簡介：浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文攜帶RGD4C多肽的AD5/11嵌合型腺病毒治療肝癌的研究姓名劉輝申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師錢其軍20090319浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文的感染能力，病毒不會僅依賴于細胞膜上CAR受體的存在而進入細胞。本研究將RGD4C插入ADS／11嵌合型腺病毒載體的FIBER的HILOOP，成功構(gòu)建了由人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶調(diào)控E1A基因、人缺氧反應(yīng)元件調(diào)控E1B基因的AD5／11嵌合型增殖腺病毒SG511．RGD4C，和帶有綠色熒光蛋白報告基因的非增殖型腺病毒ADILBRGD4CEGFP。體外實驗表明重組病毒SG511．RGD4C可以在腫瘤細胞中特異性復(fù)制、增殖和殺傷。而在正常細胞中增殖較少，殺傷能力較弱。病毒感染試驗結(jié)果證實，RGD．4C的插入可使病毒ADLLB．RGD4CEGFP在腫瘤細胞和正常細胞的感染效率提高。以上試驗結(jié)果表明，RGD4C插入AD5／11嵌合增殖型腺病毒FIBERHILOOP使其成為靶向性強，生物安全性良好的溶瘤病毒，為肝癌等實體瘤的生物治療提供了一種新的手段和工具。關(guān)鍵詞肝癌；病毒基因治療；RGD4C；AD5／11嵌合型腺病毒II

簡介：蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文基于UPII啟動子和PSCAE的膀胱癌溶瘤腺病毒的鑒定、擴增和純化姓名傅崇德申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)（泌尿外科）指導(dǎo)教師王志平20090501IDENTIFICATION，AMPLICATIONANDPURIFICATIONOFONCOLYTICADENOVIRUSWITHUPIIPROMOTERANDPSCAEAGAINSTBLADDERCANCERABSTRACTOBJECTIVETOPROVIDEVIRUSSAMPLEWITHHIGHTITER，HI曲PURITYANDSTRONGINFECTIVITYFORADVANCESTUDYINONCOLYTICEFFECTIVENESS，SAFETYFORNORMALTISSUEANDINVIVOEXPERIMENTSABOUTONCOLYTICADENOVIRUSAGAINSTBLADDENMETHODSFIRST，EACHADENOVIRUSSAMPLEWASAMPLIFIEDINSMALLQUANTITY,THENEACHDNAWASEXTRACTEDANDAMPLIFIEDBYPCR，ANDTHENIDENTIFIEDWANTEDGENEBYELECTROPHORESIS；AMPLIFIEDEACHADENOVIRUSINHEK293CELL，PURIFIEDADENOVIRUSWITHDENSITYGRADIENTULTRACENTRIFUGATIONUSESOFCSCL，INTHEEND，DETERMINETHEINFECTIONTITEROFADENOVIRUSWITH50％TISSUECULTUREINFECTIVEDOSE．RESULTSADENOVIRUSWHICHHAVEBEENCERTIFIEDCONTAININGAIMEDGENEPSCAE，UPIIANDE1A．EACHADENOVIRUSHASBEENAMPLIFIEDCANINFECTHUMANEMBRYOKIDNEYCELLSANDADENOVIRUSBANDSCANBESEENWHENPURIFIED．CONCLUSIONEACHADENOVIRUSWHICHHASBEENPACKAGEDARECORRECTBECAUSETHEYHAVEAIMEDGENEINTHEMANDTHEYCANBEAMPLIFIEDINHUMANEMBRYOKIDNEYCELLSANDPURIFIEDINTHEEND．KEYWORDSBLADDERCANCER；ONCOLYTICADENOVIRUSUPII；PSCAE

簡介：目的觀察姜黃素對自發(fā)性高血壓SPONTANEOUSHYPERTENSIVE，SH大鼠腦缺血再灌注后認知能力和海馬神經(jīng)元凋亡的影響及其可能的保護機制，為臨床研究提供參考。方法雄性WISTARKYOTOWKY大鼠60只，隨機分為2組假手術(shù)組WS組和全腦缺血再灌注組WIR組；SH大鼠90只，隨機分為3組假手術(shù)組SS組、全腦缺血再灌注組SIR組和姜黃素100MGKG組SCUR組，于缺血前1小時腹腔給藥。上述實驗組按再灌注2H、6H、1D、3D、7D五個時間點再分為五個亞組。采用4VO法建立大鼠全腦缺血再灌注模型，于缺血再灌注2H、6H、1D、3D、7D時處死6只大鼠。制備大鼠腦石蠟標本，采用TUNEL法檢測海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的凋亡情況，免疫組化法測定海馬CA1區(qū)PJNK、BAX和BCL2的表達水平，于再灌注7D時觀察行為學(xué)，然后處死。結(jié)果1行為學(xué)兩種大鼠假手術(shù)組學(xué)習能力和記憶能力無差別P005。