簡介：福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文巨胚稻新品系的生物學(xué)特性及營養(yǎng)成分研究姓名張艷華申請學(xué)位級別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)指導(dǎo)教師章清杞20100401福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文是對照的112倍；其次是GE8，含量為950MG／1009，是對照的53倍；巨胚稻大米肽的平均含量為2098MG／G，比對照增加53。73％。含量最高的是GE3，含量達(dá)4403MG／G，比M861365MG／G增加22256％；其次為GEWXL，大米肽含量為3142MG／G，比M86增加13018％。4相關(guān)分析表明，相對胚重與鉀、鋅、鐵、銅、錳、鉛、大米肽和氨基酸總量呈極顯著正相關(guān)，說明相對胚重對這些營養(yǎng)物質(zhì)含量具有極大影響，提高相對胚重就能提高稻米在這些營養(yǎng)物質(zhì)上的含量。5在發(fā)芽過程中，巨胚稻和非巨胚稻的GABA含量都呈增長趨勢，且巨胚稻的GABA含量一直高于非巨胚對照。巨胚稻和非巨胚稻的GABA含量都是在催芽45H時達(dá)到最大值，分別為617MG／1009和315MG／1009。關(guān)鍵詞巨胚稻新品系；生物學(xué)特性；營養(yǎng)成分含量；發(fā)芽；Y一氨基丁酸

簡介：上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文題目魚類來源的抗菌肽在畢赤酵母中的表達(dá)及其生物學(xué)活性英文題目EXPRESSIONOFANTIMICROBIALPEPTIDESFROMFISHINPICHIAPASTORISANDTHEIRBIOACTIVITIES專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向水產(chǎn)生物分子生物學(xué)姓名李文婧指導(dǎo)教師陶妍二O一五年六月十日學(xué)校代碼10264研究生學(xué)號M120209518上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會成員名單姓名工作單位職稱備注陳舜勝上海海洋大學(xué)教授主席陶妍上海海洋大學(xué)教授委員楊靖亞上海海洋大學(xué)副教授委員王勇中國科學(xué)院植物生理生態(tài)研究所教授委員沈彥萍上海沈李科工貿(mào)有限公司研究員委員曲映紅上海海洋大學(xué)講師秘書答辯日期2015年6月10日上午十時答辯地點(diǎn)上海海洋大學(xué)食品學(xué)院A210

簡介：點(diǎn)擊查看更多PTD-hFOXP3-△PRD-FKH的構(gòu)建、表達(dá)及生物學(xué)功能的初步研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：■學(xué)校代碼10264研究生學(xué)號M080301349上海海洋大掌碩士掌位論文題英文題目專業(yè)研究方向姓名指導(dǎo)教師印尼阿拉弗拉海淺色黃姑魚NIBOAOOIBOR漁業(yè)生物學(xué)研究STUDY011FGSHERYBIOLOGYOFNIBEACOIBORINARAFURASEAOFINDONESIA捕撈學(xué)漁業(yè)生物學(xué)何岸朱清澄教授二。一一年六月十日K17醇●●上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會成員名單姓名工作單位職稱備注孫滿昌上海海洋大學(xué)教授主席周應(yīng)祺上海海洋大學(xué)教授委員黃洪亮東海水產(chǎn)研究所研究員委員委員委員委員～委員葉旭昌上海海洋大學(xué)副教授秘書答辯地點(diǎn)海洋學(xué)院A323答辯日期2010616

簡介：目的探討MIR21在大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老過程中的生物學(xué)作用；探討MIR21是否通過調(diào)控靶基因HMGA2而實現(xiàn)其在EPCS中生物學(xué)作用。方法1密度梯度離心法獲取SD大鼠骨髓來源的單核細(xì)胞（BMMNCS），借助差速貼壁法和EPCS專用培養(yǎng)基定向誘導(dǎo)培養(yǎng)EPCS并培養(yǎng)1428天，光學(xué)顯微鏡下觀察EPCS的細(xì)胞形態(tài)變化，CCK8法分析EPCS的增殖情況、繪制生長曲線，應(yīng)用流式細(xì)胞儀、乙酰低密度脂蛋白、與荊豆凝集素吞噬實驗鑒定細(xì)胞表型，用MATRIGEL成管試驗檢測成血管能力；2MIR21的模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染P10代EPCS，檢測MIR21對EPCS增殖情況、運(yùn)動遷移能力、成血管能力的影響，用細(xì)胞衰老Β半乳糖苷酶染色檢測MIR21對EPCS衰老的影響；3探查MIR21的可能靶基因HMGA2，PCR技術(shù)檢測MRNA的表達(dá)；WESTERNBLOT檢測靶蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果1密度梯度離心法獲得SD大鼠MNCS經(jīng)體外培養(yǎng)后，表達(dá)相應(yīng)的內(nèi)皮細(xì)胞特異抗原，包括CD133、CD34以及VEGFR2，能夠吞噬DILACLDL與UEA1結(jié)合，具有增殖和成血管能力，細(xì)胞純度較高；2使用MIR21模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染EPCS48小時后，證實MIR21的抑制物能夠促進(jìn)EPCS的增殖能力（P結(jié)論MIR21表達(dá)下調(diào)能夠抑制EPCS的衰老，并促進(jìn)EPCS的增殖、遷移、成血管能力，HMGA2可能是MIR21的靶基因。

