jié)果顯示，與對照組相比，三個(gè)高磷組OPN含量及表達(dá)量顯著升高PO05，且隨著時(shí)間和濃度的增加而明顯增加。3根據(jù)C弱P嬲E3活性和DNALADDER方法評價(jià)了高磷對乳鼠心肌細(xì)胞凋亡的作用。高磷組乳鼠心肌細(xì)胞2D后凋亡蛋白酶CASPASE3含量增加，隨著濃度、時(shí)間的增加而加增加，CASPASE3含量由對照組1MMOL／L磷的0034PMOL／L上升至9MMOL／L磷的0344PMOL／L。在細(xì)胞培養(yǎng)后期，即培養(yǎng)6D后發(fā)現(xiàn)，高磷組6MMOL／L，9MMOL／L培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞產(chǎn)生凋亡片段。4從污水中分離到一株高效聚磷茵J12，經(jīng)生理生化以及16SRDNA鑒定為節(jié)桿菌屬的一個(gè)種ARTHROBACTERSP，以初始磷濃度為20MG／L的合成廢水，考查了溫度，PH值，接種量，以及微量元素對J12菌除磷特性的影響。結(jié)果表明當(dāng)培養(yǎng)溫度32℃，PH7，接種量LO％，種齡為16H，添加一定微量元素時(shí)，培養(yǎng)10H后，合成廢水中總磷由20MG／L降至O1MG／L，污水中磷的去除率達(dá)到995％。關(guān)鍵詞高磷；乳鼠心肌細(xì)胞；骨橋蛋白；鈣沉積；凋亡；聚磷菌除磷作用

簡介：原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含獲得廣西醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即在校期間論文的知識產(chǎn)權(quán)屬廣西醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存論文的電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本論文的部分或全部內(nèi)容，可以采用影印、復(fù)印或其他手段保存、匯編本論文，學(xué)?？梢韵驀矣嘘P(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。同意廣西醫(yī)科大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。保密論文在解密后遵守此規(guī)定。學(xué)位論文儲簽名驀璐簽字日期山，婷6月仫日7導(dǎo)師簽字簽字目期劫7歹年廠月，羅日目錄中文摘要1英文摘要5主要英文略寫列表LO第一章抗P185礎(chǔ)B2人鼠嵌合抗體輕、重鏈乳腺表達(dá)載體構(gòu)建1L1前言112材料與方法1421材料1422方法183結(jié)果3431抗P185P而B2人鼠嵌合抗體CHAB26重鏈基因H和輕鏈基因L的擴(kuò)增3432抗P1858而B2人鼠嵌合抗體CHAB26重鏈基因H和輕鏈基因L的亞克隆過程3433XHOI限制性內(nèi)切酶酶切乳腺特異性表達(dá)質(zhì)粒PBCL4034XHOI限制性內(nèi)切酶酶切重組克隆質(zhì)粒PEASYT1L／PEASYT1H4035乳腺特異性表達(dá)質(zhì)粒PBCLL／PBCLH的構(gòu)建414討論485參考文獻(xiàn)50第二章轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺生物反應(yīng)器模型的制備與檢測521前言一52

簡介：關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文，同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并向社會公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名導(dǎo)師簽名監(jiān)蘚齡日期型6／IO322各產(chǎn)地楹槨果實(shí)揮發(fā)性物質(zhì)成分27323楹槨果實(shí)揮發(fā)性物質(zhì)聚類分析圖。3133不同產(chǎn)地楹槨果實(shí)酚類物質(zhì)的比較31331不同產(chǎn)地楹槨的褐變度及多酚氧化酶活性的比較31332不同產(chǎn)地楹槨酚類物質(zhì)的分析比較333。4不同產(chǎn)地楹槨一年生實(shí)生苗生長動(dòng)態(tài)比較3435楹槨二年生實(shí)生苗抗逆性研究比較35351實(shí)生苗凈生長量以及根系活力變化比較35352不同產(chǎn)地楹槨實(shí)生苗逆境條件下ROS酶系及可溶性蛋白濃度的變化36353不同產(chǎn)地楹桴實(shí)生苗逆境條件下光合速率的變化39354不同產(chǎn)地楹槨實(shí)生苗逆境條件下熒光參數(shù)的變化43355不同產(chǎn)地楹槨實(shí)生苗枝條在不同溫度條件下電導(dǎo)度變化比較4936不同產(chǎn)地楹槨DNA指紋測定分析50361DNA的檢測結(jié)果50362初篩選的選擇性引物組合51363AFLP擴(kuò)增結(jié)果51364DNA指紋聚類分析結(jié)果534討論5441不同產(chǎn)地楹槨果實(shí)性狀的差異5442不同產(chǎn)地楹槨揮發(fā)性物質(zhì)與酚類物質(zhì)的研究比較5443楹槨實(shí)生苗生長動(dòng)態(tài)及抗逆性差異5644楹槨種質(zhì)遺傳多樣性研究575結(jié)論59參考文獻(xiàn)6L附錄68致謝69攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文70II

