PHF2在乳腺癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能研究.pdf

1、目的：探討 PHF2在乳腺癌細(xì)胞和乳腺癌組織中的表達(dá)情況及PHF2表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征、預(yù)后及生物學(xué)功能的關(guān)系。
　　方法：采用qPCR法檢測(cè)乳腺癌及正常乳腺上皮細(xì)胞株HBL100，乳腺癌及配對(duì)癌旁組織中PHF2 mRNA的表達(dá)水平；Western blot法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞株中PHF2蛋白的表達(dá)；免疫組化檢測(cè)乳腺癌和癌旁組織中PHF2蛋白的表達(dá)，分析PHF2表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系及預(yù)后的關(guān)系。通過(guò)腺病毒系統(tǒng)上調(diào) PHF

2、2在 MDA-MB-231和 MCF-7中的表達(dá)后，采用CCK8、平板克隆形成、流式細(xì)胞周期測(cè)定、細(xì)胞劃痕、Transwell方法檢測(cè) PHF2上調(diào)對(duì)乳腺癌增殖、細(xì)胞周期、遷移、侵襲能力的影響；進(jìn)一步，通過(guò)對(duì)裸鼠進(jìn)行皮下成瘤，定期瘤內(nèi)注射腺病毒，檢測(cè)PHF2對(duì)乳腺癌增殖的影響。
　　結(jié)果：與正常人乳腺上皮細(xì)胞HBL100比較，PHF2 mRNA和蛋白水平在乳腺癌細(xì)胞株中（(BT549, MDA-MB-231, MDA-MB-468

3、, MCF-7, SK-BR-3, T47D)）表達(dá)下調(diào)（P＜0.01）；與癌旁組織比較，PHF2 mRNA在90％（27/30）的乳腺癌組織中表達(dá)下調(diào)（P＜0.05）；在70%（35/50）的乳腺癌組織中PHF2蛋白表達(dá)下調(diào)（P＜0.05）；不僅如此，PHF2表達(dá)下調(diào)與乳腺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陰性及不良預(yù)后密切相關(guān)（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，上調(diào)PHF2可以抑制乳腺癌細(xì)胞MDA-MB231和 MCF-7的增殖、遷移、侵襲能力（