簡介：分類號S566密級不保密UDC634全日制碩士專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文全日制碩士專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文甜葉菊多倍體誘導(dǎo)及其生物學(xué)特性的研究甜葉菊多倍體誘導(dǎo)及其生物學(xué)特性的研究作者姓名漆慧娟漆慧娟指導(dǎo)教師吳建國吳建國教授教授專業(yè)學(xué)位名稱農(nóng)業(yè)推廣碩士農(nóng)業(yè)推廣碩士領(lǐng)域名稱園藝園藝研究方向園藝作物種質(zhì)創(chuàng)新與遺傳育種園藝作物種質(zhì)創(chuàng)新與遺傳育種所在學(xué)院農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院論文提交日期2014年5月30日浙江農(nóng)林大學(xué)二〇一四一四年五月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文，受甜葉菊國際合作項目和浙江省高校中青年學(xué)科帶頭人項目資助，是在指導(dǎo)教師指導(dǎo)下，通過我的努力取得的成果，并且是自己撰寫的。盡我所知，除了文中作了標(biāo)注和致謝中已經(jīng)作了答謝的地方外，論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含在浙江農(nóng)林大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)獲得學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同對本研究做出貢獻(xiàn)的同志，都在論文中作了明確的說明并表示了謝意。如被查有嚴(yán)重侵犯他人知識產(chǎn)權(quán)的行為，由本人承擔(dān)應(yīng)有的責(zé)任。學(xué)位論文作者親筆簽名日期論文使用授權(quán)的說明論文使用授權(quán)的說明本人完全了解浙江農(nóng)林大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。保密，在年后解密可適用本授權(quán)書?！醪槐Ｃ鼙緦W(xué)位論文屬于不保密?！酰ㄕ堅诜娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者親筆簽名日期指導(dǎo)教師親筆簽名日期

簡介：|I_|_川JLJFLJ__J|JJL|_㈣單位代碼10476學(xué)號14041騶021分類號Q9399河南衙軸大學(xué)碩士學(xué)位論文懷地黃連作障礙的微生物學(xué)機(jī)制及益生菌劑的研發(fā)學(xué)科、專業(yè)研究方向申請學(xué)位類別申請人指導(dǎo)教師生物學(xué)、微生物學(xué)環(huán)境微生物學(xué)理學(xué)碩士康春曉楊清香教授二。一七年五月摘要IIIIIIIIIIIILLLLLLIJY3262025地黃，一種多年生草本植物，傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為其塊根具有極高的藥用價值，但是，在它的生產(chǎn)過程中存在極其嚴(yán)重的連作問題種植過地黃的同一土地810年內(nèi)再次種植地黃將導(dǎo)致質(zhì)量和產(chǎn)量急劇下降，這極大限制了地黃的生產(chǎn)。本研究采用高通量測序結(jié)合定量PCR技術(shù)探究了連作與非連作懷地黃病害發(fā)生時根際土壤微生物群落的改變；分離得到一些懷地黃致病菌，研究了一些植物益生菌對這些致病菌的抑制效果；本實驗室在前期的研究工作中開發(fā)出在實驗室條件下能促進(jìn)懷地黃塊根膨大的菌劑，在此基礎(chǔ)上，我們將對致病菌有抑制作用的植物益生菌復(fù)合到已有菌劑中對其加以改良，開展兩年大田試驗，分別測試已有菌劑和改良后菌劑解決懷地黃連作障礙的效果。主要結(jié)果包括以下幾個方面1連作與非連作條件下健康和病害懷地黃根際土壤微生物的高通量測序結(jié)果表明，無論是頭茬還是重茬，健康和病害懷地黃根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)存在明顯差異。PROTEOBACTERIA、ACIDOBACTERIA和FIRMICUTES是主要的細(xì)菌門，ASCOMYCOTA是主導(dǎo)的真菌門。從屬的水平看，SPHINGOMONAS和STREPTOMYCES等有益細(xì)菌在頭茬和重茬病害懷地黃根際土壤中的含量均低于其在健康懷地黃根際土壤中的含量；PSEUDOMONAS在頭茬和重茬病害懷地黃根際土壤中的含量均高于其在健康懷地黃根際土壤中的含量。真菌群落組成在各個樣品中差別較大。頭茬健康懷地黃根際土壤中真菌含量較高的屬為MONOGRAPHELLA和THIELAVIOPSIS，兩者占據(jù)了頭茬健康懷地黃根際土壤真菌總量的近50％；而在頭茬病害懷地黃根際土壤中UNSHYPOCREALESSP、UNSNECTRIACEAESP、MYROTHECIUM和UNSASCOMYCOTASP四個屬含量較多；在重茬健康懷地黃根際土壤真菌組成中，UN一SNECTRIACEAESP、UNSSORDARIALESSP、UN一SASCOMYCOTASP、MYROTHECIUM、PHOMA的含量最高；在重茬病害懷地黃根際土壤中UNSSORDARIALESSP、UNSASCOMYCOTASP和UNSMICROASCACEAESP處于優(yōu)勢地位，尤其是UNSSORDARIALESSP，其含量幾乎達(dá)到了41％。綜合兩年的情況，UNSASCOMYCOTASP在病害懷地黃根際土壤中的含量高于其在健康懷地黃根際土壤中的含量；MONOGRAPHELLA在病害懷地黃根際土壤中的含量低于其在健康懷地黃根際土壤中的含量。采用定量PCR技術(shù)分別對健康和病害懷地黃根際土壤中細(xì)菌、真菌的總量及變化明顯的幾個種屬的微生物進(jìn)行定量，探究病害發(fā)生時其

簡介：貴州大學(xué)2010屆博士研究生學(xué)位論文云南木蠹象生物學(xué)及其寄主云南松揮發(fā)物成分研究學(xué)科專業(yè)動物學(xué)研究方向害蟲綜合治理與生物安全害蟲綜合治理與生物安全導(dǎo)師楊茂發(fā)教授博士生楊燕中國﹒﹒﹒﹒貴州﹒﹒﹒﹒貴陽2010年4月分類號Q96819659論文編號B2006140006密級貴州大學(xué)2010屆博士研究生學(xué)位論文云南木蠹象生物學(xué)及其寄主云南松揮發(fā)物成分研究目錄摘要IABSTRACTABSTRACTABSTRACTABSTRACTV前言1第一章第一章文獻(xiàn)綜述文獻(xiàn)綜述311云南松的經(jīng)濟(jì)價值312云南木蠹象及其在貴州的發(fā)生與危害313云南木蠹象研究現(xiàn)狀5131形態(tài)及生物學(xué)5132危險性分析6133防治714化學(xué)生態(tài)學(xué)8141化學(xué)生態(tài)學(xué)簡介8142云南木蠹象化學(xué)生態(tài)學(xué)方面研究進(jìn)展815植物揮發(fā)物9151植物揮發(fā)物的提取及鑒定方法10152植物揮發(fā)物中引誘活性物質(zhì)研究現(xiàn)狀及水平1216云南松揮發(fā)性物質(zhì)的研究現(xiàn)狀14第二章第二章云南木蠹象生物學(xué)及其天敵調(diào)查云南木蠹象生物學(xué)及其天敵調(diào)查1721調(diào)查方法1722結(jié)果與分析17221貴州省威寧縣秀水鄉(xiāng)云南木蠹象各蟲態(tài)發(fā)生時間觀察17222天敵調(diào)查1923結(jié)論與討論19第三章第三章云南木蠹象成蟲外部形態(tài)觀察云南木蠹象成蟲外部形態(tài)觀察2131材料與方法21311供試蟲源21312儀器及主要使用工具21313試驗方法21