簡介：HAX1是一種抗凋亡蛋白，參與細(xì)胞遷移及細(xì)胞存活等過程調(diào)控，其編碼基因突變會導(dǎo)致重型先天性中性粒細(xì)胞減少癥（SEVERECONGENITALNEUTROPENIA，SCN3，又叫KOSTMANN綜合征）及神經(jīng)系統(tǒng)疾病。CABL非受體酪氨酸激酶參與氧化應(yīng)激過程調(diào)控，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞對氧化損傷的抵抗力。ROS（REACTIVEOXYGENSPECIES）激活胞漿中的CABL，通過調(diào)節(jié)過氧化氫酶（CATATLASE，CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GLUTATHIONEPEROXIDASE，GPX）將H2O2降解，而在無法控制的H2O2水平時(shí)則啟動(dòng)細(xì)胞凋亡機(jī)制。另外，過量的ROS會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)受損蛋白積累，蛋白酶體主要負(fù)責(zé)損傷蛋白的清除，而CABL可通過磷酸化蛋白酶體PSMA7亞基，進(jìn)而影響蛋白酶體復(fù)合物的功能。前期研究發(fā)現(xiàn)HAX1與CABL存在相互作用并且具有功能相關(guān)性。本研究旨在闡明HAX1與CABL相互作用的生物學(xué)意義及分子機(jī)制，包括HAX1的抗凋亡機(jī)制、CABL非受體酪氨酸激酶的活性調(diào)節(jié)機(jī)制及其氧化應(yīng)激下生物學(xué)功能的調(diào)控機(jī)制，為深入認(rèn)識HAX1相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理提供新的重要理論依據(jù)。在本研究中，首先通過免疫共沉淀、免疫印跡、INSITUPLA等技術(shù)證實(shí)HAX1和CABL確實(shí)存在相互作用，并且在氧化應(yīng)激（OXIDATIVESTRESS）及離子輻射（IONIZINGRADIATION，IR）等條件下二者的結(jié)合水平顯著升高，表明二者在應(yīng)激條件下發(fā)揮某種共同作用。正常狀態(tài)下CABL活性很低，處于自抑制狀態(tài)，應(yīng)激狀態(tài)下CABL被活化。通過特異性磷酸化抗體的WESTERNBLOT檢測發(fā)現(xiàn)，HAX1的結(jié)合促進(jìn)CABL蛋白的Y412位酪氨酸磷酸化水平，而412位酪氨酸的磷酸化水平代表了其活性狀態(tài)。在對細(xì)胞進(jìn)行H2O2處理之后，HAX1顯著增強(qiáng)氧化應(yīng)激條件下H2O2對CABL的酪氨酸激酶的激活功能，表明HAX1可以通過調(diào)節(jié)CABL活性來影響其生理功能如抗氧化損傷。另一方面，過度激活的CABL會啟動(dòng)降解機(jī)制，而前期研究發(fā)現(xiàn)HAX1降低CABL半衰期，可能是通過促進(jìn)其蛋白酶體降解實(shí)現(xiàn)。為證實(shí)這一設(shè)想，我們在HEK293及MCF7細(xì)胞系中分別檢測過表達(dá)及內(nèi)源性CABL的泛素化水平，發(fā)現(xiàn)外源過表達(dá)的HAX1可以顯著增強(qiáng)CABL的泛素化水平；而將MCF7細(xì)胞中的HAX1進(jìn)行RNAI之后，CABL的泛素化修飾幾乎檢測不到，說明HAX1的確可以促進(jìn)CABL的泛素化降解。我們知道，CCBL是介導(dǎo)CABL泛素化的泛素連接酶（UBIQUITINLIGASE，E3），通過一系列實(shí)驗(yàn)我們證實(shí)HAX1正是通過介導(dǎo)CABL與其E3CCBL的結(jié)合來調(diào)節(jié)其泛素化修飾。以上說明HAX1對CABL的調(diào)控是雙面的一方面HAX1促進(jìn)CABL在特殊條件下的活化，而當(dāng)CABL過度激活時(shí)，HAX1又會介導(dǎo)CABL與其E3結(jié)合，促進(jìn)其泛素化降解，從而使得細(xì)胞內(nèi)CABL的活性保持在一個(gè)合適水平，實(shí)現(xiàn)自我調(diào)控。既然HAX1與CABL在氧化應(yīng)激條件下相互作用增強(qiáng)，并且顯著激活CABL的酪氨酸激酶活性，我們不難設(shè)想二者在抗氧化損傷方面行使某些共同的作用。