簡介：貴州大學2015屆碩士研究生學位論文屆碩士研究生學位論文貴州省仔豬病毒性腹瀉流行病學調查貴州省仔豬病毒性腹瀉流行病學調查及相關基因分析及相關基因分析學科專業(yè)學科專業(yè)預防獸醫(yī)學研究方向研究方向獸醫(yī)公共衛(wèi)生學導師師王開功教授指導小組指導小組文明教授周碧君教授程振濤副教授溫貴蘭副教授研究生毛黎紅生毛黎紅中國﹒貴州﹒貴陽2015年6月密級分類號S8513論文編號201501031966貴州省仔豬病毒性腹瀉流行病學調查及相關基因分析貴州省仔豬病毒性腹瀉流行病學調查及相關基因分析目錄中文摘要中文摘要IABSTRACTIII英文縮略表英文縮略表VI文獻綜述文獻綜述1試驗研究試驗研究12第一章第一章PEDV、TGEV和RVRTPCR檢測方法建立與臨床應用檢測方法建立與臨床應用121材料材料1211疫苗與試劑1212主要儀器122方法方法1321引物設計1322PEDV、TGEV和RV三聯(lián)疫苗總RNA的提取1323PEDV、TGEV和RVRTPCR方法建立1424PEDV、TGEV、RVRTPCR檢測方法驗證153結果結果1631PEDV、TGEV和RVRTPCR方法優(yōu)化1632PEDV、TGEV和RVRTPCR方法驗證1733PEDV、TGEV和RVRTPCR方法臨床應用194討論2141關于豬病毒性腹瀉主要病原確診2142關于豬病毒性腹瀉檢測方法22第二章第二章貴州省仔豬病毒性腹瀉流行病學調查貴州省仔豬病毒性腹瀉流行病學調查231材料材料2311血清、病料樣本采集2312主要實驗試劑2313主要實驗儀器242方法方法2421仔豬病毒性腹瀉發(fā)病狀況調查2422仔豬病毒性腹瀉臨床癥狀調查2423仔豬病毒性腹瀉大體病變觀察2424PEDV、TGEV和RV血清抗體檢測2525PEDV、TGEV和RV病原核酸檢測253結果結果2531仔豬腹瀉發(fā)病情況調查結果2532仔豬腹瀉臨床癥狀調查結果2833仔豬腹瀉大體病變觀察2834PEDV、TGEV和RV血清抗體檢測2935PEDV、TGEV和RV病原核酸檢測3236PEDV、TGEV和RV混合感染情況檢測結果33

簡介：】LILLLLLILLLLIILLLLLⅢY3291963密級論文編號中國農業(yè)科學院學位論文高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒抑制B2M基因表達的分子機制及其生物學意義MECHANISMANDSIGNIFICANCEOFINHIBITIONOFB2MGENEEXPRESSIONBYHIGHLYPATHOGENICPORCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORYSYNDROMEVIRUS博士研究生齊鵬飛指導教師馬志永研究員申請學位類別農學博士業(yè)預防獸醫(yī)學方向人畜共患病及獸醫(yī)公共衛(wèi)生學單位上海獸醫(yī)研究所研究生院2016年5月究養(yǎng)專研培SECRECYNOCHINESEACADEMYOFAGRICULTURALSCIENCESDISSERTATIONMECHANISMANDSIGNIFICANCEOFINHIBITIONOFB2MGENEEXPRESSIONBYHIGHLYPATHOGENICPORCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORYSYNDROMEVIRUSPHDCANDIDATEPENGFEIQISUPERVISORPROFZHIYONGMAMAJORPREVENTIVEVETERINARYMEDICINESPECIALTYZOONOSESANDVETERINARYPUBLICHEALTHMAY2016

簡介：河南農業(yè)大學碩士學位論文豬流感病毒的分離鑒定、生物學特性及HA基因的克隆與序列分析姓名柴春霞申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)指導教師夏平安崔保安20080601致謝轉眼聞在河南農大攻讀碩士三年時光已經(jīng)過去導師夏平安副教授和崔保安教授‘在我的學習、生活和工作中給予了無微不至的關懷和幫助。導師高尚的思想修養(yǎng)，嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度，求實開拓的創(chuàng)新精神及熱情待人、嚴于律己的生活作風，淵博的知識，將成為我的動力和努力的方向，使我終身受益，至論文完成之際，謹向恩師致以最崇高的敬意和最衷心的感謝I感謝導師組寧長申教授、張龍現(xiàn)教授、王川慶教授、張改乎研究員、李文剛教授、許蘭菊教授、陳陸副教授、賀秀嬡副教授及其他各位老師在完成學習任務和課題研究中對我的指導和裁助，在此致以最誠摯的謝意感謝傳授我知識的全體老師感謝研究生處的領導和老師感謝牧醫(yī)工程學院的領導和老師L衷心感謝陳紅英老師和邱妍博士等在試驗操作過程中給予我的熱情幫助和耐心指導，以及論文寫作中給予的建議和指導，使我的試驗進展和論文寫作得以順利完成。