簡介：背景與目的膿毒癥是嚴(yán)重感染、創(chuàng)傷、燒傷、外科大手術(shù)患者常見的并發(fā)癥，進(jìn)一步發(fā)展可導(dǎo)致膿毒癥休克和多器官功能障礙綜合征MODS，是臨床危重患者死亡的最主要原因之一。全球膿毒癥患者總病例數(shù)約為1800萬年，美國患病人數(shù)為75萬年，歐洲為135萬年。全世界死亡人數(shù)超過14萬天，美國215萬年，并成為美國非心臟ICU死亡的主因。目前對膿毒癥的認(rèn)識及治療措施有所改進(jìn)，但膿毒癥的病死率仍然居高不下，已成為現(xiàn)代危重病醫(yī)學(xué)面臨的突出難題。根本原因源于膿毒癥的根本發(fā)病環(huán)節(jié)及作用機(jī)制尚未充分闡明，故而缺乏早期有效的預(yù)防與治療措施。失控的全身炎癥反應(yīng)是膿毒癥預(yù)后不良的重要原因之一。固有免疫細(xì)胞是炎癥反應(yīng)的重要參與者，其異?；罨蓪?dǎo)致失控炎癥反應(yīng)的發(fā)生。感染相關(guān)的噬血細(xì)胞綜合征IAHS及重癥急性呼吸道綜合征SARS、重癥H1N1等高致死性流行病毒感染性疾病，其病理生理特點(diǎn)亦為失控的全身炎癥反應(yīng)綜合征。以上疾病存在著固有免疫細(xì)胞的異?；罨羌膊“l(fā)生的重要原因之一，但對于何種原因?qū)е鹿逃忻庖呒?xì)胞的異?；罨枰M(jìn)一步研究。近年的研究顯示了固有免疫細(xì)胞與適應(yīng)性免疫細(xì)胞在炎癥反應(yīng)中相互作用的復(fù)雜性。我們的前期研究顯示T細(xì)胞缺陷裸鼠感染呼吸道合胞病毒RSV后，炎癥反應(yīng)重于野生型小鼠，提示T細(xì)胞可能抑制炎癥反應(yīng)發(fā)生。KIM的研究顯示炎癥早期，淋巴細(xì)胞可抑制固有免疫細(xì)胞活化。由此，我們推測，膿毒癥，IAHS及SARS等的發(fā)生可能與機(jī)體體內(nèi)淋巴細(xì)胞不同程度功能缺陷導(dǎo)致固有免疫細(xì)胞異?；罨嚓P(guān)。若能對淋巴細(xì)胞缺陷動物膿毒癥中固有免疫細(xì)胞活化及功能特征進(jìn)行研究，也許能為以上疾病的發(fā)病環(huán)節(jié)及作用機(jī)制研究提供新的思路。內(nèi)毒素在革蘭陰性細(xì)菌感染所致膿毒癥的發(fā)病機(jī)制中扮演重要作用，甚至細(xì)菌血培養(yǎng)陰性時，也存在內(nèi)毒素血癥，提示內(nèi)毒素血癥可是膿毒血癥的單獨(dú)致病因素。內(nèi)毒素具有極廣泛而又復(fù)雜的生物學(xué)效應(yīng)，膿毒癥病理過程中出現(xiàn)的失控炎癥反應(yīng)、免疫機(jī)能紊亂、高代謝狀態(tài)及多臟器功能損害均可由內(nèi)毒素直接或間接觸發(fā)。淋巴細(xì)胞缺陷的重癥聯(lián)合免疫缺陷SCID小鼠革蘭陰性細(xì)菌感染模型的病理性免疫反應(yīng)炎癥反應(yīng)取決于細(xì)菌的持續(xù)繁殖擴(kuò)散和宿主的免疫反應(yīng)。這一模型給研究單一免疫反應(yīng)帶來困難。為避免此類情況的發(fā)生，我們擬采用脂多糖LPS腹腔注射誘導(dǎo)T、B細(xì)胞缺陷重癥聯(lián)合免疫缺陷小鼠內(nèi)毒素血癥，通過觀察SCID小鼠巨噬細(xì)胞生物學(xué)特性，從而揭示淋巴細(xì)胞缺陷對炎癥反應(yīng)的影響以及對巨噬細(xì)胞活化的調(diào)控作用及其作用可能的分子機(jī)制，為膿毒癥的防治提供新的方向和理論依據(jù)。第一部分、脂多糖誘導(dǎo)的BALBC小鼠與SCID小鼠內(nèi)毒素血癥炎癥反應(yīng)的比較目的在LPS誘導(dǎo)的BALBC小鼠和SCID小鼠內(nèi)毒素血癥模型基礎(chǔ)上，比較兩種小鼠炎癥反應(yīng)的差異，觀察淋巴細(xì)胞缺陷對固有免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)的影響。方法LPS腹腔注射BALBC小鼠和SCID小鼠后，觀察小鼠的一般狀況及存活率。將32只雄性BALBC小鼠和32只雄性SCID小鼠隨機(jī)分為正常對照組，LPS注射后3H，6H和12H組。取小鼠的血清，肝臟及肺臟組織；用全自動生化分析儀檢測兩種小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶AST及血尿素氮BUN水平；用HE染色，雙盲法評估肝臟，肺臟的炎癥病理損傷；用流式細(xì)胞術(shù)微球陣列法CBA檢測兩種小鼠血清TNFΑ，IFNΓ，IL10，IL6及MCP1的水平；用ELISA檢測兩種小鼠血清IL12，IL4及IL17的水平及肝組織勻漿TNFΑ及IL10的水平。結(jié)果LPS誘導(dǎo)內(nèi)毒素血癥后，SCID小鼠于12～24H均死亡88，BALBC小鼠僅1只死亡18；LPS注射后12H，SCID小鼠血清ALT、AST均高于BALBC小鼠，兩種小鼠BUN無顯著差異；SCID小鼠肝臟、肺臟病理評分均高于BALBC小鼠LPS注射后，兩種小鼠血清TNFΑ，IFNΓ，IL10，IL6，MCP1及IL4的水平均顯著升高，且SCID小鼠以上細(xì)胞因子水平明顯高于BALBC小鼠；LPS注射后3H，SCID小鼠肝組織勻漿TNFΑ水平高于BALBC小鼠，注射后6H，IL10水平高于BALBC小鼠。結(jié)論LPS誘導(dǎo)小鼠內(nèi)毒素血癥后，與野生型BALBC小鼠比較，SCID小鼠分泌過量的炎性及抗炎細(xì)胞因子，出現(xiàn)失控的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致嚴(yán)重的臟器損傷，是SCID小鼠死亡的重要原因。固有免疫應(yīng)答在缺乏淋巴細(xì)胞的狀態(tài)下異常增強(qiáng)，可能是發(fā)生危及生命的重癥全身炎癥反應(yīng)綜合征的重要原因。第二部分、脂多糖誘導(dǎo)的BALBC小鼠與SCID小鼠內(nèi)毒素血癥腹腔巨噬細(xì)胞活化及功能的比較目的在LPS誘導(dǎo)的BALBC小鼠和SCID小鼠內(nèi)毒素血癥模型基礎(chǔ)上，比較BALBC小鼠及SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞活化及功能的差異。觀察淋巴細(xì)胞缺陷對巨噬細(xì)胞活化及功能的影響。方法將40只雄性BALBC小鼠和40只雄性SCID小鼠各自隨機(jī)分為正常對照組，LPS注射后1H，3H，6H和12H組。取小鼠的腹腔灌洗液，腹腔巨噬細(xì)胞和小鼠脾臟NK細(xì)胞；用ELISA檢測腹腔灌洗液TNFΑ和IL10的水平；用實時熒光定量PCR檢測腹腔巨噬細(xì)胞TNFΑ和IL10MRNA表達(dá)；流式細(xì)胞術(shù)檢測BALBC小鼠及SCID小鼠正常對照組及LPS注射后3H組腹腔巨噬細(xì)胞TLR4，MHCⅡ，CD80，CD86及CD40的表達(dá)及LPS注射后12H脾臟NK細(xì)胞胞內(nèi)細(xì)胞因子IFNΓ水平；雞紅細(xì)胞吞噬實驗檢測兩種小鼠正常對照組腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能；并提取兩種小鼠正常對照組腹腔巨噬細(xì)胞體外LPS刺激培養(yǎng)，測定上清中TNFΑ，IL6，IL10，IL17及IFNΓ的水平。