嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體及其復(fù)合感染的調(diào)查與實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、蜱媒傳染?。═ick-borne infectious diseases）是一類自然疫源性疾病，且多為新發(fā)傳染病，蜱傳病原體種類繁多，涵蓋病毒、立克次體、螺旋體、原蟲、細(xì)菌等。由于傳播媒介、動(dòng)物宿主分布廣泛，蜱媒傳染病易在自然界流行，當(dāng)人進(jìn)入疫源地經(jīng)蜱叮咬就會(huì)被感染、發(fā)病，因而蜱媒傳染病對(duì)從事生產(chǎn)活動(dòng)、經(jīng)濟(jì)建設(shè)以及野營(yíng)旅游等人群威脅很大，疾病暴發(fā)流行時(shí)有發(fā)生。
　　嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體（Anaplasma phagocytophilu

2、m）是一種經(jīng)蜱叮咬傳播的專性、細(xì)胞胞漿內(nèi)寄生菌，能侵染人粒細(xì)胞引起人粒細(xì)胞無(wú)形體病（ Human granulocytic anaplasmosis, HGA）。美國(guó)1994年發(fā)現(xiàn)第一例實(shí)驗(yàn)室確診 HGA病例，隨后該病在美國(guó)流行逐漸嚴(yán)重，至今報(bào)告了約萬(wàn)例HGA病例。歐洲多個(gè)國(guó)家也都有HGA病例報(bào)道，包括荷蘭、法國(guó)、德國(guó)、意大利、丹麥、西班牙、波蘭等。2006年，我國(guó)安徽省出現(xiàn)了人粒細(xì)胞無(wú)形體病聚集性暴發(fā)事件，這也是我國(guó)關(guān)于人粒細(xì)胞無(wú)形體

3、病確診病例的首次報(bào)道。血清流行病學(xué)調(diào)查表明我國(guó)多個(gè)地區(qū)人群都可能存在嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體感染，但由于診斷技術(shù)缺乏及臨床重視程度不夠等原因，臨床確診病例少有報(bào)道，其潛在危害亟待加強(qiáng)調(diào)查研究。國(guó)外研究通過(guò)動(dòng)物模型初步探討了嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體的感染及致病特征，但其具體感染機(jī)制尚不清楚。然而，不同地域來(lái)源的病原體具有不同的遺傳進(jìn)化背景，可能具有不同的致病特征。我國(guó)自然疫源地嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體流行株的感染及致病特征尚不清楚，亟待研究解決。
　　自然

4、疫源地中一種媒介蜱或宿主動(dòng)物可攜帶兩種或兩種以上病原體，使得同一疫源地常常存在多種蜱媒傳染病，人群復(fù)合感染時(shí)有發(fā)生。在媒介蜱，動(dòng)物宿主和暴露人群中，最常見(jiàn)的復(fù)合感染是無(wú)形體與伯氏疏螺旋體，伯氏疏螺旋體與巴貝西蟲，無(wú)形體與巴貝西蟲的復(fù)合感染。本研究團(tuán)隊(duì)前期研究從河南省信陽(yáng)地區(qū)的褐家鼠中發(fā)現(xiàn)了嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體和微小巴貝西蟲的復(fù)合感染。本研究利用已有病原體資源，通過(guò)動(dòng)物模型來(lái)開(kāi)展嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體和微小巴貝西蟲實(shí)驗(yàn)感染研究，探討單獨(dú)感染和復(fù)合感

5、染的病原變化規(guī)律以及感染特征。
　　近年來(lái)，新型布尼亞病毒感染引起的發(fā)熱伴血小板減少綜合征的暴發(fā)流行給我國(guó)國(guó)民健康造成了嚴(yán)重危害，目前已蔓延至二十多個(gè)省份地區(qū)，其中河南省信陽(yáng)地區(qū)是該新發(fā)蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)。然而，蜱能攜帶多種病原體，并且一個(gè)疫源地往往存在多種蜱媒傳染病，因此國(guó)內(nèi)外研究者一直疑惑：該地區(qū)是否存在其它蜱媒傳染?。勘狙芯繄F(tuán)隊(duì)前期研究從河南省信陽(yáng)地區(qū)的宿主動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)了嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體和微小巴貝西蟲復(fù)合感染，證實(shí)當(dāng)?shù)卮嬖谄渌?/p>