感謝張紅英老師、王亞賓老師、陳麗穎老師、魏戰(zhàn)勇老師、楊明凡老師、楊霞老師、金鉞老師三年來的幫助和關心L向哺育和培養(yǎng)我的母校和傳授我知識的全體老師致以崇高的敬意感謝研究生處、院黨總支的領導和老師三年來對我的關心和幫助感謝試驗過程中給予我無私幫助共同進步的黨占國、王建舉、尹彥濤、王保利同學和牧醫(yī)工程學院05級全體碩士研究生。感謝師姐閬海范、胡梅，師兄趙現(xiàn)敏，師妹李素萍、李偉娟、劉明莉、程金萍、張風華、趙琳，師弟邱璜、盧高峰、王中明、李鵬、劉磊、劉玉松、范旭、徐鴻運對試驗的順利進行提供的無私幫助I讓我再一次對夏平安老師三年的教育之恩表示虔誠的謝意。祝恩師家庭和睦，身體健康，工作順心。

簡介：分類號UDC密級編號碩士學術碩士學術學位論文學位論文河南省豬流行性腹瀉病毒流行病學調查及CHHENZZ株培養(yǎng)特性研究ETIOLOGICALINVESTEGATIONOFPCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSINHENANPROVINCETHECULTIVATIONACTERISTICSOFPEDVISOLATEDSTRAINCHHENZZ2015年06月學位申請人學位申請人周兵強周兵強指導教師指導教師吳志明吳志明研究員研究員一級學科一級學科獸醫(yī)學獸醫(yī)學二級學科二級學科基礎獸醫(yī)學基礎獸醫(yī)學學位類別學位類別農學碩士農學碩士獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的論文是我個人在導師指導下完成的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，文中除了特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得河南科技大學或其它教育機構的其他學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名日期關于論文使用授權的說明關于論文使用授權的說明本人完全了解河南科技大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校擁有對所有學位論文的復制權、傳播權、匯編權及其它使用權（特殊情況需要保密的論文應提前說明，但在解密后應遵守此規(guī)定）。需要保密的論文請?zhí)顚懕緦W位論文在年月至年月期間需要保密，解密后適用本授權書。（需要保密的學位論文無須向圖書館提供論文的電子文檔）研究生簽名導師簽名日期

簡介：東北農業(yè)大學碩士學位論文雞傳染性支氣管炎病毒2006～2007年東北地區(qū)分離株分子流行病學研究姓名張琳申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師李書華20080620ABSTRACTSMSII葛MOLECULAREPIDEMIOLOGYOFTHEINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSISOLATEDINNORTHEASTOFCHINABETWEEN2006AND2007ABSTRACTTHEBIOLOGICALCHARACTERISTIESOFNINEAVIANINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSESFIBVWEREISOLATEDFROMOUTBREAKSINCHICKENSINTHENORTHEASTPROVINCESOFCHINABETWEEN2006AND2007WEREANALYZEDSTRUCTURALPROTEINGENESWERECLONED，SEQUENCEDANDCOMPAREDWITHIBVREFERENCESTRAINSILLORDERTOTRACETHESOURCEOFNORTHEASTPROVINCESIBVISOLATESTODETERMINEIBVGENOTYPESEXISTINNORTHEASTPROVINCESANDTHEPHYLOGENETIERELATIONSHIPSBETWEENNORTHEASTPROVINCESISOLATES’ANDREFERENCESTRAINS、TYPICALSIGNSINCLUDINGSTUNTING，CURLINGANDDEATHOFEMBRYOWEREOBSERVEDINTHESIXTHTOTENTHPASSAGESWHENEACHOFTHENINEISOLATESWASINOCULATEDINTO9DAYOLDTO11DAYOLDSPECIFICPATHOGENFREESPFCHICKENEMBRYOSFURTHERMORETHENINEISOLATESCOULDNOTHEMAGGLUTINATESCHICKENREDBLOODCELLSDIAGNOSESBASEDONELECTRONMICROSCOPYEXAMINATIONPERFORMEDONALLANTOICFLUIDSOFDIFFERENTPASSAGESSHOWEDALLNINEISOLATESHADTYPICALCORONAVIRUSMORPHOLOGYVIRIONSENVELOPED，SLIGHTLYPLEOMORPHIC，SPHERICAL，80NM一120HMINDIAMETERSURFACEPROJEETIONSOFENVELOPEDISTINCTCLUBSHAPED，SPACEDWIDELYAPARTANDDISPERSEDEVENLYOVERALLTHESURFACE、ACOORDINGTOTHENDVINTERFERENCETESTALLTHENINEISOLATESHADOBVIOUSINHIBITORYEFFECTTOTHENDVLASOTASTRAIN勱EABOVERESULTSELEMENTARILYSUGGESTEDTHATTHENINEVIRUSESISOLATEDINTHISSTUDYWEREAVIANINFECTIOUSBRONCHITISVIRUSESTHESTRUCTURALPROTEINGENESWHICHWERETHEMOSTVARIOUSINIBVGENOMEOFTHENINEISOLATESWEREAMPLIFIEDBYREVERESETRANSCRIPTASEPOLYMERASECHAINREACTIONANDTHEYWEREPROVEDTOBEIBVBVCLONINGSEQUENCINGANDANALYSISWITHCOMPARISONOFOTHERSTRAINSSUCHASTHEH120WHICHISAREFERENCEVACCINESTRAIN，ALLTHERESULTSSHOWEDTHATALLTHENINESTRAINSISOLATEDFROMTHENORTHEASTPROVINCESWEREIBVPHYLOGENICANALYSISBASEDONSLGENESEQUENCESSHOWEDTHATNINEISOLATESHAVE761％T0994％NUCLEOTIDEIDENTITYFROMEACHOTHERAMONGHLJ0605，HLJ0708，JL0712，LN071001ANDTL0608THES1GENENUCLEOTIDEIDENTITYWEREFROM9690ATO979％；ANDHLJ075L，HU0752，LN071002MDJ0610HADS1GENENUCLEOTIDEIDENTITYFROM969％T0995％HLJ0752MDJ0610ANDLN071002HADHIGHS1GCNENUCLEOTIDEIDENTITYBETWEENHLJ0752ANDMDJ0610IDENTITYWERE994％HLJ0752ANDUN071002HAD995％NUCLEOTIDEIDENTIYBETWEENMDJ0610ANDLN071002THEIDENTITYWASABOUT988％BUTAMONGHU0605，HLJ0708，幾0712，LN071001。TL0608ANDHU075L。HLJ0752，LN071002。L、缸J0610THENUCLEOTIDEIDENTITYWASLOWFROM761％T0793％ACOORDINGTOTHETHERESULTSOFTHESERUMNEUTRALIZATIONTESTANDTHEPHYLOGENETICTREE，THECONCLUSIONWASASFOLLOWSTHESEQUENCEIDENTITYANDTHEPHYLOGENETICRELATIONSHIPSBETWEENTHEGENESDERIVEDFROMTHE9ISOLATESANDOTHER38REFERCNCESTRAINSINDICATEDTHATIBVISOLATESOFCHINAANDWORLDWIDEWEREBRANCHEDINTOEIGHTGENETICCLUSTERSIBVISOLATESINNORTHEASTPROVINCESWERECLASSIFIEDINTO1，4，8GENETICCLUSTERSTHUS。ITCANBEDEMONSTRATEDTHATNOTONLYPOINTMUTATIONS。INSERTIONSANDDELETIONSBUTALSOARECOMBINATIONEVENSHAVINGCONTRIBUTEDTOTHEGENETICDIVERSITYANDEMERGENCYOFIBVVARIANTSINNORTHEASTPROVINCESINCHINATHATARETHEMAINREASONCAUSINGTHEVARIATIONOFTHEIBVSTRAINSKEYWORDSAVIANINFECTIOUSBRONCHITISVIRUS；NORTHEASTPROVINCESIBVISOLATESSPIKEPROTEINGENE；GENETICVARIATIONIII