與WKY大鼠相比，SH大鼠再灌注期間學(xué)習能力和記憶能力下降。與SIR組相比，SCUR組大鼠再灌注期間學(xué)習能力和記憶能力提高。2神經(jīng)元凋亡計數(shù)與WS組相比，SS組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元凋亡計數(shù)增加P005。與兩種大鼠假手術(shù)組相比，兩IR組及SCUR組大鼠海馬CA1區(qū)BCL2和BAX均在缺血再灌注后2H表達開始增加，1D達到高峰后開始回落，至7D基本正常；與WIR組比較，SIR海馬CA1區(qū)BAX表達增加更明顯P005，BCL2的表達減少P005；與SIR組大鼠相比，SCUR組海馬CA1區(qū)BCL2表達增多P005，BAX的表達減少P005。結(jié)論自發(fā)性高血壓大鼠缺血復(fù)灌后通過增強PJNK的表達、調(diào)控凋亡相關(guān)基因BAX和BCL2促進海馬神經(jīng)元凋亡，加重缺血再灌注后腦損傷。姜黃素可顯著減少自發(fā)性高血壓大鼠缺血性海馬神經(jīng)元再灌注后凋亡的發(fā)生，其機制與減少海馬PJNK和BAX表達、增強BCL2的表達有關(guān)。

簡介：目的丙型肝炎病毒（HEPATITISCVIRUS，簡稱HCV）感染是當前危害人類健康的重要傳染病之一，目前除干擾素聯(lián)合利巴韋林外尚無有效預(yù)防和治療手段。因此，尋找其他治療途徑，預(yù)防和清除HCV的持續(xù)感染很有必要。而將編碼HCV抗原的外源基因?qū)霗C體誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性T細胞免疫反應(yīng)的HCV新型疫苗目前正在受到人們的重視。以重組復(fù)制缺陷型腺病毒REPLICATIONDEFICIENTRECOMBINANTADENOVIRUS，RAD為載體的疫苗，能模擬天然病毒有效地將外源基因?qū)胨拗骷毎麅?nèi)并使之高效表達，誘導(dǎo)機體產(chǎn)生針對目的抗原的免疫應(yīng)答。為此，我們利用ADMAXTM腺病毒包裝系統(tǒng)構(gòu)建可表達HCV核心抗原CE的HCV重組腺病毒PADCE，并觀察其免疫小鼠后，誘導(dǎo)機體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的能力，為進一步研究防止HCV感染的基因疫苗和基因治療奠定基礎(chǔ)。方法RTPCR法從丙型肝炎患者血清中擴增出HCVCE基因定向克隆到重組腺病毒ADMAXTM系統(tǒng)的穿梭質(zhì)粒PDC315的多克隆位點上，構(gòu)建重組穿梭質(zhì)粒PDC315CE，在脂質(zhì)體介導(dǎo)下與腺病毒基因組骨架質(zhì)粒PBHGLOXDELTAE13CRE共轉(zhuǎn)染至HEK293細胞，通過同源重組包裝產(chǎn)生復(fù)制缺陷型重組腺病毒PADCE；經(jīng)HEK293細胞擴增后，離子交換柱層析法純化病毒，測定病毒顆粒數(shù)和滴度；利用重組腺病毒體外感染人肝癌細胞株HEPG2，經(jīng)免疫印跡（WESTERNBLOT）方法檢測目的蛋白的表達，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗ENZYME1INKEDIMMUNOSBENTASSAY，ELISA檢測免疫小鼠血清抗體水平，酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)（ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTSPOTELISPOT）檢測免疫小鼠特異性T淋巴細胞免疫反應(yīng)。結(jié)果重組腺病毒PADCE經(jīng)PCR及序列測定證實CE基因插入正確，在HEK293細胞中具有良好的感染性；擴增純化后，重組腺病毒的比活性可達342IU100VP，單細胞產(chǎn)量可達263104VPCELL；WESTERNBLOT檢測結(jié)果表明PADCE在HEPG2細胞可穩(wěn)定表達目的蛋白，免疫小鼠后可刺激機體產(chǎn)生特異性體液免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答。結(jié)論成功構(gòu)建了表達HCV核心抗原CE的HCV重組腺病毒PADCE，該重組腺病毒可在人肝癌細胞株HEPG2細胞內(nèi)穩(wěn)定表達目的蛋白，并且能夠誘導(dǎo)機體產(chǎn)生有效的體液免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答，具有成為丙肝疫苗的發(fā)展?jié)摿Α?