我們首先構(gòu)建HAX1KNOCKDOWN（HAX1SIRNA）、CABLARGKNOCKDOWN（CABLARGSIRNA）及CABLARGHAX1KNOCKDOWN（CABLARGHAX1SIRNA）穩(wěn)定細(xì)胞系，利用流式細(xì)胞儀技術(shù)分析三種細(xì)胞系中的ROS水平及細(xì)胞凋亡程度，發(fā)現(xiàn)三種細(xì)胞系中ROS含量及凋亡率都升高至一個(gè)相似水平。當(dāng)我們在HAX1SIRNA細(xì)胞中回復(fù)表達(dá)CABL后，ROS水平有明顯下降，而回復(fù)表達(dá)HAX1于CABLARGHAX1SIRNA中ROS則無明顯差異。而且，CABL特異性抑制劑STI571（IMATINIB）處理之后，HAX1的抑制對細(xì)胞凋亡水平無甚影響。以上表明，HAX1的抗凋亡功能尤其是對抗氧化損傷導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡功能依賴于CABL酪氨酸激酶。除了可通過磷酸化CAT、GPX直接介導(dǎo)ROS降解之外，我們的工作發(fā)現(xiàn)CABL還可調(diào)節(jié)蛋白酶體的活性以清除氧化環(huán)境下細(xì)胞內(nèi)積累的損傷蛋白。通過對CABLARGSIRNAMCF7及其野生型細(xì)胞內(nèi)的蛋白酶體含量及活性分析后發(fā)現(xiàn)，ROS刺激后MCF7細(xì)胞中蛋白酶體水平升高，而CABLKD之后蛋白酶體復(fù)合物水平并未受ROS影響。不僅如此，隨著H2O2濃度的升高，KD細(xì)胞內(nèi)蛋白酶體的降解能力持續(xù)降低（圖14C），可能與ROS導(dǎo)致的蛋白酶體失活有關(guān)，然而在野生型MCF7細(xì)胞內(nèi)卻不存在這種現(xiàn)象，可能是因?yàn)镽OS刺激導(dǎo)致的蛋白酶體含量的增多抵消了這種不足，這表明，CABL激酶可以通過調(diào)節(jié)蛋白酶體復(fù)合物含量及其蛋白質(zhì)降解能力來應(yīng)對氧化應(yīng)激環(huán)境。HAX1的遺傳性突變會導(dǎo)致SCN的發(fā)生，本研究發(fā)現(xiàn)，SCN相關(guān)的HAX1突變體無法正常調(diào)節(jié)CABL，包括活性調(diào)節(jié)、表達(dá)水平調(diào)節(jié)及抗氧化損傷調(diào)節(jié)，表明HAX1CABLROS途徑可能與SCN的發(fā)生有關(guān)。通過進(jìn)一步研究，我們證實(shí)CABL特異性激活劑DPH可以保護(hù)MCF7、SHSY5Y和體外培養(yǎng)的中性粒細(xì)胞（POLYMPHONUCLEARNEUTROPHILS，PMN）免受HAX1缺失引起的氧化損傷。以上說明HAX1突變導(dǎo)致的SCN是由于CABL活性失調(diào)導(dǎo)致的PMN氧化損傷引起的。臨床研究發(fā)現(xiàn)，CABL抑制劑類藥物在治療CML時(shí)常伴有中性粒細(xì)胞減少癥副作用的發(fā)生。事實(shí)上，CABL特異性抑制劑NILOTINIB確實(shí)可以造成誘導(dǎo)分化的類中性粒細(xì)胞（PMNLIKE）和小鼠體內(nèi)的PMN氧化損傷，而抗氧化劑GSH（GLUTATHIONE）則可以保護(hù)這些細(xì)胞。CABL激活劑DPH同GSH一樣，可以緩解HAX1缺失導(dǎo)致的PMNLIKE氧化損傷并且可以延長氧化應(yīng)激環(huán)境下體外培養(yǎng)的PMN的生存壽命。這個(gè)結(jié)果進(jìn)一步印證了上述結(jié)論，并且為治療或緩解SCN及CML病人的副作用提供了一個(gè)重要的理論研究基礎(chǔ)，即利用GSH等抗氧化劑進(jìn)行臨床治療，該方法相對傳統(tǒng)方法更為經(jīng)濟(jì)便捷。本研究闡明了應(yīng)激條件下CABL活性調(diào)節(jié)的機(jī)制，并將HAX1抗凋亡蛋白與CABL非受體酪氨酸激酶及泛素蛋白酶體系統(tǒng)的功能聯(lián)系起來，首次解釋了HAX1如何對抗氧化損傷導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。同時(shí)深入探索HAX1相關(guān)疾病如KOSTMANN綜合征的致病機(jī)制，為尋求早期干預(yù)及治療方案提供了較為關(guān)鍵的理論基礎(chǔ)。

簡介：ZHEJIANGAFUNIVERSITYDISSERTATIONFORTHEDEGREEOFMASTER誓LJSTUDYONTHEREPRODUCTIVEBIOLOGYOFSTYRAXTONKINENSISCANDIADATEWUJUNADVISERHEYUNHE，PROFESSORASSOCIATESUPERVISORLIUXINHONG，RESEARCHERSPECIALITYLANDSCAPEPLANTSANDORNAMENTALHORTICULTUREDATEOFSUBMISSIONJUNE8，2013ZHEJIANGAFUNIVERSITYLIN’AN，ZHEJIANGPROVINCE，PRCHINAJUNE2013摘要摘要白花樹STYRAXTONKINENSISPIERRECRAIBEXHARTW是多種用途集一體的優(yōu)良速生樹種。本文以江西吉水種源地的白花樹為試驗(yàn)材料，對其物候期、配子體發(fā)育、花粉形態(tài)和活力、種子生物學(xué)特性等方面進(jìn)行研究，對揭示其生殖生物學(xué)特性及今后育種工作的開展具有現(xiàn)實(shí)意義。