6、傳染病原體，間接說(shuō)明當(dāng)?shù)乇┞度巳嚎赡艽嬖谶@些蜱媒傳染病的感染。因此，為進(jìn)一步了解蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)信陽(yáng)地區(qū)的具體情況，本研究調(diào)查了當(dāng)?shù)孛浇轵绾捅┞度巳褐?A. phagocytophilum、B. microti、斑點(diǎn)熱群立克次體（Spotted fever group rickettsiae, SFGR）以及新型布尼亞病毒（SFTSV）感染情況。
　　主要研究結(jié)果：
　　1嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體與微小巴貝西蟲實(shí)驗(yàn)感染研究
　

7、　研究基于前期在河南信陽(yáng)地區(qū)發(fā)現(xiàn)的嚙齒動(dòng)物中A. phagocytophilum和B. microti復(fù)合感染，建立了A. phagocytophilum與B. microti單獨(dú)感染及復(fù)合感染的實(shí)驗(yàn)小鼠模型，探討單獨(dú)感染和復(fù)合感染的病原變化規(guī)律以及感染特征。
　　病原體單獨(dú)感染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，A. phagocytophilum單獨(dú)感染Balb/C鼠在第10天病原載量達(dá)到感染高峰，隨后病原載量逐漸降低，感染可持續(xù)兩個(gè)月至三個(gè)月，B.

8、microti單獨(dú)感染Balb/C鼠在第20天病原載量達(dá)到感染高峰，隨后感染載量快速下降，感染持續(xù)大約三個(gè)月；A. phagocytophilum與B. microti感染均可引起B(yǎng)alb/C鼠脾腫大，急性期最為嚴(yán)重，并隨著病原感染載量降低，脾腫大逐漸恢復(fù)；A. phagocytophilum與B. microti感染均可以引起B(yǎng)alb/C鼠的白細(xì)胞減少、血小板減少，B. microti感染還可引起紅細(xì)胞計(jì)數(shù)減少和血紅蛋白降低。A. p

9、hagocytophilum與B. microti感染急性期均可引起B(yǎng)alb/C鼠脾、肺、肝組織的病理輕度改變，之后隨著病原感染載量降低，病理異常改變亦逐漸恢復(fù)。
　　病原體復(fù)合感染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在復(fù)合感染的情況下，A. phagocytophilum感染載量可長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)維持在高位；在先感染A.phagocytophilum的情況下，B. microti的感染高峰會(huì)提前，且感染載量可增高兩倍以上；復(fù)合感染也能導(dǎo)致Balb/C出現(xiàn)更為嚴(yán)

10、重的脾腫大、血小板減少、紅細(xì)胞減少及血紅蛋白降低等情況；復(fù)合感染Balb/C鼠能同時(shí)表現(xiàn)出A.phagocytophilum和B. microti單獨(dú)感染導(dǎo)致的組織病理變化。
　　2蜱中嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體與其它蜱傳病原體感染調(diào)查
　　本研究于2013年至2015年在河南信陽(yáng)地區(qū)開(kāi)展了媒介蜱中蜱傳病原體感染的流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)貎?yōu)勢(shì)蜱種長(zhǎng)角血蜱中存在 A. phagocytophilum感染，感染率為3.2％，多個(gè)調(diào)查點(diǎn)均

11、存在感染，游離蜱與寄生蜱中 A. phagocytophilum感染率沒(méi)有顯著性差異。結(jié)果還發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)亻L(zhǎng)角血蜱中存在 B. microti、SFGR感染，感染率分別為2.4%和12.8%。寄生蜱中未發(fā)現(xiàn)B. microti感染，這可能因?yàn)锽. microti的主要宿主動(dòng)物是嚙齒類動(dòng)物，而羊、犬則極少感染B. microti。蜱中SFGR感染率遠(yuǎn)高于A. phagocytophilum和B. microti，主要原因可能是SFGR能經(jīng)卵傳播

12、，而A. phagocytophilum和B. microti則無(wú)法經(jīng)卵傳播。同時(shí)，研究還調(diào)查了SFTSV感染情況，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)角血蜱的感染率也相對(duì)較高，但感染率在不同調(diào)查點(diǎn)差別較大。
　　本研究還發(fā)現(xiàn)蜱中蜱傳病原體復(fù)合感染情況，包括A. phagocytophilum與B. microti復(fù)合感染、A. phagocytophilum與斑點(diǎn)熱群立克次體復(fù)合感染、斑點(diǎn)熱立克次體與 B. microti復(fù)合感染。
　　3人群中嗜吞噬