簡介：病毒星是本中心自主開發(fā)的具有高效抗TMV活性的抗病毒劑為系統(tǒng)研究病毒星的作用機理，尋找病毒星抗TMV的作用靶標，本論文開展了如下工作采用半葉枯斑法對病毒星室內(nèi)生物活性測試發(fā)現(xiàn)病毒星在500ΜGML劑量下的活體治療抑制率為6623％，明顯優(yōu)于寧南霉素500ΜGML，4556％，在離體治療、活體鈍化、活體保護條件下的抑制率分別達4853％、6885％、4898％，其對TMV的EC為29447ΜGML，，劑型優(yōu)化試驗表明30％病毒星可濕性粉劑對TMV的活體治療效果明顯優(yōu)于對照藥劑寧南霉素?？筎MV病田間藥效試驗30％可濕性粉劑的病情指數(shù)均明顯低于空白對照區(qū)P326葉片中的作用機制具有類似性。開展了病毒星抗TMV生化機理初步研究發(fā)現(xiàn)病毒星處理接種TMV后的煙草植株中，PAL活性、POD活性、SOD活性及葉綠素含量等相關(guān)酶和調(diào)控物質(zhì)在一定的時間內(nèi)都具有相關(guān)性。病毒星明顯誘導(dǎo)了PAL，活性的升高；同時也誘導(dǎo)了葉綠素含量的增加?？疾炝瞬《拘菍煵莶〕滔嚓P(guān)蛋白PR的誘導(dǎo)作用，結(jié)果顯示病毒星誘導(dǎo)煙葉中胞間蛋白的種類和TMV刺激煙葉產(chǎn)生的胞間蛋白的種類基本一致；且經(jīng)等點聚焦電泳實驗發(fā)現(xiàn)，三種蛋白中分子量為55KDA的蛋白可能是核酮糖1，5二磷酸羧化酶的一個大亞基分子量55KDA，等電點PH49。通過透射電鏡進行病毒星鈍化半小時后的病毒粒子和正常的病毒粒子形態(tài)比較，發(fā)現(xiàn)病毒星有使病毒粒子凝聚的傾向。

簡介：東晉法顯共佛陀跋陀羅譯摩訶僧只律是佛教根本大衆(zhòng)部所奉持的一部廣律，語料的翻譯年代真實可靠；作爲佛家“律法”，其語言更爲貼近當時社會生活，且口語性強；文獻篇幅較長，約五十四萬字，是漢語詞匯研究的可貴語料，其中不少詞匯在漢語詞匯發(fā)展史上有一定的價值。本文選取摩訶僧只律中經(jīng)貿(mào)、醫(yī)療、拘囚類的八個單音動詞概念場爲考察對象，運用概念場理論和認知語言學(xué)的相關(guān)理論分析了其中45個單音動詞的詞義演變情況。詞義演變研究是歷史詞匯學(xué)的核心課題，其中包括詞義演變的具體考察和詞義演變規(guī)律的分析。本文首先對各個概念場中的單音動詞在摩訶僧只律中的使用情況進行細致的描寫；其次運用概念場理論和方法對這些單音動詞的詞義演變軌跡進行分析，追溯它們的演變歷程，并對反映出來的規(guī)律性現(xiàn)象加以理論概括；最後嘗試運用認知語言學(xué)的相關(guān)理論，闡釋概念場中單音動詞詞義演變的動因、條件和規(guī)律。在現(xiàn)有關(guān)於詞義演變研究的理論基礎(chǔ)上，本文主要采用“共時和歷時相結(jié)合”、“描寫和解釋相結(jié)合”、“歷史分析和認知分析相結(jié)合”的方法，對摩訶僧只律中部分單音動詞詞義的演變進行考察和分析。全文共分五章。第一章在介紹摩訶僧只律概況及語言研究價值的基礎(chǔ)上，進一步闡明詞義演變研究的理論基礎(chǔ)及本文的研究取向。第二章、第三章、第四章以概念爲視點，考察了經(jīng)貿(mào)類、醫(yī)療類以及拘囚類中“借貸”、“償還”、“雇賃”、“貿(mào)易”、“患病”、“治療”、“逮捕”、“囚禁”等八個概念場在摩訶僧只律中的詞匯表達形式，同時適當?shù)匮a充了中古時期同一概念場的同類詞匯表達形式，并追溯其來源，根據(jù)它們的詞義演變軌跡，對其引申規(guī)律進行排比和分類，以期發(fā)現(xiàn)詞語表達形式與概念內(nèi)容之間的對應(yīng)聯(lián)系，還可以看出摩訶僧只律在詞匯運用上的特點。在研究過程中既區(qū)分了共時平面上同一概念場內(nèi)的典型成員和非典型成員，也注意到同一概念場詞語詞義的歷時演變，并且分析了相關(guān)概念場的邊界模糊狀況。同時嘗試運用認知語言學(xué)的相關(guān)理論，闡釋概念場中單音動詞詞義演變的動因和機制。其中部分章節(jié)以詞爲視點，運用認知語言學(xué)的理論對“負”、“録”和“系”的一詞多義現(xiàn)象進行了分析，試圖揭示一詞多義現(xiàn)象的產(chǎn)生機制，理清多義詞各義項之間的聯(lián)系。第五章我們首先考察了摩訶僧只律單音動詞概念場的詞義系統(tǒng)性。具體考察了兩個方面的問題（1）摩訶僧只律中單音動詞的多義化及同義并列復(fù)合詞的形成；（2）同一概念場詞語詞義的歷史演變。其次，我們描述了認知語言學(xué)背景下的詞義演變觀，以及影響詞義演變的幾個重要認知機制。通過全文的考察，我們發(fā)現(xiàn)（1）本文考察的45個單音動詞詞義演變主要是在隱喻機制和轉(zhuǎn)喻的作用下實現(xiàn)的。（2）摩訶僧只律中單音動詞的詞義演變對復(fù)合詞的形成有著重要的影響，爲同義并列式復(fù)合詞的形成提供了可選形式，爲復(fù)合詞的詞義演變提供了演變模式。（3）通過歷時的分析，我們對“負”、“録”、“系”等多義詞各義項之間的聯(lián)系有了更爲具體的了解和認識。（4）結(jié)合認知語言學(xué)的意象圖式理論、范疇化理論以及家族相似性理論，使“償還”概念場、“治療”概念場、“貿(mào)易”概念場、“逮捕”概念場中動詞詞義演變過程得到了更爲合理的分析和解釋。

簡介：目的加強對CASTLEMAN病CD的臨床及病理認識探討乙型肝炎病毒感染在該病發(fā)病機制中的作用。方法回顧總結(jié)2004年1月至2009年6月我院確診為CASTLEMAN病患者的臨床及病理資料。同時比較CASTLEMAN病患者與同期我院住院病人乙肝表面抗原陽性率從而探討乙肝病毒感染在CASTLEMAN病發(fā)病機制中的作用。引用兩篇公開發(fā)表的韓國及美國患者數(shù)據(jù)比較三國CASTLEMAN病患者臨床及病理差異。結(jié)果2004年1月至2009年6月我院確診的CASTLEMAN病患者共22例男性10人女性12人中位年齡39歲1976歲22例患者中局灶型13例多中心型9例。局灶型中透明血管型10例混合型2例漿細胞型1例脾大4例所有患者均無全身癥狀中位生存期25個月449個月多中心型中透明血管型7例漿細胞型2例無混合型脾大7例存在全身癥狀者8例中位生存期115月041月。22例患者中乙肝表面抗原陽性5例2273％顯著高于我院平均乙肝表面抗原陽性率833％P0039且該5例患者均為透明血管型。既往或現(xiàn)時感染乙肝病毒HBSAG或HBEAG或HBEAB或HBCAB11例其中透明血管型9例混合型2例無漿細胞型。22例患者中透明血管型17例P00029脾大11例P000084均顯著高于韓國及美國CASTLEMAN病人群。結(jié)論本中心CASTLEMAN病患者具有獨特的臨床及病理特征乙肝病毒感染可能是CASTLEMAN病尤其是透明血管型CASTLEMAN病發(fā)病的致病因素。