主要研究結(jié)果如下1物候觀測2012年白花樹萌芽期在2月20日左右；展葉期到落葉期可持續(xù)240D左右；初花期到落花終期可持續(xù)約18D，盛花期可維持7D左右，單花壽命平均約5D。果實(shí)生長分“快速生長期”、“緩慢生長期”、“生長停滯期”三個(gè)階段。在陽光充足區(qū)域，白花樹生長比較快速，花期早、結(jié)實(shí)率高、果實(shí)質(zhì)量高且落葉晚，說明該樹種為陽性樹種，適宜陽光充足的環(huán)境。2配子體發(fā)育過程白花樹花藥4室，花藥壁由內(nèi)向外分別為絨氈層、中層、藥室內(nèi)壁和表皮。花藥壁發(fā)育屬于基本型，絨氈層屬于腺質(zhì)型。胞質(zhì)分裂為同時(shí)型，成熟花粉粒為2細(xì)胞型，具有3個(gè)萌發(fā)孔；子房3室，胚珠多數(shù)，倒生，具雙珠被，厚珠心，中軸胎座。胚囊發(fā)育類型為蓼型，大孢子母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂后形成線型四分體，合點(diǎn)端的1個(gè)發(fā)育成功能大孢子，近珠孔端的三個(gè)退化。雄蕊發(fā)育早于雌蕊，開花后雌雄蕊趨于同熟。3花粉生物學(xué)特性白花樹花粉粒為長球型，具3孔溝，外壁面具細(xì)網(wǎng)狀紋飾；花粉平均極軸長52330577岬，平均赤道軸長26890502GIN；3種花粉生活力測定方法中以離體培養(yǎng)基法最有效，花粉萌發(fā)的最佳組合為10％蔗糖O05G／L硼酸100MG／LGA3赤霉酸3H處理4A281C2D3；隨著貯藏時(shí)間的增加，花粉生活力呈下降趨勢，花粉最佳貯藏條件為80℃密封保存。4種子生物學(xué)特性白花樹2011、2012年的種子平均長度和寬度為877MM、608MRFL和791MM、520MM，種子千粒重分別為13670G、9568G。對3種不同處理的種子吸水性能進(jìn)行測定，結(jié)果表明去殼種子吸水性能優(yōu)于酸蝕和完整的種子。種子生活力的TTC染色檢測結(jié)果表明，2011年產(chǎn)的種子生活力為9778％，貯藏1A后的種子生活力仍高達(dá)9444％。不同濃度GA3種子處理結(jié)果表明，促進(jìn)種子萌發(fā)及幼苗生長的最適濃度為L500MG／L。

簡介：浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院博士學(xué)位論文白菜同核異質(zhì)雄性不育系與其保持系生物學(xué)差異比較及相關(guān)差異表達(dá)基因克隆姓名向珣申請學(xué)位級別博士專業(yè)蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師曹家樹20080112摘要受同核異質(zhì)的影響但趨勢一致。將差異片段回收、克隆、測序，獲得9個(gè)EDNA差異片段，在GENBANK數(shù)據(jù)庫進(jìn)行同源序列比對和功能預(yù)測。5運(yùn)用EDNAOAFLP篩選得到G早、中期花蕾提早表達(dá)的MYB1IKE差異片段，利用RACE克隆得到該片段的EDNA全長，命名為BCMYBOGUGENBANK登錄號EFL27861，對其氨基酸序列和表達(dá)特征進(jìn)行研究。結(jié)果表TLJBCMYBOGU具有典型的MYBDNA結(jié)合域W殘基和SHAL】QKYRF】基序；系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示BCMYBOGU與ATMYB26ATMYB32和ATMYB4等聚類在同一分支；RTPCR分析表明BCMYBOGU在蓮座葉、花莖和花蕾中均有表達(dá)，但在G花蕾中表達(dá)量顯著上升。B的類黃酮含量隨著花蕾的發(fā)育而增加，而G早期花蕾類黃酮含量較B低，且隨花蕾的發(fā)育呈現(xiàn)下降趨勢，RTPCR分析表明，花蕾中參與調(diào)控苯丙烷代謝途徑9個(gè)關(guān)鍵酶尉￡2，OMTL、4CL3，CHS，F(xiàn)3H，丹W、FLSL，DFR，ANS的表達(dá)模式發(fā)生變化，由此推測BCMYBOGU是一個(gè)新的與白菜OGURACMS相關(guān)的IVLYB家族新成員，白色花藥可能與絨氈層細(xì)胞苯丙烷代謝途徑有關(guān)。6采用CDNAAFLP分析，發(fā)現(xiàn)一個(gè)在B早期花蕾不表達(dá)但在G花蕾中穩(wěn)定表達(dá)的差異片段。利用RACE技術(shù)獲得其EDNA全長，命名為BCBHLHOGUGENBANK登錄號EFL27860。該基因編碼122個(gè)氨基酸，具有BASICHELIX100PHELIXBHLH結(jié)構(gòu)域；進(jìn)化分析表明，BCBHLHOGU與ATBHLH060同源性最高，是冗余基因ATBHLHS060／048的直系同源基因，其功能與BEESL／2／3三個(gè)BR信號的早期應(yīng)答冗余基因相似。