結(jié)果LPS注射后1H，SCID小鼠腹腔灌洗液TNFΑ水平高于BALBC小鼠，注射后3H，IL10水平明顯低于BALBC小鼠；正常對照組及LPS注射后3H，6H和12H組，SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞TNFΑMRNA表達(dá)高于BALBC小鼠；正常對照組及LPS注射后各時間點(diǎn)，SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞IL10MRNA表達(dá)均低于BALBC小鼠。BALBC小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)均高于SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞；LPS注射后，BALBC小鼠腹腔巨噬細(xì)胞TLR4，MHCⅡ，CD80，CD86表達(dá)均明顯升高，SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞TLR4，MHCⅡ，CD86表達(dá)無明顯變化，BALBC小鼠腹腔巨噬細(xì)胞CD40及SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞CD80，CD40均明顯下降；SCID小鼠NK細(xì)胞胞內(nèi)IFNΓ平均熒光值高于BALBC小鼠NK細(xì)胞。體外實驗LPS刺激20H后，SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞較BALBC小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌更多的TNFΑ，IL6，但I(xiàn)L10的分泌明顯偏少。結(jié)論與野生型BALBC小鼠比較，SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞共刺激分子CD80、CD86的表達(dá)自發(fā)性增高，吞噬功能明顯下降。經(jīng)LPS刺激后，腹腔巨噬細(xì)胞TLR4和MHCⅡ和CD80、CD86分子表達(dá)無增高，但分泌的炎性細(xì)胞因子顯著增加，且NK細(xì)胞胞內(nèi)IFN水平增高。以上表現(xiàn)是SCID小鼠內(nèi)毒素血癥炎癥反應(yīng)失控的主要特點(diǎn)。第三部分、MKP1在淋巴細(xì)胞對巨噬細(xì)胞活化調(diào)控中的作用目的在LPS誘導(dǎo)的BALBC小鼠和SCID小鼠內(nèi)毒素血癥模型基礎(chǔ)上，篩選出可能參與淋巴細(xì)胞對巨噬細(xì)胞活化調(diào)控的信號分子。于體外建立單獨(dú)腹腔巨噬細(xì)胞組及腹腔巨噬細(xì)胞PANT細(xì)胞混合培養(yǎng)組模型，采用LPS刺激后，明確所篩選出分子的表達(dá)及作用。方法將40只雄性BALBC小鼠和40只雄性SCID小鼠各自隨機(jī)分為正常對照組，LPS注射后1H，3H，6H和12H組。提取腹腔巨噬細(xì)胞；采用實時熒光定量PCR檢測腹腔巨噬細(xì)胞SOCS1，SOCS3及MKP1的MRNA表達(dá)，免疫熒光檢測腹腔巨噬細(xì)胞MKP1蛋白表達(dá)。提取BALBC小鼠腹腔巨噬細(xì)胞及脾臟PANT細(xì)胞建立單獨(dú)腹腔巨噬細(xì)胞組及腹腔巨噬細(xì)胞PANT細(xì)胞混合培養(yǎng)組模型；LPS刺激后，提取貼壁腹腔巨噬細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)上清；實時熒光定量PCR檢測MKP1MRNA的表達(dá)；WESTERNBLOT檢測腹腔巨噬細(xì)胞MKP1蛋白表達(dá)水平；用ELISA檢測上清中TNFΑ、IL6及IL10的水平。結(jié)果在LPS注射后3H及6H，SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞SOCS1MRNA表達(dá)明顯高于BALBC小鼠；在LPS注射后1H及12H，BALBC小鼠SOCS3表達(dá)明顯高于SCID小鼠。正常對照組及LPS注射后，BALBC小鼠腹腔巨噬細(xì)胞MKP1MRNA的表達(dá)均高于SCID小鼠腹腔巨噬細(xì)胞。體外實驗，LPS刺激后，腹腔巨噬細(xì)胞與PANT細(xì)胞共培養(yǎng)細(xì)胞中腹腔巨噬細(xì)胞MKP1MRNA及蛋白表達(dá)高于單獨(dú)培養(yǎng)腹腔巨噬細(xì)胞；上清中TNFΑ、IL6水平明顯低于單獨(dú)培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，IL10水平無顯著差異。結(jié)論內(nèi)毒素血癥小鼠淋巴細(xì)胞并非通過SOCS1和SOCS3信號分子調(diào)控巨噬細(xì)胞活化。PANT細(xì)胞可抑制LPS刺激下巨噬細(xì)胞炎性細(xì)胞因子釋放。在LPS誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)小鼠模型中淋巴細(xì)胞可能通過促進(jìn)巨噬細(xì)胞MKP1表達(dá)，抑制其炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。

簡介：學(xué)校代碼L0264研究生學(xué)號M080302365上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文題大西洋金槍魚延繩釣重要兼捕種類的生物學(xué)研究STUDYONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOF英文題目BYCATCHBYTUNALONGLINEFBHERYINTHEATLANTICOCEAN專業(yè)漁業(yè)資源研究方向姓名指導(dǎo)教師漁業(yè)資源評估與管理莊之棟戴小杰教授二O一一年六月十日●上海海洋大學(xué)碩E學(xué)位論文巢性腺指數(shù)平均為040SD040，N40。長鰭金槍魚叉長平均為1082CMSD63，N83，叉長與體重的關(guān)系方程為TW373X10。5FL28559門釅08277劍魚下頜叉長平均為1483CMSD445，N156，雌性平均為1827EMSD356，N62，雄性平均為1367CMSD186，N34，下頜叉長與加工后重量的關(guān)系方程雌性DWF741XLO。7LJFL3。4798R209688；雄性DWM208X10缶LJFL32828R208842。雌雄性比不符合11，當(dāng)下頜叉長長度大于180CM時，雌性性比為100％。卵巢性腺指數(shù)平均為056SD035，N38；精巢性腺指數(shù)平均為021SD021，N15。