簡介：戊型肝炎是由戊型肝炎病毒引起的、經(jīng)消化道傳播的急性肝炎，在發(fā)展中國家及發(fā)達國家均有流行。越來越多的研究證據(jù)表明戊型肝炎為人獸共患病，其病毒潛在由動物到人的交叉感染而導(dǎo)致傳播的危險，這使得戊型肝炎逐漸成為嚴重威脅人類健康的疾病。由于至今尚未建立有效的病毒分離方法和細胞培養(yǎng)模型，也缺乏便捷實用的動物模型，國內(nèi)外學(xué)者對戊型肝炎病毒的研究還不夠充分。為提供更有效的疾病防治方案，人們迫切需要研究清楚戊型肝炎病毒的抗原表位結(jié)構(gòu)和免疫應(yīng)答機制。本研究首先利用針對戊型肝炎病毒的抗體庫，采用基于改造蛋白和重疊肽庫的表位鑒定技術(shù)、抗體競爭抑制性分析、抗體免疫捕獲病毒分析、基于重組衣殼蛋白吸附細胞模型或病毒結(jié)合細胞模型的抗體性質(zhì)分析等方法，較詳盡地考察抗體的各種性質(zhì)。其次，分析對比了代表性表位，進行了序列比對、表位突變分析，這對認識戊型肝炎病毒復(fù)雜的抗原表位和疫苗設(shè)計有著重要的意義。再次，利用顆粒性蛋白載體構(gòu)建表位融合蛋白從而充分地展示了表位，發(fā)現(xiàn)了其中12A10抗體對應(yīng)的非優(yōu)勢表位具有一定的中和性，可以作為表位疫苗設(shè)計的候選表位。本論文嘗試在戊型肝炎病毒重組衣殼蛋白的基礎(chǔ)上闡釋了戊型肝炎病毒抗原表位，篩選出具有代表性的表位并進行深入的分析比較，嘗試在這些表位基礎(chǔ)上對其表位疫苗設(shè)計進行了初步的探索。這不僅為表位的深入研究提供了方法參考和研究思路，有助于對戊型肝炎病毒抗原全面深入的了解；還有利于其病理研究和疫苗研制，對戊型肝炎病毒表位疫苗設(shè)計具有很好的參考價值。

簡介：分類號密級華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文農(nóng)民認知視域下農(nóng)村義務(wù)教育公平研究基于湖北省武穴市農(nóng)村的調(diào)查THERESEARCHONRURALCOMPULSORYEDUCATIONFAIRINTHEPERSPECTIVEOFFAMERDEMANDBASEDONTHEINVESTIGATIONOFRURALAREASINWUXUE，HUBEIPROVINCE究生朱國華號2012316110011導(dǎo)教師李愷副教授導(dǎo)小組吳春梅教授蕭洪恩教授李愷副教授梁偉軍副教授雷玉明副教授霄直明剮秋漢朱清海副教授方菲副教授專業(yè)馬克思主義中國化研究研究方向馬克思主義中國化理論與實踐獲得學(xué)位名稱法學(xué)碩士獲得學(xué)位時間2015年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)馬克思主義學(xué)院二O一五年六月研學(xué)指指農(nóng)民認知視域下農(nóng)村義務(wù)教育公平研究基于湖北省武穴市農(nóng)村的調(diào)查目錄摘要IABSTRACTIII導(dǎo)論111研究背景112研究目的與意義一2121研究目的2122研究意義313國內(nèi)外研究現(xiàn)狀一4131國外研究現(xiàn)狀4132國內(nèi)研究現(xiàn)狀5133文獻述評102研究設(shè)計1121研究的理論基礎(chǔ)11221馬克思主義教育公平觀11222模糊理論1222研究內(nèi)容與研究思路1323研究創(chuàng)新之處1424核心概念界定14241教育公平14242義務(wù)教育1525研究方法153農(nóng)村義務(wù)教育公平指標體系的構(gòu)建基于農(nóng)民認知的視域。1731基于農(nóng)民認知視角的農(nóng)村義務(wù)教育公平理論框架的研究17311研究過程173111資料的收集1731I2資料的分析18312理論框架的構(gòu)建20313研究結(jié)果說明213131城鄉(xiāng)公平213132歷史公平223133內(nèi)部公平2332農(nóng)村義務(wù)教育公平指標體系的構(gòu)建24321農(nóng)村義務(wù)教育公平指標體系框架設(shè)計24322指標體系權(quán)重的確定263221建立層次分析模型27