同時(shí)G雄蕊花絲顯著變短、雌蕊變長、花藥不開裂，花蕾發(fā)育過程中G的JA含量顯著低于B，由此推導(dǎo)BCBHLHOGU是白菜BHLH轉(zhuǎn)錄因子家族的一個(gè)新成員，涉及到花器官發(fā)育信號事件，其功能與BR應(yīng)答有關(guān)。7利用CDNAAFLP分析獲得在P晚期花蕾中特異表達(dá)的差異片段PA9T4。該片段與甘藍(lán)BOTMT2高度同源。擴(kuò)增得其CDNA和基因全長，命名為BCTMTPGENBANK登錄號EFL27862，編碼227個(gè)氨基酸，推測其分子量為2517KDA。BCTMTP含有典型的轉(zhuǎn)甲基酶MOTIFI、Ⅱ和III，含有7個(gè)內(nèi)含子和8個(gè)外顯子。內(nèi)源激素測定結(jié)果表明，P中到晚期花蕾的發(fā)育過程中，LAA含量呈顯著的上升趨勢；P花蕾JA含量極低，且中到晚期花蕾JA含量呈下降趨勢，IAAIJA的比值也存在差異。由此推定，BCTMTP的表達(dá)可能與P花蕾中JA和IAA兩種激素信號的互作有關(guān)。是否如此，尚待進(jìn)一步研究確認(rèn)。關(guān)鍵詞白菜BRASSICACAMPESTRIS；ARAPA；同核異質(zhì)；CMS花蕾激素；苯丙烷代謝；小孢子發(fā)生；差異表達(dá)；CDNAAFLP基因；克??；特征分析

簡介：分類號UDCLILLLLILLLILLLILLLIIY3280808密級編號角方霜糾碩士學(xué)位論文用于口腔骨組織修復(fù)藻酸鈣凝膠的制備及生物學(xué)性能研究THEPREPARATIONANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCALCIUMALGINATEHYDROGELSFORORALBONETISSUEREPAIRING導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型論文提交日期陳路沅高杰碩士學(xué)位論文用于口腔骨組織修復(fù)藻酸鈣凝膠的制備及生物學(xué)性能研究碩士研究生陳路沅指導(dǎo)教師高杰摘要目的本課題旨在制備有助于VI腔牙周骨組織再生的可載藥海藻酸鈣凝膠及其納米復(fù)合材料，檢測材料物理性能，同時(shí)檢測體內(nèi)和體外生物學(xué)性能，最后研究復(fù)合材料的抗菌能力。為后期進(jìn)行3D打印復(fù)合支架的研究和其臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。材料與方法材料海藻酸鈉粉末、氯化鈣粉末、牛血清百蛋白、‘高糖培芥茁、一BF、電而清、青鏈霉素抗菌劑、膠原酶、PBS溶液、二甲基亞砜、MTT檢測試劑盒、成品納米銀、LB營養(yǎng)培養(yǎng)基、蘇木素、伊紅、二甲苯、冰凍切片機(jī)、倒置顯微鏡、MICROCT機(jī)。方法離子交聯(lián)法制各海藻酸鈣水凝膠后進(jìn)行成分檢測；使用BCA比色法測量材料蛋白釋放量；監(jiān)測于重與濕重進(jìn)行吸水率測定；分別測量3天、7天、14天、28天及56天時(shí)預(yù)定時(shí)間點(diǎn)的干重及濕重，分析材料降解情況；進(jìn)行牙周膜細(xì)胞原代的培養(yǎng)，使用免疫組化染色進(jìn)行鑒定；MTT四唑鹽法檢測人牙周膜細(xì)胞HPDLCS的增殖及海藻酸鈣水凝膠對細(xì)胞毒性；RTPCR檢測材

簡介：BREEDINGOFSQRT3，ANANTAGONISTICBACTERIAOFR4乙S刃DM乙4SM4NACEARUM,ANDBIOLOGICALEFFECTSOFTHEMUTANTSTRAINSBYWEICONGHUSUPERVISEDBYPROF．BIAOSHENADISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFMASTERCOMPLETEDINJUNE，2014目錄目錄摘要???????????????????????????????????????????????????IABSTRACT??????????????????????????????????????????????。III第一章文獻(xiàn)綜述?????????????????????????????????。11青枯病研究進(jìn)展??????????????????????????????．．．?．11．1病原菌的分類及生物學(xué)特性?????????????????????????11．2青枯病的發(fā)病條件和癥狀??????????????????????????11．3青枯菌致病機(jī)理??????????????????????????????21．4青枯病的防治???????????????????????????????32．1芽孢桿菌在植物病害生物防治中的應(yīng)用現(xiàn)狀??????????????????42．2芽孢桿菌在植病生防中的作用機(jī)制??????????????????????53微生物誘變育種????????????????????????????????．83．1物理誘變?????????????????????????????????83．2化學(xué)誘變?????????????????????????????????94本研究的目的和意義??????????????????????????????115技術(shù)路線??????????????????????????????????一12第二章青枯病拮抗菌SQRT3的誘變選育??????????????????????131實(shí)驗(yàn)材料???????????????????????????????????131．1供試菌株?????????????????????????????????131．2培養(yǎng)基?????????????????????????????????．．131．3主要試劑????????????????????????????????一142實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????????????????．．142，1菌株的復(fù)壯???????????????????????????????～142．2紫外致死率測定?????????????????????????????．．14213亞硝酸鈉致死率測定???????????????????????????．．152．5突變株篩選???????????????????????????????一152．6突變株穩(wěn)定性研究????????????????????????????一162．7突變株的生物學(xué)特性研究?????????????????????????一163實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析???????????????????????????????一173．1菌株復(fù)壯????????????????????????????????。173．2菌株紫外致死率測定和正突變率統(tǒng)計(jì)????????????????????～173．3亞硝酸鈉致死率測定???????????????????????????．．183．4多次復(fù)合誘變篩選結(jié)果???????????????????????????18

簡介：光生物調(diào)節(jié)PBM通過光線影響內(nèi)源光感受器的活性，激活線粒體逆行信號傳導(dǎo)途徑改變細(xì)胞增殖和代謝。低水平激光LLL）是用于光生物調(diào)節(jié)的常見光源。光譜中這個(gè)區(qū)域中的光可以穿透組織且不具有致癌性質(zhì)。低水平激光LLL已作為非侵入性物理治療應(yīng)用于臨床，例如骨質(zhì)疏松癥，通過改變骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的狀態(tài)來發(fā)揮作用。由于光療法廣泛用于醫(yī)學(xué)，干細(xì)胞療法和光療法的組合似乎是一個(gè)更加明智的選擇。LLL對人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞HADSCS的效應(yīng)機(jī)制仍有待研究。一種可能的機(jī)制是線粒體呼吸鏈中的細(xì)胞色素C氧化酶參與光子吸收。微陣列技術(shù)發(fā)現(xiàn)輻照后涉及能量產(chǎn)生和細(xì)胞抗氧化保護(hù)途徑的基因表達(dá)顯著上調(diào)。在本文的第一部分，評估了LLL對細(xì)胞活力，遷移，抗凋亡能力的影響以及探討了相關(guān)機(jī)制。使用MTS測量細(xì)胞增殖，并通過流式細(xì)胞術(shù)FLOWCYTOMETRYFCM檢測細(xì)胞周期。通過TEM、FCM、QRTPCR和免疫熒光評價(jià)LLL對線粒體生物發(fā)生（分裂和融合）和功能ATP，ROS，NO的影響。使用TRANSWELL、免疫熒光、ELISA和WESTERNBLOT評估細(xì)胞遷移和細(xì)胞骨架改變（肌動(dòng)蛋白和微管蛋白）。使用流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光和WESTERNBLOT評估細(xì)胞凋亡。研究了低水平激光LLLLLL照射1小時(shí)后繼續(xù)培養(yǎng)6小時(shí)或24小時(shí)后MSCS上述各項(xiàng)指標(biāo)的變化。作用機(jī)制包括增殖速率增加介導(dǎo)的S期比例上調(diào)通過融合（MFN1，MFN2和OPA1）和分裂（FIS1，DRP1和MTP18）相關(guān)蛋白介導(dǎo)的線粒體生物發(fā)生，以及NRF1，TFAM，PGC1A表達(dá)上調(diào)和細(xì)胞內(nèi)ROS和NO濃度變化介導(dǎo)的線粒體功能改變通過ERK12和FAK途徑以及生長因子如HGF和PDGF的上調(diào)引起細(xì)胞遷移加速通過增加BCL2和降低BAX蛋白表達(dá)量，或者LLL處理的MSC與5氟尿嘧啶誘導(dǎo)凋亡的MSC之間形成隧道納米管TNT來抵抗凋亡。MSCS在動(dòng)物模型和臨床上獲得了良好治療效果，對于MSCS和基于它的產(chǎn)品在再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用將會被持續(xù)探討。