鋸鱗四鰭旗魚下頜叉長平均為1754CMSD109，N41，雌性平均為1753EMSD63，N12，雄性平均為1754CMSD111，N16，下頜叉長與體重的關(guān)系方程為TW59210石LJFL29292僻O7004。雌雄性比符合11，當(dāng)下頜叉長長度小于165CM或大于190CM時，雄性性比均為100％。卵巢性腺指數(shù)平均為11LSD099，N12；精巢性腺指數(shù)平均為016SD016，N16。異鱗蛇鯖叉長平均為1118CMSD213，N51，雌性平均為1211EMSD158，N15，雄性平均為1054CMSD243，N17，叉長與體重的關(guān)系方程為TWI06X10。5FL30272限2O9823。雌雄性比符合11，當(dāng)叉長長度小于80CM時，雄性性比為100％，當(dāng)叉長長度大于140CM時，雌性性比為100％。卵巢性腺指數(shù)平均為1446SD520，N14；精巢性腺指數(shù)平均為262SD221，N15。大青鯊叉長平均為2113EMSD202，N306，雌性平均為2074CMSD172，N147，雄性平均為2149CMS。D221，N159，叉長與體重的關(guān)系方程為TWI62X10巧FU8432R2O8376，雌性TWF00004FL2’2373R207873，雄性TWMI19XLO印L33201蜘9329。雌雄性比符合11。卵巢重量平均為13359SD983，N49，總性腺重量平均為39489SD1668，N49，卵巢重量占總性腺重量的332％SD112％，N49；精巢重量平均為51369SD2070，N85，總性腺重量平均為70839SD2422，N85，精巢重量占總性腺重量的713％SD8O％，N85。兩次調(diào)查共兼捕海龜23尾，分別為棱皮龜DERMOCHELYSCORIACEA21尾和太平洋麗龜LEPIDOCHELYSOLIVACEA2尾。棱皮龜平均背甲長949CM，平均體重75OKG；太平洋麗龜平均背甲長50CM，平均體重195K。棱皮龜?shù)谋臣组L和體重關(guān)系方程為W4X10‘5SL31507FR號09912，N21。三、主要兼捕魚種垂直分布結(jié)構(gòu)除紅棱魴、異鱗蛇鯖和海龜外，其余物種的深度分布均符合正態(tài)分布。除劍II

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目B7H4在腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的生物學(xué)意義研究研究生姓名曾雙指導(dǎo)教師姓名章良專業(yè)名稱微生物與生化藥學(xué)研究方向腫瘤免疫分子的研究學(xué)號20134226004論文提交日期2016年4月

簡介：點(diǎn)擊查看更多冷蒿種子生物學(xué)及生殖生物學(xué)特性的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號分類號密級UDC編號碩士學(xué)位論文南海北部陸坡水域三種中層魚類的生物學(xué)及分布特征楊雨燕（20132131）指導(dǎo)教師姓名趙憲勇湯勇專業(yè)名稱捕撈學(xué)論文答辯日期2015年5月29日學(xué)位授予日期年月南海北部陸坡水域三種中層魚類的生物學(xué)特征及分布2摘要中層魚類（MESOPELAGICFISH）指棲息于約為2001000M海洋中層（MESOPELAGICZONE）的海洋魚類。中層魚類是海洋中潛在資源最豐富的類群之一，主要為小型魚類，是大洋及深海食物鏈中連接浮游動物和更高營養(yǎng)層級捕食者的關(guān)鍵種類，有生長快、性成熟早、多數(shù)種類具有晝夜垂直移動習(xí)性等特點(diǎn)。由于捕撈及加工技術(shù)的制約，世界各國未形成持續(xù)穩(wěn)定中層魚類漁業(yè)。近年來隨著研究方法和技術(shù)手段的不斷進(jìn)步，中層魚類巨大的生物量以及對大洋的食物鏈和碳循環(huán)的重要作用逐漸引起國內(nèi)外學(xué)者的重視，部分國家也在探討對中層魚類的經(jīng)濟(jì)開發(fā)。本文首先對中層魚類的分布及資源儲量、生物學(xué)特征、加工利用及生態(tài)地位進(jìn)行綜述，以期為中層魚類的研究及探捕提供參考。尾明角燈魚（CERATOSCOPELUSWARMINGII）是南海北部陸坡水域中層魚類的重要種類之一，以往我國對中層魚類的研究較少，對深海生態(tài)系統(tǒng)的認(rèn)知有限。本文根據(jù)2015年6月南海北部陸坡多綜合調(diào)查的拖網(wǎng)及尾明角燈魚生物學(xué)測定資料，對其生物學(xué)特征進(jìn)行了初步的研究。結(jié)果表明，夏季南海北部陸坡的尾明角燈魚的體長范圍為3064MM，體長由3個股群組成，三個股群的三個股群的體長均值分別為3752239MM、4462284MM、4980317MM，其體長體重關(guān)系式為W8418106L30985。性腺成熟度以II期、III期居多，50性發(fā)育（II期及以上）體長為425MM，雌雄比為1070，較大個體雌性居多。在夜間，其平均攝食等級隨時間逐步增加，2000、2200、400尾明角燈魚的平均攝食等級分別為082、158、253。以上研究結(jié)果為南海北部陸坡尾明角燈魚的進(jìn)一步研究提供了基礎(chǔ)的參數(shù)及資料。蝰魚（CHAULIODUSSP）、燭光魚（POLYIPNUSSP）是南海北部陸坡水域中層魚類中重要的巨口魚類，這兩種中層魚類的相關(guān)研究較少，對其了解十分有限。本文根據(jù)2015年6月南海北部陸坡多綜合調(diào)查的蝰魚及燭光魚的生物學(xué)測定資料，對其生物學(xué)特征進(jìn)行了初步的研究。結(jié)果表明，夏季南海北部陸坡的蝰魚的體長范圍為65243MM，體重范圍0493232G其體長體重關(guān)系式為W8418106L309853。攝食等級以I期、II期居多。燭光魚的體長范圍為3159MM，體重范圍172107G其體長體重關(guān)系式為W136313104L2715566。攝食等級以I期、III期居多。以上研究結(jié)果為蝰魚、燭光魚的進(jìn)一步研究提供了基礎(chǔ)的參數(shù)及資料。研究尾明角燈魚的分布特征對了解南海陸坡生態(tài)系統(tǒng)有著十分重要的意義。本文根據(jù)南海北部陸坡多綜合調(diào)查秋季及夏季航次的拖網(wǎng)及相關(guān)環(huán)境資料，對其分布、漁場重心及其分布與環(huán)境因子的關(guān)系進(jìn)行了初步的研究。結(jié)果表明，白天在600M以淺水層多未捕獲尾明角燈魚，傍晚開始捕獲少量該樣品，夜間在上層捕獲的量較大。以上結(jié)果反映了南海北部陸坡尾明角燈魚晝夜垂直移動及白天多分布于700M以深的習(xí)性，其漁場重心漁場重心2014年秋季較2015年夏季南偏，其分布與環(huán)境因子的關(guān)系下網(wǎng)時間、其所在水層的溫度、溶解氧存在一定的相關(guān)關(guān)系。蝰魚是南海北部陸坡水域中層魚類中重要的巨口魚類。本文根據(jù)南海北部陸坡多綜合