簡介：中國農業(yè)科學院碩士學位論文中國2007年部分地區(qū)雞傳染性支氣管炎病毒分子流行病學研究姓名劉喬然申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師劉勝旺20080601和97．1％。但通過SI基因核螢酸及推導氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn)C剛CH，LHLJ／07VLISL基岡核螢酸存在18個特異性位點的點突變幣¨15個氨基酸的替換。這表明，在免疫雞群中很難重新分離到疫苗株，由于我國長期使用弱毒疫苗，致使某些毒株在免疫壓力下發(fā)生了點突變。但MASS型流行株在我國長期存在并流行，因此MASS型疫苗仍有應用的必要性。關鍵詞雞傳染性支氣管炎病毒，中國分離株，分子流行病學IL

簡介：分類號R446密級公開單位代碼10422學號2013120103⑧∥菇辦孑博士學位論文專業(yè)學位論文題目豬博卡病毒類病毒顆粒的表達以及在流行病學方面的應用VIRUSLIKEPARTICLESOFPORCINEBOCAVIRUSGENERATEDBYRECOMBINANTBACULOVIRUSESCANBEAPPLIEDTOSEROEDIDEMICSTUDIESSEROEDLDEMLCSTUDLES作者姓名學院名稱張文靜醫(yī)學院專業(yè)學位名稱臨床醫(yī)學臨床檢驗診斷學指導教師王傳新教授合作導師李天成高級主任研究官2016年5月10日目錄L中文摘要’12英文摘要63符號說明114正文一前言12一日U舌L么二資料與方法‘15三結果’23四討論‘25五結論’27六附圖‘29七參考文獻34八綜述’406致謝‘437攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄488學位論文評閱及答辯情況499外文論文50

簡介：甜莢號S82鰱塑UDC。四川農業(yè)大學博士學位論文密級學號?！幌U投監(jiān)QL牛病毒性腹瀉病毒抗原檢測、流行病學研究及J分離株E2基因的克隆表達鐘發(fā)剮、指導教師姓名T程安謄’教授四川農業(yè)大學。王新華研究員C新疆農星科學院申謂學位級另旺J監(jiān)J專業(yè)名稱甄瞳蛀匿堂論文提交目期2鯉G生生苴簽臣論文答辯日期2堂8生且學位授予單位和日期酉2哇壅些盔堂2塑8笙旦簪辯委員會主席整曼匠熊茲擐評閱二人盎跫建茁擐苤唇強越援置盎拯夔攫’皇墓僮越接囂掛塹越援，?！?。”’∥7’J2008年6月肽和全長E2蛋白的真核重組質粒PVAXL一E2；經(jīng)過PCR、酶切及測序表明PPROEXHTAE2和PVAXL一E2重組表達載體構建成功。將PPROEXHTAE2質粒轉化大腸桿菌DH5、JML09和BL21并誘導表達，表達目的蛋白用SDSPAGE檢測，目的蛋白沒有表達；用GENESCORT佃試劑轉染PVAXL一E2質粒、PGFP質粒陽性對照、空白對照到B呱一2L細胞，PGFP質粒表達檢測表明，綠色熒光蛋白得到了一定的表達，間接證明目的載體轉染后瞬時表達，但在PVAXLE2質粒細胞轉染后的細胞培養(yǎng)上清中用SDSPAGE檢測沒有檢測到表達的目的蛋白。對E2基因應用軟件預測及序列分析，構建了含有不同抗原表位I118一144340一100300一1345的PET28AEDI、PET28AED2、PET28AED3、PET28AED4四個質粒，轉化大腸桿菌并誘導目的蛋白的表達，SDSPAGE電泳檢測結果顯示所表達出了E2A、E2B、E2C、E2D融合蛋白相對分子量分別為186KDA、282KDA、292KDA、438KD，與預測蛋白分子量大小一致。WESTERNBLOT分析結果表明，所表達的融合蛋白E2B、E2C、E2D被?？笲VDV陽性血清識別。選擇PET28AED4質粒，轉化大腸桿菌并誘導目的蛋白的表達，并對表達產物進行了純化。通過方陣滴定法初步建立了檢測BVDV血清抗體的間接EIISA方法，對收集的約43份血清樣品進行了檢測，檢測陽性結果與進口試劑盒檢測結果符合率達到9355％，證明了所表達的重組蛋白作為包被抗原檢測牛病毒性腹瀉病毒血清抗體是可行的，為試劑盒的標準化奠定基礎。關鍵詞牛病毒性腹瀉病毒，抗原捕獲ELISA，分子流行病學，E2基因，克隆表達4

簡介：揚州大學博士學位論文Ⅰ群禽腺病毒的分離鑒定和生物學特性研究及重組禽腺病毒的構建姓名張明明申請學位級別博士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師秦愛建20080501揚州大學博士論文了這些分離到的禽腺病毒屬于I群禽腺病毒。同時，禽腺病毒在雞群、鴨群、鵝群中非常普遍，有必要對這些病毒的生物學特性進行研究。為了更好的了解分離株的生物學特性以便探討其作為活病毒疫苗載體的可能性，通過病毒凝集實驗、電鏡形態(tài)觀察、細胞病變、動物攻毒實驗等方法對上述疑為I群禽腺病毒3個分離株進行了研究。電鏡觀察病毒粒子，結果發(fā)現(xiàn)病毒為球型、無囊膜，直徑為7080衄，具有腺病毒典型的二十面體結構。紅細胞凝集試驗證明，分離到的病毒均不能凝集雞的紅細胞，與I群禽腺病毒的特征一致。細胞培養(yǎng)表明病毒分離株不能引起雞胚成纖維細胞CEF的細胞病變，而在雞胚腎細胞CEK上可以產生典型的禽腺病毒的細胞病變，表現(xiàn)為細胞變圓，折光性增強等病變。