MSCS促進(jìn)組織救援治療的機(jī)制包括1涉及到蛋白多肽以及激素分泌的旁分泌作用2通過隧道納米管或者微囊泡轉(zhuǎn)移線粒體3通過外泌體EXOSOMES轉(zhuǎn)移RNA等分子。MSC被募集到應(yīng)激或炎癥部位以實(shí)現(xiàn)其修復(fù)功能。MSCS的免疫調(diào)節(jié)不是自發(fā)的，需要“授權(quán)”或激活來發(fā)揮其免疫抑制作用。MSCS表面表達(dá)TOLL樣受體TLR，TLR信號傳導(dǎo)參與MSCS的許可。MSC表面表達(dá)的TLR3和TLR4可分別被雙鏈RNA如POLYI∶C和脂多糖LPS所激活?；罨疶LR4信號后MSCS會釋放增強(qiáng)炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子（IL6，IL8和TGFB等）從而極化成MSC1型促炎細(xì)胞，MSC1型細(xì)胞能活化T細(xì)胞相反，激活TLR3信號后，MSCS會產(chǎn)生抑制炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子（IDO，PGE2，IL4和IL1RA）極化成MSC2抑炎細(xì)胞，MSC2型細(xì)胞具有抑制淋巴細(xì)胞增殖的能力。在本文的第二部分，探討了LLL對TLR4誘導(dǎo)因子LPS介導(dǎo)的MSCS炎癥反應(yīng)的抑制作用。通過ELISA試劑盒和QRTPCR評價(jià)炎性因子表達(dá)和分泌，用CMH2DCFDA和DAFFM試劑盒測量細(xì)胞內(nèi)ROS和NO含量變化，發(fā)現(xiàn)LLL降低LPS誘導(dǎo)MSC中IL1Β，IL6，IL8，ROS和NO的分泌。免疫熒光檢測NFΚB在LLL照射的MSC中核易位相對于LPS誘導(dǎo)組顯著下降。WESTERNBLOT分析表明，LLL通過調(diào)節(jié)P65和IΚBΑ的磷酸化抑制NFΚB的活化。將純化的外周血單核細(xì)胞PBMC通過植物凝集素PHA刺激后與3種方式處理的MSCS共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，LLL處理后的MSC顯著降低淋巴細(xì)胞激活標(biāo)記CD25和CD69在PHA刺激的淋巴細(xì)胞上的表達(dá)。綜上所述，使用1116JCM2劑量的LLL促進(jìn)MSCS的增殖，遷移和抗凋亡能力以及加強(qiáng)其抑炎作用。LLL可以作為MSC在移植前預(yù)處理手段，以達(dá)到基于干細(xì)胞治療的安全和長期功效。

簡介：分類號R7379UDC密級重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目RNAI沉默沉默GRP94表達(dá)對乳腺癌表達(dá)對乳腺癌MCF7細(xì)胞生物學(xué)特細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及機(jī)制的研究性的影響及機(jī)制的研究作者姓名樊建軍樊建軍申請學(xué)位級別碩士學(xué)科、專業(yè)名稱生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)論文答辯年月2015年5月2015年4月指導(dǎo)教師姓名（職稱、單位名稱）宋方洲宋方洲教授教授重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文1英文英文縮略語名詞對照縮略語名詞對照英文縮寫英文縮寫英文全稱英文全稱中文全稱中文全稱CCK8CELLCOUNTINGKIT8細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒DEPCDIETHYLPYROCARBONATE二乙基焦磷酰胺ERKEXTRACELLULARREGULATEDPROTEINKINASES細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶GRP94GLUCOSEREGULATEDPROTEIN葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94HHOUR時(shí)HSP90HEATSHOCKPROTEIN90熱休克蛋白90IHCIMMUNOHISTOCHEMISTRY免疫組織化學(xué)KBKILOBASEPAIR千堿基對MCF7MICHIGANCANCERFOUNDATION–7乳腺癌細(xì)胞系7MGMILLIGRAM微克MINMINUTE分MLMICROLITER微升MRNAMESSENGERRIBONUCLEICACID信使核糖核酸PCRPOLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈反應(yīng)QRTPCRQUANTIFICATIONALREALTIMEPOLYMERASECHAINREACTION實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RNAIRNAINTERFERENCERNA干擾RPMREVOLUTIONSPERMINUTE每分鐘轉(zhuǎn)速SDSSODIUMDODECYLSULPHATE十二烷基硫酸鈉SIRNASMALLINTERFERINGRNA小干擾RNATEMEDTETRAMETHYLETHYLENEDIAMIN四甲基乙二胺TGFΒTRANSFMINGGROWTHFACTBETA轉(zhuǎn)化生長因子ΒΜGMICROGRAM微克UPRUNFOLDEDPROTEINRESPONSE未折疊蛋白反應(yīng)