簡介：目的結(jié)核病疫情嚴(yán)峻，耐藥率高，新型抗結(jié)核藥物研發(fā)越來越困難，分枝桿菌噬菌體逐漸成為新型抗結(jié)核藥物的研究熱點(diǎn)之一。目前還無文獻(xiàn)報道在國內(nèi)發(fā)現(xiàn)新分枝桿菌噬菌體，本研究在國內(nèi)首次分離鑒定出5株分枝桿菌噬菌體MYCOBACTERIUMPHAGE，命名為CHY1、CHY2、CHY3、CHY4和CHY5，通過對其生物學(xué)特性和基因組學(xué)進(jìn)行研究，探尋這5株分枝桿菌噬菌體抗結(jié)核菌的潛力，明確其遺傳背景，為噬菌體的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)和方法指導(dǎo)。方法1、采用直接分離法和富集法從泥土標(biāo)本中分離、純化分枝桿菌噬菌體。2、比較噬菌體滴度測定、噬菌體大量擴(kuò)增和收獲的不同方法，優(yōu)化實驗條件。3、分枝桿菌噬菌體生物學(xué)特性研究31、采用PEG8000沉淀法純化分枝桿菌噬菌體，電鏡觀察噬菌體形態(tài)特征。32、以不同MOI擴(kuò)增分枝桿菌噬菌體，根據(jù)擴(kuò)增后的產(chǎn)量找出每株噬菌體的最佳MOI。33、通過一步生長實驗測定分枝桿菌噬菌體潛伏期、裂解期和裂解量。34、分離臨床病原菌，用羅氏藥敏培養(yǎng)基進(jìn)行初步菌種鑒定和藥敏實驗，再采用單斑法測定分枝桿菌噬菌體的宿主譜。35、比較分枝桿菌噬菌體在PH值為50和74的7H9固體培養(yǎng)基中裂解恥垢分枝桿菌MC2155的能力。36、比較CHY1、CHY2、CHY3、D294種噬菌體組成雞尾酒制劑與這4種噬菌體分別單獨(dú)裂解恥垢分枝桿菌MC2155的能力，實驗數(shù)據(jù)采用SPSS170統(tǒng)計軟件中的單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計分析，以P37、培養(yǎng)原代巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞吞噬結(jié)核菌后分為3組，1組加入CHY3，2組加入D29，3組為不加噬菌體的空白對照組，培養(yǎng)過夜后，收集細(xì)胞，電鏡觀察噬菌體對巨噬細(xì)胞胞內(nèi)結(jié)核菌的影響。4、分枝桿菌噬菌體全基因組測序41、用Λ噬菌體DNA提取試劑盒提取分枝桿菌噬菌體基因組DNA，限制性內(nèi)切酶酶切后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，觀察電泳結(jié)果。42、基于鳥槍法隨機(jī)測序和重疊群組裝的方法進(jìn)行測序構(gòu)建文庫，隨機(jī)挑取克隆片段測序，拼接成大小不一的重疊群，最后通過PCR法填補(bǔ)各重疊群之間的缺口，得到完整的全基因組序列。43、組裝成環(huán)形的噬菌體采用DNASTAR程序包中的GENEQUEST軟件對其基因組列進(jìn)行電子酶切分析，并與實際酶切圖譜進(jìn)行比較，以確定噬菌體基因組是否為環(huán)形。5、分枝桿菌噬菌體基因組生物信息學(xué)分析51、分枝桿菌噬菌體基因預(yù)測及基因組注釋1分析5株分枝桿菌噬菌體基因組的一般特性①采用DNASTAR軟件包中EDITSEQ軟件分析基因組大小，堿基組成，基因平均長度、基因密度以及5株噬菌體遺傳密碼子的使用頻率及其偏嗜性。②采用TRF軟件預(yù)測基因組中的串聯(lián)重復(fù)序列。③通過TRNAN軟件預(yù)測基因組中的TRNA區(qū)域。2采用GLIMMER30和GENEMARK基因預(yù)測軟件對基因組進(jìn)行基因DENOVO預(yù)測，推定5株分枝桿菌噬菌體基因組編碼序列。3用BLAST和CLUSTAL軟件將推定基因與NR，SWISSPT，TREMBLE，COG數(shù)據(jù)庫中的序列進(jìn)行同源比對，EVALUE為1E5，對每個預(yù)測出來的基因選取同源比對上分值最高的序列，預(yù)測基因功能。6、分枝桿菌噬菌體比較基因組學(xué)61、將5個分枝桿菌噬菌體的基因與公共數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)進(jìn)行BLASTM8比對，EVALUE62、先將所有的基因序列用CLUSTALW軟件進(jìn)行兩兩比對，計算得到包含每對序列分歧程度的距離矩陣，再根據(jù)距離矩陣計算得到引導(dǎo)樹，最后根據(jù)前面得到的引導(dǎo)樹分支順序，逐級比對，得到全部序列的全局比對結(jié)果，用TREEVIEW軟件生成進(jìn)化樹。結(jié)果1、采用富集法分離純化得到5株分枝桿菌噬菌體，根據(jù)分離地點(diǎn)分別命名為CHY1、CHY2、CHY3、CHY4和CHY5。這5株噬菌體的噬菌斑均為圓形、透明、清晰，呈裂解性噬菌體噬菌斑特點(diǎn)，但CHY2、CHY4和CHY5培養(yǎng)超過48H后噬菌斑逐漸變混濁。2、優(yōu)化實驗方法，后續(xù)實驗均采取小平板法測定噬菌體滴度，雙層固體培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法大量擴(kuò)增噬菌體以及刮取上層培養(yǎng)基離心的方法收集噬菌體。3、分枝桿菌噬菌體生物學(xué)特性研究31、CHY1、CHY3、CHY4和CHY5噬菌體頭部均為多面立體對稱，而CHY2噬菌體頭部呈橢圓形。5株噬菌體均具有長尾，可彎曲，但不可收縮，可見尾板和尾絲，依據(jù)ICTV第八次報告的最新病毒分類系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)屬長尾噬菌體科SIPHOVIRIDAE。32、CHY1最佳MOI為14106，CHY2最佳MOI為958105，CHY3最佳MOI為11104，CHY4最佳MOI為45105，CHY5最佳MOI為18105，后續(xù)實驗大量擴(kuò)增這些噬菌體時，均根據(jù)最佳MOI擴(kuò)增，以達(dá)到最大產(chǎn)量。33、CHY2感染恥垢分枝桿菌MC2155的潛伏時間約為210MIN，裂解期為60MIN，270MIN后進(jìn)入平臺期，噬菌體滴度不再增加，裂解量為23；CHY3感染恥垢分枝桿菌MC2155的潛伏時間約為150MIN，裂解期為90MIN，240MIN后進(jìn)入平臺期，噬菌體滴度不再增加，裂解量為40；CHY1、CHY4和CHY5潛伏期超過420MIN。34、共收集臨床病原菌36株，經(jīng)菌種鑒定，有32株為結(jié)核分枝桿菌結(jié)核菌，2株為牛結(jié)核分枝桿菌，2株為非結(jié)核分枝桿菌。這5株分枝桿菌噬菌體的宿主譜較廣，能裂解MSMC2155、結(jié)核菌標(biāo)準(zhǔn)株H37RV、大部分臨床分離耐藥結(jié)核菌株、耐藥牛結(jié)核分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌，其中CHY1對廣泛耐藥結(jié)核菌裂解率達(dá)100％。35、抗菌能力最強(qiáng)的噬菌體是D29P005。