蟬花多糖提取工藝優(yōu)化及活性研究.pdf

1、蟬花是一種應用已久的藥用真菌，醫(yī)書古籍中的收錄遠早于冬蟲夏草。蟬花中主要的藥用活性成分有以下幾種：蟲草酸、蟲草多糖、生物堿、蟲草素、腺苷等。然而野生蟬花較為罕見，這局限了蟬花的大規(guī)模應用。本文主要研究蟬花菌絲的液體發(fā)酵條件的優(yōu)化、蟬花菌絲中各種藥用成分的分析、蟬花多糖提取條件的方案改良、蟬花多糖對各種細菌和真菌的抑制作用。主要研究結(jié)果如下：
　　（1）依據(jù)單因素實驗，研究蟬花菌絲在液體發(fā)酵中碳源、氮源、無機鹽和裝液量，并確定蟬花菌

2、絲液體發(fā)酵的最佳條件為：蔗糖3％,酵母提取物1%,磷酸二氫鉀0.15%，硫酸鎂0.07%，裝液量100mL/250mL。該工藝通過搖瓶驗證和發(fā)酵罐反應器放大進行驗證，結(jié)果可靠。
　　（2）綜合單因素實驗、正交優(yōu)化實驗以及響應面優(yōu)化設計的結(jié)果，研究人工發(fā)酵培養(yǎng)所得的蟬花菌絲中提取粗多糖的料液比、預浸泡時間、超聲時間和水提時間，最終擬定蟬花粗多糖提取的最佳條件為：料液比1:22，預浸泡6h，超聲時間43min，水提時間2.2h。

3、>　?。?）純化后的多糖以苯酚-硫酸法進行測定，最終含量約為2.11%；高效液相色譜法對蟬花提取物進行測定，其中腺苷含量約為0.171%，未檢出蟲草素。
　?。?）蟬花多糖不能抑制黑霉菌的生長，而對于幾種常見菌，抑制大腸桿菌和金黃色葡萄球菌生長的效果較為明顯，MIC值都為10mg/mL。
　?。?）掃描電鏡觀察蟬花多糖使細菌表面產(chǎn)生坑洞和破損，并且損毀程度與蟬花多糖的濃度呈正相關(guān)，結(jié)果表明蟬花多糖對細菌的細胞結(jié)構(gòu)有破壞作用。