雞胚接種試驗未見明顯肉眼可見的病變，雞胚生長發(fā)育正常，這與I群禽腺病毒分離株CELOV的特性不完全一致。通過大劑量皮下注射和口服兩種途徑接種1日齡的SPF雞，進行人工致病性試驗。結果發(fā)現(xiàn)，試驗雞在感染病毒后，未出現(xiàn)任何明顯臨床癥狀。在10日齡時，皮下注射和口服攻毒的小雞的體重都明顯輕于對照組，而在20、30日齡時，各組和健康對照組之間體重沒有明顯差異，表明該分離株對SPF雞的體重影響不大，呈一過性。在10日齡時，攻毒組小雞主要免疫器官重量略低于對照組，實驗后期各組免疫免疫器官的重量基本一致。組織病理學切片觀察結果表明，部分臟器有輕微病變，大部分臟器基本沒有病變，后期組織器官均正常。這表明該病毒對免疫器官沒有明顯的生長抑制和可見的病理損傷。以上體內外實驗均表明病毒分離株致病性低，生物安全性高，可能是較好的禽腺病毒載體。前期研究中篩選了FAV二JS的復制非必需區(qū)，將CMV調控外源基因表達的表達盒插入的禽腺病毒FAVJS株左右臂構建了通用轉移載體PFACMV31。在此研究基礎上，從本實驗室分離的所有禽腺病毒中選擇ⅣⅣJS進行重組禽腺病毒的構建。本研究根據(jù)CELOV全基因序列設計引物，從Ⅳ胴JS基因組中PCR擴增出腺病毒的主要晚期啟動子MLP，將擴增產物克隆測序，并與CELOV的MLP進行了序列比較，兩者同源性為99％。在此基礎上，將FAVIJS株MLP片段克隆至PCD№鎢1，ZE0，然后再將PFACMV31中含有部分L片段和完整R片段的瑚R片段克隆至同一PCDNA31／ZE0中，隨后將含有MLP片段、部分L片段和完整R片段的大片段克隆至PFACMV31，將PFACMV31中的CMV啟動子替換為MLP啟動子，而其它部分不變，從而構建了MLP啟動子控制的通用轉移載體PFAMLP31。在此基礎上插入EGFP報告基因，構建了MLP啟動子控制表達EGFP的

簡介：分類號望3曼魚密級公玨單位代碼10086學號20132100177黃淮海地區(qū)重組型大豆花葉病毒的侵染性與生物學特性分析PATHOGENICITYANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFRECOMBINANTSOYBEANMOASICVIRUSINTHEHUANGHUAIHAI學位申請人指導教師學科專業(yè)學位類別授予單位答辯日期林靜謝令琴研究員張盂臣研究員遺傳學理學碩士河北農業(yè)大學二。一六年五月二十九日摘要大豆花葉病毒SOYBEANMOSAICVIRES，SMV病是一種世界性的病毒性病害，在各大豆產區(qū)均有發(fā)生，嚴重影響大豆的產量和商品價值。病毒的變異、重組是新病毒產生、寄主范圍改變以及致病性變化的重要原因。了解病毒信息，明確病毒的致病性，對防控病毒的大面積流行有著重要的作用。重組型SMV是2011年YANG等從重慶大豆產區(qū)發(fā)現(xiàn)的一種新型SMV病毒類型，目前對于這種新型SMV類型的系統(tǒng)性研究還未開展，新型SMV的出現(xiàn)也使大豆病害防治和抗病育種工作面臨新的挑戰(zhàn)。本研究目的是在發(fā)現(xiàn)重組型SMV的基礎上調查黃淮海地區(qū)SMV的組成情況，通過分離純化獲得重組型SMV分離物，并對其進行全基因組測序，分析其系統(tǒng)發(fā)育學分類和地位；選取一些國內外的大豆品種，利用重組型SMV進行抗性鑒定，分析其致病性和侵染力與非重組型SMV差異；構建感染重組型SMV的模式作物的酵母雙雜文庫，奠定深入研究重組型SMV侵染機制的物質平臺。具體研究內容和結果如下1從黃淮海地區(qū)共采集357份病樣，利用DSAELISA和RTPCR兩種方法進行檢測，結果顯示162份病樣呈SMV陽性，檢出率為454％。其中，83份病樣僅檢測出非重組型SMV，7份病樣僅檢測出重組型SMV，其余72份病樣均檢測出兩種類型SMV。此外，重組型SMV在河北省、安徽省及北京市的大豆產區(qū)均有分布。在162個SMV樣品中，含非重組型SMV的病樣占比956％，含重組型SMV的病樣占比487％；結果表明黃淮海SMV病害仍以非重組型SMV為主，但重組型SMV也廣泛分布，需要進一步關注。2利用菜豆品種TOPCROP采用枯斑分離的方式獲得了一個來源于河北省的重組型SMV分離物HBRS。利用RTPCR方法對其進行全基因組擴增和測序結果顯示，HBRS除POLYA尾巴外，由9993個核苷酸組成，翻譯后形成3202個氨基酸，比非重組型SMV分離物SC6多出135個氨基酸。系統(tǒng)進化樹結果顯示，除重組類型SMV外，HBRS與SC6親緣關系最近。其中，HBRS的5’UTR與P1的2／3N端與BCMV同源性最高，其余均與SMV同源性最高。研究結果表明，HBRS仍屬于SMV一種，是由BCMV和SMV在P1編碼區(qū)重組而來。3選取15份以往抗性鑒定中表現(xiàn)較好的大豆品種，利用人工接種的方法鑒定對HBRS抗性表現(xiàn)，結果顯示對HBRS表現(xiàn)免疫、中抗和感病的材料分別有5份，1份和8份。進一步選取其中4個抗感層次不同的品種進行接種SC6后對比分析，并利用QRTPCR方法對兩種類型的SMV在大豆葉片中的濃度積累進行檢測。結果顯示，癥狀上SC6侵染寄主后容易形成壞死斑，HBRS則主要以輕花葉為主；但HBRS在4個大豆品種中病毒積累濃度卻顯著高于SC6，結果表明HBRS對大豆更具有侵染性，但致病力較SC6弱。4以可系統(tǒng)侵染本氏煙的重組型SMV分離物HBRS為毒源，構建感染HBRS本氏煙的酵母雙雜CDNA文庫。利用SMART技術獲得本氏煙的雙鏈CDNA