13、細(xì)胞無(wú)形體與其它蜱傳病原體感染調(diào)查
　　本研究以有疫源地暴露史且出現(xiàn)發(fā)熱癥狀病人為研究對(duì)象，在排除新型布尼亞病毒感染后，通過(guò)血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)17例A. phagocytophilum現(xiàn)癥感染病人，11例B. microti現(xiàn)癥感染病人，以及29例斑點(diǎn)熱群立克次體現(xiàn)癥感染病人，同時(shí)，還發(fā)現(xiàn)12例A. phagocytophilum既往感染病人，18例B. microti既往感染病人，以及11例斑點(diǎn)熱群立克次體既往感染病人。進(jìn)一步核酸

14、篩查和序列分析發(fā)現(xiàn)了人群中存在多種斑點(diǎn)熱群立克次體感染，基于ompA和gltA的序列分析提示可能存在兩個(gè)斑點(diǎn)熱群立克次體新種：Rickettsia sp. XY99和Rickettsia sp. XY118。
　　通過(guò)臨床資料分析發(fā)現(xiàn)A. phagocytophilum、B. microti、以及SFGR感染病人的臨床表現(xiàn)較為相似，稍有不同之處是少部分斑點(diǎn)熱群立克次體感染病人會(huì)出現(xiàn)斑疹、焦痂癥狀。臨床表現(xiàn)相似性可能與病人納入存在偏

15、倚相關(guān)。本研究的哨點(diǎn)醫(yī)院為信陽(yáng)154醫(yī)院，該醫(yī)院感染科診治病人多為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病人，雖然本研究排除了新型布尼亞病毒感染病人，但病人均為疑似發(fā)熱伴血小板減少綜合征，因而在臨床表現(xiàn)上會(huì)有相似性。本研究還詳細(xì)描述了兩種新發(fā)現(xiàn)斑點(diǎn)熱群立克次體Rickettsia sp. XY99和Rickettsia sp. XY118感染的臨床特征。
　　主要結(jié)論：
　　通過(guò)實(shí)驗(yàn)感染研究揭示了嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體與微小巴貝西蟲感染的病原變化

16、規(guī)律以及感染致病特征，同時(shí)通過(guò)構(gòu)建復(fù)合感染動(dòng)物模型，探討了復(fù)合感染的病原變化規(guī)律以及感染致病特征，研究結(jié)果表明復(fù)合感染可以造成疾病進(jìn)展復(fù)雜化，并可能產(chǎn)生更為嚴(yán)重的疾病表現(xiàn)，進(jìn)一步提示臨床上應(yīng)重視蜱傳病原體復(fù)合感染。
　　通過(guò)流行病學(xué)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，初步弄清楚了我國(guó)蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)信陽(yáng)地區(qū)的媒介蜱中蜱傳病原體感染情況，一是確認(rèn)當(dāng)?shù)卮嬖谑韧淌杉?xì)胞無(wú)形體以及微小巴貝西蟲、斑點(diǎn)熱群立克次體，二是發(fā)現(xiàn)媒介蜱中存在蜱傳病原體復(fù)合感染，研究結(jié)果提示當(dāng)

17、地蜱暴露人群或發(fā)熱伴血小板減少綜合征疑似病例可能會(huì)感染這些蜱媒傳染病，臨床上必須加強(qiáng)重視并開(kāi)展鑒別診斷及針對(duì)治療。
　　通過(guò)血清流行學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)信陽(yáng)地區(qū)存在嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體感染病例，也發(fā)現(xiàn)存在微小巴貝西蟲及斑點(diǎn)熱群立克次體感染病例，并且當(dāng)?shù)剡@三種疾病的臨床表現(xiàn)較為相似。研究結(jié)果表明，在蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)信陽(yáng)地區(qū)，除已知的新型布尼亞病毒外，還存在多種蜱媒傳染病：人粒細(xì)胞無(wú)形體病、人巴貝西蟲病及斑點(diǎn)熱。由于臨床上這些蜱媒傳染病的臨床表現(xiàn)

18、較為相似且有效治療策略不同，因而有必要對(duì)病人進(jìn)行鑒別診斷，開(kāi)展針對(duì)性治療，提高療效及預(yù)后。此外，血清學(xué)調(diào)查還發(fā)現(xiàn)了蜱媒傳染病復(fù)合感染情況，包括嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體與微小巴貝西蟲復(fù)合感染、嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體與斑點(diǎn)熱群立克次體復(fù)合感染、斑點(diǎn)熱立克次體與微小巴貝西蟲復(fù)合感染。其中1例病人為嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體與微小巴貝西蟲的急性期復(fù)合感染，研究描述展示了其疾病進(jìn)展情況。由于前期研究提示這兩種病原體的復(fù)合感染會(huì)使病情復(fù)雜化，因而，臨床上需重視嗜吞噬細(xì)胞無(wú)