簡介：情緒表達規(guī)則認知作為情緒認知的重要內(nèi)容之一，對兒童社會能力的發(fā)展起著重要的作用。探討兒童情緒表達規(guī)則認知的發(fā)展特點及其與同伴接納的關(guān)系，對于促進兒童的社會適應(yīng)能力、提高其同伴交往能力都有著重要的作用。情緒表達規(guī)則認知主要包括情緒表達規(guī)則知識、情緒表達規(guī)則目標及情緒表達規(guī)則策略。情緒表達規(guī)則知識考察的是兒童在交往過程中，內(nèi)部情緒體驗與外部情緒表達之間的差別性；情緒表達規(guī)則目標考察的是兒童情緒表達規(guī)則的目標導(dǎo)向性，包括自我保護目標和社會定向目標兩種類型情緒表達規(guī)則策略考察的是兒童在使用情緒表達規(guī)則時所運用的策略，包括平靜化策略、掩飾策略、弱化策略和夸大策略。本研究采用故事情境訪談法和同伴提名法，考察了127名911歲兒童情緒表達規(guī)則認知的發(fā)展及其與同伴接納的關(guān)系。研究一通過故事情境訪談法考察了不同年齡、性別、情緒情境下兒童情緒表達規(guī)則認知的發(fā)展特點；研究二采用同伴提名法測量了兒童的同伴接納，在研究一對兒童情緒表達規(guī)則認知發(fā)展的研究基礎(chǔ)上，考察了兒童情緒表達規(guī)則認知與同伴接納的關(guān)系。研究得出了以下主要結(jié)論1911歲兒童的情緒表達規(guī)則知識水平隨著年齡的增長而提高。10至11歲是兒童的情緒表達規(guī)則知識發(fā)展較快的時期。2911歲兒童傾向于以社會定向目標指導(dǎo)自己的情緒表達行為。社會定向的情緒表達規(guī)則目標在10到11歲之間增長較為迅速。3911歲兒童使用得最多的策略是掩飾策略，其次是平靜化策略，夸大和弱化策略使用得最少。10至11歲是兒童在調(diào)節(jié)積極情緒時使用平靜化策略發(fā)展較快的時期。隨著年齡的增長，兒童越來越少地使用弱化策略。平靜化策略和夸大策略被更多地用于調(diào)節(jié)積極情緒，掩飾策略被更多地用于調(diào)節(jié)消極情緒。4911歲，兒童的情緒表達規(guī)則知識、社會定向目標、掩飾策略與兒童同伴接納水平之間存在顯著正相關(guān)。5社會定向目標對兒童的同伴接納水平具有正向預(yù)測作用，即更多地以社會定向目標指導(dǎo)情緒表達行為的兒童，其同伴接納水平更高。

簡介：一、研究背景乙型肝炎病毒HBV感染是全球面臨的嚴重公共衛(wèi)生問題，全球60億人口有一半居住于乙肝病毒感染高發(fā)區(qū)，約20億人口有感染過乙肝病毒的確切證據(jù)，其中慢性感染者已達3540億，每年約有100萬人死于肝硬化或肝癌1。我國屬乙型肝炎高地方性流行區(qū)，據(jù)1992年全國病毒性肝炎血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，我國慢性乙型肝炎病毒感染者約12億，其中慢性乙型肝炎患者約3000萬例，每年死于肝硬化和肝癌等乙型肝炎相關(guān)疾病人數(shù)達30余萬例2。乙型肝炎是我國當前和今后相當長時期內(nèi)危害人民健康、阻礙社會經(jīng)濟發(fā)展的重要因素，已成為嚴重危害人民健康的公共衛(wèi)生問題。乙型病毒性肝炎的發(fā)病機理未完全闡明，病毒的復(fù)制表達狀態(tài)和宿主的免疫應(yīng)答是兩個主要因素。機體抗HBV的免疫反應(yīng)在肝細胞損傷方面起著關(guān)鍵的作用，尚有一些研究也證實HBV病毒本身可以直接引起肝細胞的損傷35。二、研究目的探討抗病毒治療對乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭患者轉(zhuǎn)歸的影響，進一步研究低、高乙型肝炎病毒載量與乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭患者預(yù)后的關(guān)系。三、對象和方法31研究對象我院2006年9月至2008年6月收治的乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭患者348例，診斷符合2006年中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會及肝病學(xué)分會修訂的肝衰竭診療指南23，排除標準為合并有其他病毒性肝炎、藥物及酒精性肝損害、遺傳代謝性肝臟疾病、自身免疫性疾病、腫瘤、合并嚴重的心、腦、肺等臟器器質(zhì)性病變等。32治療方法入選患者根據(jù)肝衰竭診療指南23分期標準分為早期、中期、晚期，各期患者在組內(nèi)分為常規(guī)治療組及抗病毒治療組。常規(guī)治療組采用常規(guī)內(nèi)科治療，抗病毒治療組在內(nèi)科常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用抗病毒治療。HBVDNA陽性的患者在充分了解抗病毒治療的療效及安全性的基礎(chǔ)上，依據(jù)自身經(jīng)濟情況自主選擇抗病毒藥物包括拉米夫定、恩替卡韋、替比夫定，因阿德福韋酯抑制病毒復(fù)制效果較慢及潛在的腎毒性，不建議患者使用，所有患者均簽署抗病毒治療知情同意書，存活者繼續(xù)服用。服用抗病毒藥物不足2周死亡的患者歸入常規(guī)治療組。隨訪時間為24周。33觀察指標治療前及治療期間每周檢測一次丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST、血清總膽紅素TBIL、血清白蛋白ALB、血清肌酐CR、凝血酶原時間PT、國際標準化比值INR。每2周檢測血清HBVDNA定量。同時觀察并發(fā)癥如肝性腦病、肝腎綜合征、腹膜炎、消化道出血、肺炎等。隨訪時間為24周。肝、腎功能采用美國BECKMAN全自動生化儀及其配套試劑檢測，HBSAG、抗HBS、HBEAG、抗HBC采用美國ABBOTT公司第二代試劑微粒子酶聯(lián)免疫法MEIA檢測，HBVDNA定量采用核酸熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)PCR檢測，試劑由廣州達安基因診斷中心提供，敏感度為500COPYML。