簡介：東北農業(yè)大學博士學位論文表達豬輪狀病毒VP4基因和共表達VP4與LTB重組乳酸菌表達系統(tǒng)的構建及其免疫學評價姓名喬薪瑗申請學位級別博士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師李一經(jīng)20080620丕北農業(yè)大堂農學博士堂位論文PNZ8L12VP4LTB。每只小鼠分別免疫109CCU單位的重組菌，每次連續(xù)免疫三天，第一次加強免疫在第一次免疫后的17、18、19天，第二次加強免疫在第一次免疫后的33、34、35天。每次免疫后的第7天收集小鼠血清；每次免疫后的L、2、7天收集糞便；眼洗液是在每次免疫后的第7天以50皿的PBS沖洗眼結膜獲得；陰道洗液是在每次免疫后的第7天用200此的PBS沖洗陰道獲得；母鼠分娩后的3、5、7天收集乳汁。所有收集的樣品保存于20℃?zhèn)溆?。為保持黏膜系統(tǒng)的穩(wěn)定，許多防御機制都參與進行持久有效地作用。分泌性IGA的參與也是防御機制之一，IGA抗體通過阻止病原微生物的入侵和定植并競爭受體和代謝底物。為評價黏膜免疫反應，通過ELISA方法來檢測黏膜樣品中特異性IGA抗體的水平。在糞便、眼洗液和陰道洗液中我們檢測到了高水平的特異性IGA，與對照組相比差異顯著。其中免疫PPG1VP4的小鼠中特異性IGA抗體水平高于免疫PNZ8112VP4的小鼠，免疫PPG1VP4LTB的小鼠中特異性IGA抗體水平也高于免疫PNZ8L12Ⅵ4LTB的小鼠，這是因為LEMEI393同LACTOCOCCUSLACFISNZ9000相比具有更好的腸道定植能力。免疫PPO1VP4LTB和PNZ8112VP4LTB的小鼠糞便、眼洗液和陰道樣品中IGA抗體水平均高于免疫PPG1VP4和PNZ8112一VP4的小鼠。這是由于添加了黏膜免疫佐劑LTB的緣故，表明LTB能加強黏膜系統(tǒng)反應。具有低免疫原性的疫苗尤其需要強有力的佐劑來加強抗原遞呈，本研究證明LTB作為一種安全有效的佐劑具有極大的潛力。免疫PPG1VP4和PPG1VP4LTB的小鼠血清中IGG的效價相當，但都高于免疫PPG1的對照組。免疫PNZ8112Ⅵ4和PNZ8112VP4LTB的小鼠血清中IGG抗體的效價相當，但都高于免疫PNZ8112的對照組。在本研究中，口服免疫表達VP4和Ⅵ，4LTB的重組乳酸菌不僅能誘導產生黏膜免疫，而且誘導產生了系統(tǒng)免疫。通過口服免疫產生的黏膜免疫反應不只局限于胃腸道，也引起了其他黏膜部位的免疫反應。IGA抗體能和抗原結合并阻止其進入，降低炎性反應的程度，從而阻止了對組織的損傷，通過分泌性IGA抗體在黏膜表面對病原體進行排斥和清除，這對預防輪狀病毒感染是至關重要的。將新分離的免疫鼠脾細胞稀釋成5X106個／ML并培養(yǎng)66H，分別用O59∥ML，59∥RNL和25∥ML的VP4抗原進行刺激，收獲培養(yǎng)上清用于檢測細胞因子。脾淋巴細胞的增殖通過ELISA進行檢測，結果表明05舭和5L酌NL的VP4與259∥ML的VP4相比，具有更強的刺激增殖作用。IL4和IFN吖的檢測采用BIOSOURCE檢測試劑盒，方法參照說明書。結果表明免疫組中IL4和IFN吖的分泌顯著高于對照組，組間差異顯著，且分泌IL4的水平顯著高于IFN吖。這些數(shù)據(jù)表明，通過口服途徑免疫重組菌后引起了顯著的細胞因子反應，從而加強了抵抗輪狀病毒感染的保護作用。免疫母鼠產仔后的3、5、7天收集乳汁，通過ELISA方法檢測乳汁中的特異性抗體，結果顯示乳汁樣品中有較高水平的特異性IGA，表明免疫重組菌產生的抗體對于幼齡動物的被動免疫保護有一定作用。綜上所述，本研究所獲得的結果表明，乳酸乳球菌和干酪乳桿菌可用做口服免疫傳遞抗原引起黏膜和系統(tǒng)免疫。乳酸菌作為疫苗傳遞載體能夠定植于不同的黏膜部位，例如胃腸道、生殖道等，可被用于接種在病原體入侵的部位來抵抗感染。乳酸菌安全無毒的特點使它們更適合于用做口服疫苗載體來傳遞異源抗原，重組乳酸菌具有較好的免疫原性，并能引起較好Ⅱ