簡介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。期幽內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名繭選盈指導(dǎo)教師簽名盛STUDYONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFLEPTOSPHAERIABIGLOBOSAINOILSEEDRAPEABSTRACTBLACKLEGISONEOFTHEIMPORTANTDISEASESINTHERAPESEEDPRODUCTIONTHISDISEASEISRELATIVELYSERIOUSINTHEUNITEDSTATES，AUSTRAII如CANADA，EUROPEANDOTHERPLACESPATHOGENSOFBLACKLEGHAVETWOSPECIESSTRONGPATHOGENICITYLEPTOSPHAERIAMACULANSANDWEAKPATHOGENICITYLEPTOSPHAERIABIGLOBOSAINTHISSTUDYSTRMNSCOLLECTEDFROMDIFFERENTPROVINCESWEREIDENTIFIEDTHROUGHITSANALYSISTODETERMINETHETYPEOFBLACKLEGSTRAININOURCOUNTRYTEMPERATURE，HUMIDITY，ILLUMINATIONTIME，DIFFERENTCARBONANDNITROGENSOURCESANDDIFFERENTRAPEVARIETIESLEAFJUICEWHICHCOULDINFLUENCE三BIGLOBOSACONIDIUMGERMINATIONWERETESTED，PROVIDINGTHEORETICALBASISFORPREVENTIONANDCONTROLOFRAPEBLACKLEGFIVEDEFENSEENZYMESPEROXIDASEPOD，CATALASECAT，SUPEROXIDEDISMUTASESOD，POLYPHENOLOXIDASEPPOANDPHENYLALANINEAMMONIAENZYMEPALOFDIFFERENTRESISTANTVARIETIESCHANGEDAFTERINFECTEDBYLBIGLOBOSA，WHICHREVEALEDPLANTPHYSIOLOGICALANDBIOCHEMICALASPECTSOFTHEDEFENSEMECHANISMDETAILEDRESULTSWEREASFOLLOWS1THESEQUENCESOF19STRAINSWEREANALYZEDTHEYHADHIGHSEQUENCEHOMOLOGYWITHTHEKNOWNSTRAINSOF三BIGLOBOSA，SHOWINGTHATTHESTRAINSINOURCOUNTRYBELONGEDTOLEPTOSPHAERIATHE19STRAINSWEREIDENTIFIEDASWEAKTYPE三BIGLOBOSA2THETEMPERATURE，MOISTUREANDILLUMINATIONTIMEHADDIFFERENTINFLUENCESONCONIDIUMGERMINATIONOFBLACKLEGFUNGUSTEMPERATURE，MOISTUREANDILLUMINATIONTIMEWEREPOSITIVELYCORRELATEDWITHCONIDIUMGERMINATIONRATETEMPERATUREWHICHWASFROM21TO27“CANDMOISTURIZINGTIMEWHICHWASMORETHAN24HANDILLUMINATIONTIMEWHICHWASMORETHAN12HWERECONDUCIVETOCONIDIUMGERMINATION3DIFFERENTCARBONANDNITROGENSOURCESANDDIFFERENTRAPESEEDVARIETIESLEAFJUICEHADDIFFERENTINFLUENCESONCONIDIUMGERMINMIONOFBLACKLEGFUNGUSTHEGLUCOSEANDSOLUBLESTARCHASCARBONSOURCEWEREBENEFICIALTOCONIDIUMGERMINATIONMALTOSEANDFRUCTOSEINHIBITEDCONIDIUMGERMINATIONANDFRUCTOSEWASTHELASTONESUITABLEASCARBONSOURCECALCIUMNITRATEASTHENITROGENSOURCEWASCONDUCIVETOCONIDIUMGERMINATIONWITLLSODIUMNITRATEANDAMMONIUMCHLORIDECOMINGSECOND，ANDUREAHADSTRONGINHIBITIONFORCONIDIUMGERMINATIONRELATIVELYSPEAKING，NITRATENITROGENWASINFAVOROFTHE