CHY1、CHY2和CHY33個新分離的噬菌體中，CHY3早期48H殺菌能力最強(qiáng)P005，CHY1殺菌能力最弱，在48H內(nèi)不能抑制細(xì)菌生長，但48H后MS不再增加，維持在109CFU左右，細(xì)菌數(shù)比空白對照組少P36、當(dāng)7H9固體培養(yǎng)基PH值為50和74時，CHY1、CHY2和CHY3均能裂解恥垢分枝桿菌MC2155。37、電鏡觀察發(fā)現(xiàn)CHY3組和D29組結(jié)核菌數(shù)量少，菌體結(jié)構(gòu)明顯被破壞，而空白對照組結(jié)核菌數(shù)量較多，細(xì)菌結(jié)構(gòu)仍完整。4、分枝桿菌噬菌體全基因組測序41、5株噬菌體基因組DNA均可被。ECI、HINDⅢ和BAMHⅠ切開，這3種核酸內(nèi)切酶均能識別并切割雙鏈DNA分子特定的核苷酸序列，表明這5株噬菌體基因組均為雙鏈DNA。分析酶切圖譜發(fā)現(xiàn)這5株噬菌體基因組大小均在4050KB之間。42、5株噬菌體測序質(zhì)量達(dá)到完成圖標(biāo)準(zhǔn)。CHY1、CHY2、CHY4和CHY5最終均組裝為線狀重疊群。雖然CHY3組裝為環(huán)狀重疊群，但實際酶切圖譜中，HINDⅢ將CHY3基因組切為2個條帶，與線性電子酶切圖譜相同，所以CHY3基因組很可能是線性。5、分枝桿菌噬菌體基因預(yù)測及基因組注釋51、CHY11CHY1基因組全長為47198BP，GC含量為6368％，基因平均長度為562BP，基因密度為092。CHY1有明顯的遺傳密碼子偏嗜性，未發(fā)現(xiàn)串聯(lián)重復(fù)序列，共預(yù)測出5個TRNA。2采用GLIMMER軟件分析，確定了77個推定基因GL，對這些基因進(jìn)行同源檢索分析，得到29個己知功能的基因。GL05、GL10、GL12、GL13、GL20、GL23、GL24和GL25為噬菌體的結(jié)構(gòu)基因；GL06、GL07和GL08分別編碼LYSA、HOLIN和LYSB；GL31為整合酶基因，GL70推定為阻遏蛋白類似基因，與D29P72基因序列100％相似，D29P72在進(jìn)化過程中丟失了N末端的一個片段，缺乏完整的HTH模體，不能結(jié)合到宿主菌DNA上，因而不能形成溶原性反應(yīng)，即CHY1為裂解性噬菌體。GENEMARK軟件分析，共預(yù)測出71個推定基因GM，其中有55個基因與GLIMMER軟件分析結(jié)果相同，有16個不同的基因，通過比對，發(fā)現(xiàn)GM22與GL23，GM08與GL09，GM51與GL55，GM52與GL56具有相同功能，其余基因未能匹配上已知功能的基因。52、CHY21CHY2基因組全長為40017BP，GC6673％，基因平均長度為656BP，基因密度為0951。CHY2有明顯的遺傳密碼子偏嗜性，共發(fā)現(xiàn)3個串聯(lián)重復(fù)序列，未發(fā)現(xiàn)TRNA。2采用GLIMMER在線分析軟件分析，確定了58個推定基因，對這些基因進(jìn)行同源檢索分析，得到16個已知功能的基因。GL02、GL05、GL06、GL12、GL13、GL15、GL17和GL19為噬菌體的結(jié)構(gòu)基因；GL26、GL27分別編碼LYSA和LYSB，未發(fā)現(xiàn)HOLIN基因；GL31為整合酶基因，GL32推定為阻遏蛋白基因，與分枝桿菌噬菌體HALO的GP33基因序列100％相似，HALO是溶原性噬菌體，GP33表達(dá)的產(chǎn)物是阻遏蛋白，即CHY2為溶原性噬菌體。GENEMARK軟件分析，共預(yù)測出54個推定基因，其中有44個基因與GLIMMER軟件分析結(jié)果相同，有10個不同的基因，通過比對，發(fā)現(xiàn)GM15與GL12具有相同功能，其余基因未能匹配上己知功能的基因。53、CHY31CHY3基因組全長為40070BP，GC6686％，基因平均長度為667BP，基因密度為097。CHY3有明顯的遺傳密碼子偏嗜性，共發(fā)現(xiàn)3個串聯(lián)重復(fù)序列，未發(fā)現(xiàn)TRNA。2采用GLIMMER在線分析軟件分析，確定了58個推定基因，對這些基因進(jìn)行逐個同源檢索分析，得到20個已知功能的基因。GL01、GL41、GL43、GL45、GL47、GL48、GL54、GL55和GL58為噬菌體的結(jié)構(gòu)基因，位于整合酶基因GL29的兩側(cè)；GL33、GL34分別編碼LYSB和LYSA，未發(fā)現(xiàn)HOLIN基因和編碼阻遏蛋白的基因，即CHY3為裂解性噬菌體。GENEMARK軟件分析，共預(yù)測出56個推定基因，其中有46個基因與GLIMMER軟件分析結(jié)果相同，有10個不同的基因，通過比對，發(fā)現(xiàn)GM43與GL43具有相同功能，其余基因未能匹配上已知功能的基因。54、CHY41CHY4基因組全長為46639BP，GC6368％，基因平均長度為586BP，基因密度為092。CHY4有明顯的遺傳密碼子偏嗜性，未發(fā)現(xiàn)串聯(lián)重復(fù)序列，共發(fā)現(xiàn)5個TRNA。2采用GLIMMER在線分析軟件分析，確定了73個推定基因，對這些基因進(jìn)行同源檢索分析，得到28個已知功能的基因。GL05、GL10、GL12、GL13、GL20、GL23、GL24和GL25為噬菌體的結(jié)構(gòu)基因；GL06、GL07和GL08分別編碼LYSA、HOLIN和LYSB；GL31為整合酶基因，GL71與編碼噬菌體L5阻遏蛋白的GP71相似性為863％，L5GP71具有183AA，而CHY4GL71僅含155個AA，是否能編碼有活性的阻遏蛋白還未知，即CHY4很可能為溶原性噬菌體。GENEMARK軟件分析，共預(yù)測出70個推定基因，其中有55個基因與GLIMMER軟件分析結(jié)果相同，有15個不同的基因，通過比對，發(fā)現(xiàn)GM09與GL09，GM23與GL23，GM46與GL47，GM54與GL57具有相同功能，其余基因未能匹配上已知功能的基因。55、CHY51CHY5基因組全長為51214BP，GC6674％，基因平均長度為530BP，基因密度為091。CHY5有明顯的遺傳密碼子偏嗜性，未發(fā)現(xiàn)串聯(lián)重復(fù)序列，共發(fā)現(xiàn)5個TRNA。2采用GLIMMER在線分析軟件分析，確定了88個推定基因，對這些基因進(jìn)行逐個同源檢索分析，得到29個已知功能的基因。GL05、GL10、GL12、GL13、GL20、GL23、GL24和GL25為噬菌體的結(jié)構(gòu)基因；GL06、GL07、GL08分別編碼LYSA、HOLIN和LYSB；GL31為整合酶基因，GENE70與分枝桿菌噬菌體PUKOVNIK編碼阻遏蛋白的基因GP72相似性為7081％，推定為編碼阻遏蛋白的基因，是否能編碼有活性的阻遏蛋白還未知，即CHY5很可能為溶原性噬菌體。