簡介：論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特IIII以標注和致謝的地方外，學位論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農業(yè)大學或其它教育機構的學位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名問水20J1年6月F二日關于論文使用授權的聲明本人完全了解四川農業(yè)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容?？诒菊撐牟槐Ｃ?。口本論文保密，在一年解密后適用本授權。請在以上口內劃“4”研究生簽名I刁術導師簽名工驢垃胗弓月、D。／年年6，占馴糾四川農業(yè)大學碩士學位論文與PKR轉錄水平與對照組相比均無顯著差異。結果表明GOTLR7與GORIGI在體外參與了抗H9N2流感病毒感染的免疫反應，并誘導抗病毒小分子的產生。GPV感染PBMC后，GOTLR21與其他免疫相關基因均無顯著性變化，我們猜測可能是由于GPV病毒需要更長的時間才能引起TLR21受體的識別，從而產生抗病毒因子，本實驗作用時間為8小時不能有效的誘導宿主經(jīng)由TLR21的抗病毒反應。為了進一步探討GOTLR7與GOTLR21是否具有抗病毒免疫學活性，我們構建了真核表達質粒PEGFPC1GOTLR7與PDSREDLN1GOTLR21并轉染傳代雞胚成纖維細胞DF110H，然后孵育新城疫病毒NEWCASTLEDISEASEVIRUS，NDV，經(jīng)絕對定量PCR反應及病毒滴度檢測而觀察轉染GOTLR7與GOTLR21質粒是否對DF1細胞中NDV的增殖或復制存在影響。GOTLR7與GOTLR21真核表達質粒分別轉染DFL細胞，而后孵育NDV病毒，研究結果顯示孵育NDV病毒12H后轉染有GOTLR7細胞中NDV的復制受到顯著的抑制，而轉染GOTLR21并未對病毒增殖造成影響；孵育NDV病毒24H時，實驗組與對照組的病毒拷貝數(shù)均有所上升，但是轉染GOTLR7組中NDV拷貝數(shù)及TCIDS0數(shù)值均顯著低于對照組，而轉染GOTLR21組中病毒增殖情況與對照組比較仍無顯著差異。因此，本實驗再次驗證GOTLR7參與抗RNA病毒免疫反應，并能抑制RNA病毒NDV的復制，而GOTLR21并不參與此反應。大量研究表明哺乳動物抗病毒TLR分布于細胞內的核內體。為了驗證禽類抗病毒TLR的細胞分布，我們將真核表達質粒PEGFPC1GOTLR7分別轉染DFL、GEF與BHK21。24H后對細胞核進行染色發(fā)現(xiàn)GOTLR7在DF1、BHK21與GEF上的細胞定位不同，具體表現(xiàn)為DF1和BHK21細胞中GOTLR7熒光信號集中分布于細胞核一側，呈現(xiàn)極化狀態(tài)；而GEF細胞上GOTLR7熒光信號圍繞分布于細胞核周圍，非分布于細胞核一側。我們分別采集PEGFPC1GOTLR7轉染BHK21細胞24H、48H與72H時的圖片發(fā)現(xiàn)GOTLR7的細胞定位隨表達時間發(fā)生了變化，具體表現(xiàn)為24H時，GOTLR7分布于細胞核的一側，而在48H及72H，GOTLR7綠色熒光集中分布于遠離細胞核的胞質內，呈現(xiàn)球形，推測其定位于某細胞器。將真核表達質粒PDSREDLN1GOTLR21分別轉染DF1、GEF、MDCK與BHK21。24H后對細胞進行染色，發(fā)現(xiàn)在不同細胞類型上GOTLR21分布特征一致，均表現(xiàn)為緊緊圍繞于細胞核周圍。分別采集PDSREDLN1GOTLR21轉染BHK2124H、48H與72H的圖片發(fā)現(xiàn)，GOTLR21的細胞定位隨表達時間也發(fā)生了變化。具體表現(xiàn)為轉染24H時，GOTLR21紅色熒光表現(xiàn)為緊緊圍繞細胞核周圍，呈現(xiàn)圓圈狀特征，而在48H時發(fā)現(xiàn)其濃縮為圓II

簡介：福建農林大學碩士學位論文泉州市豬圓環(huán)病毒病流行病學調查研究姓名吳秋玉申請學位級別碩士專業(yè)臨床獸醫(yī)學指導教師馬玉芳林振勝20081001福建農林大學專業(yè)碩士學位論文ABSTRACTTHEPORCINECIRCOVIRUSDISEASEISTHATTHEWEANEDPIGLETSSUFFERINGFROMPOSTWEANINGMULTISYSTEMATICWASTINGSYNDROMEPMWSANDPORCINEDERMATITISANDNEPHROPATHYSYNDROME，PDNS，WHICHCAUSEDBYPCV2INTHISINVESTIGATION，SURVEY、ELISAANDPCRWEREUSEDTOTESTTHOSEBLOODSELBM，SAMPLESOFSPECIMENOROTHERSAMPLESOFTISSUES、SWAB、MANUREWHICHPROVIDEDBYTHEINTENSIVESWINEFARMSANDEXTENSIVESWINEFARMSINQUANZHOUCITY，F(xiàn)UJIANPROVINCETHISSTUDYCANBEAREFERENCEOFHOWTOCONTROLTHEPCVDISEASEFORTHOSESWINEFARMERSINOURAREASINCE2006，WEDIDTHOUSANDSOFSURVEYFROMTHOSEVETSINOURCITYTHESURVEYSHOWEDTHAT2408％HAVETHESYMPTOMOFPCV，54COPIESALEPOSITIVELYINFECTEDBYPCVANDTHEREISNOTASWINEFARMINOCULATINGTHEVACCINEOFTHEPCVELISAWASUSEDTOTEST882SERUMSAMPLESFROM51INTENSIVESWINEFARMTHERESULTSSHOWEDTHATPCV2POSITIVERATEHASREACHED2551％225／882。