34療效判定341存活患者在治療及隨訪期間尚存活。342死亡包括住院期間及自動出院后隨訪死亡。35統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS130統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，率的比較采用X2檢驗，計量資料兩組比較采用T檢驗，多組比較采用方差分析，均數(shù)間差別比較采用LSDT檢驗，多因素COX回歸分析篩選影響預(yù)后的因素，生存分析采用KAPLANMEIER法，兩組生存率比較采用LOGRANK檢驗，P005；不同分期患者HBEAG陰性者所占比例不同，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005；低病毒載量患者HBEAG陰性者所占比例較高，與高病毒載量患者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。晚期患者中，常規(guī)治療及抗病毒治療下，低病毒載量組存活率與高病毒載量組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義P005。五、結(jié)論1、多因素COX回歸分析結(jié)果顯示抗病毒治療可改善乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭患者的預(yù)后。2、觀察24周，抗病毒治療可提高乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭中期、晚期患者的存活率，而對于早期患者的短期存活率無影響，其長期療效尚需進一步追蹤研究。3、低、高乙型肝炎病毒載量的乙型肝炎相關(guān)慢加急性肝衰竭患者的預(yù)后有所不同，常規(guī)治療下，低病毒載量的早、中期患者存活率低于高病毒載量患者，抗病毒治療可提高低病毒載量患者的存活率。

簡介：目的血管性認知功能障礙VCI基于腦血管危險因素之上，不僅表現(xiàn)為智能的下降，日常生活能力也有不同程度的損害，嚴重影響了患者及家屬的生活質(zhì)量，目前為止尚沒有治療VCI的特效藥。在中醫(yī)“治未病”的理論指導(dǎo)下，本試驗通過對100例中風后無認知功能障礙患者進行社區(qū)干預(yù)24周，觀察社區(qū)指導(dǎo)前后患者認知功能的變化，探討社區(qū)干預(yù)對中風后無認知功能障礙患者認知功能的影響。方法選取2013年1月至2013年12月河北省中醫(yī)院及石家莊市部分社區(qū)就診的患者。入選標準1年齡在50歲至80歲的男性或女性。2有卒中病史，符合腦梗死或腦出血的診斷標準，并提供影像學(xué)證實。3最近一次卒中發(fā)生在2周至6個月前。4蒙特利爾認知評估北京版MOCA評分≥26分（受教育年限小于9年者加一分，以糾正文化的偏差程度）。5臨床癡呆評定量表CDR評分0分。6簽署知情同意書，同意參加本試驗。將100例患者隨機分為兩組，干預(yù)組與對照組各50例。兩組均給予健康教育，在此基礎(chǔ)上干預(yù)組還給予生活指導(dǎo)，要求干預(yù)組受試者具備良好的心態(tài)，積極面對人生，擁有豁達的人生態(tài)度，積極參加社交活動控制原發(fā)病，防止中風復(fù)發(fā)，養(yǎng)成良好的生活方式，戒煙限酒，清淡飲食，低鹽低脂低糖飲食，控制血壓、血脂、血糖，多吃新鮮的蔬菜、水果，依據(jù)不同的體質(zhì)可選擇不同的膳食方案堅持參加體育活動，強健體魄堅持多用腦，勤于思考適當參加娛樂活動放松心情堅持中藥泡腳，可針對基礎(chǔ)疾病加用不同的泡腳藥物堅持穴位按摩，疏通經(jīng)絡(luò)，強壯體魄。對受試者發(fā)放健康手冊，每周進行填寫，每四周隨訪醫(yī)師對受試者隨訪，共計隨訪24周。觀察隨訪前和干預(yù)24周后MMSE、MOCA、日常生活能力量表、核心癥狀觀察表、周邊癥狀觀察表，通過統(tǒng)計學(xué)分析得出社區(qū)干預(yù)對中風后無認知功能障礙患者認知功能的影響。結(jié)果1、干預(yù)組與非干預(yù)組干預(yù)前后MMSE評分比較TABLE1經(jīng)方差齊性檢驗，不具有方差齊性，所以用兩獨立樣本非參數(shù)檢驗，經(jīng)檢驗，干預(yù)前干預(yù)組與非干預(yù)組P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異干預(yù)后P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異。2、干預(yù)組與非干預(yù)組干預(yù)前后MOCA評分比較TABLE2經(jīng)方差分析，干預(yù)前干預(yù)組與非干預(yù)組P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異干預(yù)后P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異。但干預(yù)組干預(yù)前后MOCA分數(shù)變化不大，非干預(yù)組干預(yù)后MOCA分數(shù)交前有所下降。VCI是一個進行性加重的疾病，通過對比干預(yù)前后MOCA積分，表示社區(qū)干預(yù)對延緩受試者認知障礙的發(fā)生有一定效果。