GENEMARK軟件分析，共預(yù)測出86個基因，其中有68個基因與GLIMMER30軟件分析結(jié)果相同，有18個不同的基因，通過比對，發(fā)現(xiàn)GM09與GL09，GM12與GL12，GM23與GL23，GM55與GL54，GM63與GL62具有相同功能，其余基因未能匹配上已知功能的基因。6、分枝桿菌噬菌體比較基因組學(xué)61、共線性分析1CHY1同源性最高的兩株噬菌體為D29和CHE12，可歸入CLUSTERA，同源性基因分布在整個基因組，具有清晰的共線性。CHY1基因組77個基因中有75個基因與D29的基因具有同源性，有60個基因與CHE12的基因具有同源性。2CHY2同源性最高的兩株噬菌體為BPS和ANGEL，可歸入CLUSTERG，同源性基因分布在整個基因組，具有清晰的共線性。CHY2基因組58個基因中有57個基因均與這兩個噬菌體具有同源性。3CHY3同源性最高的兩株噬菌體為BPS和ANGEL，可歸入CLUSTERG，同源性基因分布在整個基因組，CHY3基因組58個基因組中有56個基因均與這兩個噬菌體具有同源性。CHY3基因組前3個基因與BPS和ANGEL前3個基因匹配，但從第4個基因開始與BPS和ANGEL的同源基因排列順序相反。4CHY4同源性最高的兩株噬菌體為D29和CHE12，可歸入CLUSTERA，同源性基因分布在整個基因組，具有清晰的共線性。CHY4基因組73個基因組中有70個基因與D29具有同源性，有54個基因與CHE12具有同源性。5CHY5同源性最高的兩株噬菌體為D29和PUKOVNIK，可歸入CLUSTERA，同源性基因分布在整個基因組，具有清晰的共線性。CHY5基因組88個基因組中有70個基因與D29具有同源性，有57個基因與PUKOVNIK具有同源性。62、進(jìn)化樹分析對14株分枝桿菌噬菌體基因組進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析構(gòu)建進(jìn)化樹，距離越近，噬菌體間親緣關(guān)系越近。CHY1與D29親緣關(guān)系最近，CHY4與CHY5親緣關(guān)系最近，CHY2與BPS、ANGEL親緣關(guān)系最近，CHY3與LEGENDRE親緣關(guān)系最近。結(jié)論5株分枝桿菌噬菌體均屬于雙鏈DNA病毒群群Ⅰ，尾病毒目，長尾病毒科。CHY1和CHY3為裂解性噬菌體，CHY2為溶原性噬菌體，CHY4和CHY5為可疑溶原性噬菌體，基因組學(xué)研究未在噬菌體基因組中發(fā)現(xiàn)毒力基因。5株噬菌體均能裂解耐藥結(jié)核分枝桿菌，CHY3潛伏期短，體外裂菌能力強(qiáng)且能裂解巨噬細(xì)胞內(nèi)結(jié)核分枝桿菌，最具有抗結(jié)核潛力。本研究初步探明5株新分枝桿菌噬菌體抗結(jié)核菌的潛力和遺傳背景，為下一步開發(fā)利用噬菌體提供理論基礎(chǔ)和方法指導(dǎo)。

簡介：目的利用COL2A1CREERT2IHHFLFL基因工程小鼠所培育的未成熟的小鼠的肋軟骨細(xì)胞，使用周期性動態(tài)壓縮應(yīng)力（FLEXCELL5000施加正弦波、05HZ、5KPA、1HD壓縮應(yīng)力）的方法探討條件性敲除IHH基因后的軟骨細(xì)胞立體培養(yǎng)的力學(xué)生物學(xué)特性。方法1基因工程小鼠（COL2A1CREERT2IHHFLFL和IHHFLFL）的培育及其基因鑒定。2取剛出生的基因工程小鼠（攜帶IHHFLFL純合基因并且具有COL2A1CREERT2基因）40只。隨機(jī)的分為實驗組和對照組，實驗組基因小鼠給予腹腔連續(xù)注射3天TM（TAMOXIFEN），對照組基因小鼠給予腹腔連續(xù)注射3天等量植物油，待第6天時取小鼠肋軟骨，急性消化肋軟骨細(xì)胞作為本實驗的細(xì)胞來源。3用實時熒光定量PCR技術(shù)來檢測IHH基因相對表達(dá)量，計算IHH基因的敲除率。4將實驗組與對照組急性消化分離的細(xì)胞以2105ML的密度混于15％的海藻酸鈉凝膠中，利用模型制成海藻酸鈉細(xì)胞盤。實驗組與對照組各自分為兩組其中一組海藻酸鈉細(xì)胞盤用FLEXCELL5000基底加載系統(tǒng)施加動態(tài)壓縮應(yīng)力正弦波、05HZ、5KPA、1HD7、14、21天；另一組海藻酸鈉細(xì)胞盤靜態(tài)培養(yǎng)7、14、21天。5分別在7、14、21天時在倒置顯微鏡下觀察各組軟骨細(xì)胞的生長狀況。6通過RTPCR技術(shù)測定同一時間點(diǎn)的實驗組和對照組內(nèi)細(xì)胞盤的Ⅱ型膠原、Ⅹ型膠原、蛋白多糖（AGG）、基質(zhì)金屬蛋白酶13（MMP13）MRNA的相對表達(dá)量。7運(yùn)用半無限體細(xì)胞力學(xué)模型與微管吸吮技術(shù)相結(jié)合來測定各組內(nèi)不同時間點(diǎn)的細(xì)胞力學(xué)特性。結(jié)果1通過RTPCR檢測IHH基因相對表達(dá)量發(fā)現(xiàn)實驗組基因小鼠在腹腔注射TM（TAMOXIFEN）后與對照組相比其IHH基因相對表達(dá)量降低（P2同一時間點(diǎn)，壓縮刺激可以促進(jìn)軟骨細(xì)胞在海藻酸鈉凝膠中的增殖，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞盤發(fā)現(xiàn)實驗組、對照組內(nèi)壓縮細(xì)胞盤的細(xì)胞密度隨著壓縮刺激天數(shù)的增長而增加，其密度明顯高于同組內(nèi)靜態(tài)培養(yǎng)組；實驗組基因敲除與對照組未敲除相比敲除IHH后的軟骨細(xì)胞盤與未敲除IHH的軟骨細(xì)胞盤中的細(xì)胞密度相差不明顯。3RTPCR檢測（1）實驗組基因敲除與對照組未敲除立體培養(yǎng)細(xì)胞盤相比、壓縮細(xì)胞盤相比7天時實驗組的AGG、COLII相對表達(dá)量增高P4各組內(nèi)細(xì)胞瞬時模量（E0）、平衡模量（E∞）、表觀黏性（Μ）隨著培養(yǎng)時間的增加而降低，其中實驗組、對照組內(nèi)壓縮21天的E0、E∞、Μ明顯低于同組內(nèi)壓縮7、14天（P＜005），7天與14天之間無統(tǒng)計學(xué)差異；實驗組與對照組相比較，在同一時間點(diǎn)實驗組立體培養(yǎng)軟骨細(xì)胞、動態(tài)壓縮的軟骨細(xì)胞的E0、E∞、Μ均大于對照組，其中實驗組內(nèi)壓縮21天的E0、E∞明顯高于對照組內(nèi)壓縮21天（P＜005）；實驗組內(nèi)與對照組內(nèi)同一時間點(diǎn)的動態(tài)壓縮軟骨細(xì)胞的E0、E∞、Μ均大于立體培養(yǎng)軟骨細(xì)胞的E0、E∞、Μ，其中實驗組內(nèi)壓縮7天的軟骨細(xì)胞的E0、E∞明顯大于立體培養(yǎng)7天的軟骨細(xì)胞的E0、E∞（P＜005）。結(jié)論海藻酸鈉立體培養(yǎng)的條件性敲除IHH基因的小鼠肋軟骨細(xì)胞在生理性動態(tài)壓縮刺激7天時可以有效的提高COLⅡ和AGG的表達(dá)，抑制COLⅩ和MMP13的表達(dá)，可以一定程度上改善軟骨細(xì)胞的力學(xué)性能，然而壓縮天數(shù)越長軟骨細(xì)胞所分泌的基質(zhì)就越少、軟骨細(xì)胞力學(xué)特性也就隨之減弱。