THEINTENSIVESWINEFARMSTOOK2361％，ANDTHEEXTENSIVESWINEFARMSTOOK2804％12OFTHE28INTENSIVESWINEFARMSAND5OFTHE23EXTENSIVESWINEFARMSWERENEGATIVEPCRTECHNIQUEWASUSEDTOTEST122CLINICALSAMPLESFORPMWSANDPDNSTHERESULTSSHOWEDTHATTHEPOSITIVERATEOFPCVINFECTIONWAS4426％54／122ANDTESTED187CLINICALSAMPLESFROM35SWINEFARMS，THEPOSITIVERATEOFPCVWEREONLY1604％30／187OFTHECLINICALSAMPLESANDONLY2875％10／35SWINEFARMSWEREPOSITIVEINPCVFROMTHEABOVEINVESTIGATIONS，WECANSEETHATMOSTOFTHESWINEFARMSHAVETHEPCV2，ITISAHUGEPOTENTIALDANGERTOTHESWINEFARMINGBUSINESSINOURCITYWEWORKEDOUTTHEFOLLOWINGMEASURES，SUCHASVACCINEINOCULATION，EMPHASIZEDFEEDINGMANAGEMENT，DRUGSANDSOONTOPROTECTANDCONTROLTHEPCV2INFECTIONINPORCINEACCORDINGTOTHEPRACTICALFACTKEYWORDSPORCINECIRCOVIMSDISEASE；EPIDEMIOLOGY；INVESTIGATION2

簡介：論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，學位論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農業(yè)大學或其它教育機構的學位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名／司拋馴年‘月／夕日關于論文使用授權的聲明本人完全了解四川農業(yè)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。口本論文不保密?？诒菊撐谋Ｃ?，在一年解密后適用本授權。請在以上口內劃“4”研究生簽名／虱沈導師簽名糾占年6月，7日年Z月胗日四川農業(yè)大學碩上學位論文5真核表達質粒的構建和重組蛋白的表達經(jīng)PCR和酶切鑒定，表明PCDNA31IFNA與PCDNA31IFN7質粒構建成功。對體外培養(yǎng)BHK21細胞轉染質粒，并經(jīng)免疫印跡驗證確認PCDNA31IFNA與PCDNA31IF№質?？稍贐HK21細胞中成功表達，重組鵝IFNA與IFN7蛋白分別約為20KDA和18KDA，重組蛋白均在轉染24小時后表達量較高。6鵝I型與II型干擾素蛋白的抗病毒活性研究運用免疫印跡、定量PCR和流式細胞儀分析技術，對鴨瘟病毒的標簽熒光蛋白、病毒拷貝數(shù)、病毒滴度進行測定，發(fā)現(xiàn)外源鵝I型與II型干擾素蛋白均可有效抑制鴨瘟病毒在DEF中的增殖和復制，證明了鵝I型與II型干擾素蛋白具有抗病毒功能。另外，鵝源干擾素可誘導鴨源細胞中干擾素及其抗病毒基因的轉錄上調，表明其在鴨源細胞中也具有生物學活性。本研究為進一步研究重組鵝干擾素的抗病毒功能及其應用奠定了基礎。關鍵詞鵝；干擾素及其受體；組織分布；免疫學特性；抗病毒功能II

簡介：河南農業(yè)大學碩士學位論文犬細小病毒病的流行學調查及綜合防治措施研究姓名劉舜梁申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師王川慶20081001河南農業(yè)大學2005級獸醫(yī)碩士研究生畢業(yè)論文4CPV臨床診斷實驗本試驗應用犬細小病毒抗原快速檢測試劑盒、血凝／血凝抑制試驗對60份具有腹瀉和嘔吐癥狀的患犬糞便樣本進行了犬細小病毒檢測。這二種方法檢測結果存在一定的差異，它們檢測出的陽性份數(shù)分別為30，29，符合率高達9833％。5CPV臨床治療實驗本試驗用犬細小病毒單克隆抗體配合靜脈注射用犬免疫球蛋白和靜脈注射用犬血白蛋白對150例犬細小病毒病患犬進行治療。結果表明與抗病毒藥療法、抗病毒血清療法、單純使用單克隆抗體以及無配血反應健康犬全血輸血療法等的治療方法相比，采用犬細小病毒單克隆抗體治療的治愈率最高達8000％。2