3、干預(yù)組與非干預(yù)組干預(yù)前后ADL評分比較TABLE3干預(yù)前后兩組P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異。4、干預(yù)組與非干預(yù)組干預(yù)前后核心癥狀評分比較TABLE4干預(yù)前P＜005，有統(tǒng)計學(xué)差異，干預(yù)后P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異，我們可認為干預(yù)前干預(yù)組核心癥狀積分重于非干預(yù)組，經(jīng)干預(yù)方案后，兩組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，說明干預(yù)組干預(yù)后核心癥狀較干預(yù)前有所減輕，可以表明生活方式的干預(yù)可降低受試者的核心癥狀積分，對患者智能的改善有積極作用。5、干預(yù)組與非干預(yù)組干預(yù)前后周邊癥狀評分比較TABLE5干預(yù)前P＜005，有統(tǒng)計學(xué)差異，干預(yù)后P＞005，無統(tǒng)計學(xué)差異，說明干預(yù)前入組時干預(yù)組的周邊癥狀積分較非干預(yù)組周邊癥狀積分重，經(jīng)社區(qū)干預(yù)，干預(yù)組干預(yù)后的周邊癥狀積分較干預(yù)前明顯下降，非干預(yù)組干預(yù)前后周邊癥狀積分變化不明顯，這可能與我們給予干預(yù)組受試者生活方式的干預(yù)，改變其體質(zhì)，使其周邊癥狀較干預(yù)前有所減輕。結(jié)論1、通過對中風后無認知功能障礙患者進行社區(qū)干預(yù)，可改善受試者的中醫(yī)核心癥狀及周邊癥狀，鑒于本試驗觀察時間較短，尚不能認為社區(qū)干預(yù)可改善無認知障礙患者的認知功能，但從MOCA積分對比表明其趨勢可延緩認知功能下降的進展。2、社區(qū)干預(yù)給予健康生活方式指導(dǎo)，較為簡便，患者易于接受，易于大范圍推廣，對患者長期生存及生活質(zhì)量的改善有積極意義。

簡介：目的對云南傈僳族普通人群中的HBV感染進行血清流行病學(xué)調(diào)查及其基因型、基因亞型分布情況，以期為該民族乃至其他少數(shù)民族HBV感染的防治提供依據(jù)。方法應(yīng)用酶聯(lián)吸附免疫法（ELISA法）檢測314份傈僳族血清標本HBV的感染情況（其中男142例，女172例），并應(yīng)用型特異性引物巢式PCR結(jié)合聚合酶鏈反應(yīng)一限制性片段長度多態(tài)性法（PCRRFLP）對其HBV血清標志物陽性組合進行基因型及基因亞型分型的鑒定，并進行測序分析。結(jié)果（1）該研究傈僳族人群314份標本中HBV慢性感染率為32，低于平均水平；其HBV感染率與年齡、性別、地區(qū)無統(tǒng)計學(xué)意義。（2）不同性別、不同地區(qū)、不同年齡傈僳族人群中的HBV血清標志物組合均無統(tǒng)計學(xué)意義。（3）基因型分型陽性5例，其中B型3例，C型1例，BC混合型1例；共檢測出基因亞型分型陽性5例，其中BA亞型3例，CS亞型1例，CE亞型1例；（4）型特異性PCR和巢氏PCRRFLP法鑒定HBV基因型及亞型結(jié)果與直接測序結(jié)果一致。結(jié)論（1）該研究傈僳族人群所在地區(qū)為HBV感染中度流行區(qū)。（2）不同性別傈僳族人群乙肝感染率及不同地區(qū)（大理云龍、怒江瀘水）間的傈僳族人群乙肝感染率均無差異。（3）傈僳族人群中HBV血清標志物組合與其性別、所在地區(qū)、年齡均無關(guān)；（4）現(xiàn)已檢測出基因B型、C型及BC混合型及基因亞型BA、CE及CS，未發(fā)現(xiàn)其他基因型及亞型。本次對傈僳族HBV基因型及亞型的調(diào)查結(jié)果與國內(nèi)外基因型、基因亞型地理分布研究結(jié)論基本一致，同時也證實了以往關(guān)于HBV基因型及亞型具有地域分布特征的報道。

簡介：背景與目的5羥色胺5A受體是5羥色胺受體家族中的一個亞型，是主要定位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一種G蛋白偶聯(lián)受體。在對小鼠、大鼠和人MRNA的定位研究顯示5HT5A受體MRNA在腦組織中廣泛表達，但在外周組織的表達很低甚至不表達。5HT5A受體的分布區(qū)域與認知、焦慮的調(diào)節(jié)、感覺的形成、神經(jīng)內(nèi)分泌、運動的整合、晝夜節(jié)律的調(diào)節(jié)及疼痛的調(diào)控有關(guān)。雖然5HT5A受體被發(fā)現(xiàn)已經(jīng)超過10年，但是目前國內(nèi)外少有對5HT5A受體功能的深入研究。這主要是因為缺乏針對5HT5A受體的高選擇性配體和拮抗劑，因此很難界定5HT5A受體在生理和病理過程中所發(fā)揮的作用。因此本實驗構(gòu)建了以5HT5A受體基因為靶標的SIRNA表達載體，并觀察其在大鼠神經(jīng)細胞中的表達，為在動物體內(nèi)進一步研究該受體的功能提供了技術(shù)支持。研究方法1設(shè)計并構(gòu)建了針對5HT5A受體MRNA的3條SIRNA質(zhì)粒表達載體PGENESIL2HTR5AL、PGENESIL2HTR5A2、PGENESIL2HTR5A3和一條無關(guān)對照序列表達載體PGENESIL2HK，同時還構(gòu)建了一條攜帶有5HT5A受體全長基因并同時表達紅色和綠色熒光蛋白的質(zhì)粒表達載體PDSREDEGFPHTR5A。分別將PGENESIL2HTR5AL、PGENESIL2HTR5A2、PGENESIL2HTR5A3、PGENESIL2HK質(zhì)粒表達載體與PDSREDEGFPHTR5A質(zhì)粒表達載體共轉(zhuǎn)染293細胞，48小時后進行流式細胞篩選，通過用RED紅色熒光做對照，EGFP綠色熒光為主要熒光，看干擾序列對EGFP的減弱程度，從而鑒定出相應(yīng)的干擾序列對基因的干擾效果，對EGFP減弱程度越明顯，說明干擾效果越明顯。2將篩選出的PGENESIL2HTR5A2表達載體中的HTR5A2表達框亞克隆至PGENESIL12構(gòu)建PGENESIL12HTR5A2質(zhì)粒表達載體，然后將PGENESIL12HTR5A2與PGSADENO腺病毒表達載體進行同源重組，構(gòu)建PGSADENOHTR5A2重組腺病毒表達載體，將其轉(zhuǎn)染293細胞進行包裝出毒并進一步放大培養(yǎng)以獲得需要的病毒量。將收獲的PGSADENOHTR5A2重組腺病毒轉(zhuǎn)染原代培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)細胞，48小時后用RTPCR技術(shù)檢測各組神經(jīng)細胞內(nèi)5HT5A受體MRNA的表達情況。結(jié)果1經(jīng)酶切鑒定及DNA測序，重組質(zhì)粒中已插入了目的基因片段。經(jīng)流式細胞檢測，通過比較GFP平均熒光強度與RFP平均熒光強度的比值，就能篩選出最有效的序列。其中PGENESIL2HTR5A2的GFP平均熒光強度RFP平均熒光強度的值為039，PGENESIL2HTR5AL的值為0539，PGENESIL2HTR5A3的值為0417，PGENESIL2HK的值為1626，由此可知PGENESIL2HTR5A2能有效抑制5HT5A受體基因的表達。2通過酶切鑒定，證明了目的基因片段正確插入了PGSADENO腺病毒載體中。由于PGSADENOHTR5A2重組腺病毒中有綠色熒光蛋白真核表達框，因此在轉(zhuǎn)染細胞后如果出現(xiàn)明顯的綠色熒光蛋白表達，則說明有感染能力的重組腺病毒包裝成功，而且經(jīng)測定腺病毒滴度達到109PFUML。將PGSADENOHTR5A2重組腺病毒轉(zhuǎn)染神經(jīng)細胞后24小時可以觀察到綠色熒光蛋白的表達，48小時后經(jīng)RTPCR技術(shù)檢測PGSADENOHTR5A2重組腺病毒能有效抑制5HT5A受體MRNA的表達。結(jié)論1成功構(gòu)建了和鑒定了針對5HT5A受體基因的RNA干擾重組質(zhì)粒表達載體PGENESIL2HTR5AL、PGENESIL2HTR5A2、PGENESIL2HTR5A3，并發(fā)現(xiàn)PGENESIL2HTR5A2能有效抑制外源性5HT5A受體基因在293細胞中的表達，從而篩選出最有效的重組質(zhì)粒表達載體，為下一步構(gòu)建針對5HT5A受體基因的SIRNA重組腺病毒表達載體做好了準備。2成功構(gòu)建了和鑒定了針對5HT5A受體基因的SIRNA重組腺病毒表達載體PGSADENOHTR5A2，將其包裝出毒，并且驗證了PGSADENOHTR5A2重組腺病毒能有效抑制內(nèi)源性5HT5A受體基因在神經(jīng)細胞中的表達，為以后的動物試驗提供了技術(shù)支持。

簡介：電子郵件成為網(wǎng)絡(luò)病毒傳播的重要途徑，隱藏在電子郵件中的計算機病毒常常隨著郵件一起傳輸，在一定條件下激活，進行破壞和傳播，輕則占用資源、破壞計算機系統(tǒng)部分功能，重則導(dǎo)致重要數(shù)據(jù)丟失、竊取機密信息、堵塞網(wǎng)絡(luò)，帶來巨大的經(jīng)濟損失。郵件病毒對計算機系統(tǒng)和網(wǎng)絡(luò)安全構(gòu)成威脅，因此郵件系統(tǒng)安全成為一個重要的問題，有效的郵件病毒防護對于郵件系統(tǒng)的安全使用以及網(wǎng)絡(luò)安全至關(guān)重要，本文即致力于研究郵件反病毒網(wǎng)關(guān)技術(shù)。文章分析研究了電子郵件系統(tǒng)的工作原理和郵件協(xié)議的流程特點，探討了電子郵件的結(jié)構(gòu)與郵件的投遞機制，描述了郵件病毒的機理，分析了當前郵件反病毒技術(shù)的原理與特點。隨后設(shè)計了一種郵件反病毒網(wǎng)關(guān)系統(tǒng)，分析了系統(tǒng)的功能需求，對該系統(tǒng)的處理流程和總體結(jié)構(gòu)進行設(shè)計，并對系統(tǒng)進行了模塊劃分，設(shè)計了系統(tǒng)進行郵件病毒過濾的安全策略。然后分析描述系統(tǒng)的郵件協(xié)議與數(shù)據(jù)分析模塊的功能結(jié)構(gòu)，詳細設(shè)計了郵件協(xié)議與數(shù)據(jù)分析模塊的處理過程、子模塊劃分，設(shè)計抽象統(tǒng)一的協(xié)議分析的框架，以及各個協(xié)議的具體命令狀態(tài)碼解析方法。對郵件結(jié)構(gòu)進行探討，引入了郵件結(jié)構(gòu)劃分的方法。其次詳細設(shè)計了郵件病毒過濾模塊，其中重點設(shè)計了反病毒引擎的流程結(jié)構(gòu)、關(guān)鍵掃描算法以及病毒庫的設(shè)計方法，并給出了部分功能的實現(xiàn)方法。提出了系統(tǒng)測試方法，從功能和性能上進行測試，分析了系統(tǒng)的測試數(shù)據(jù)并進行總結(jié)。