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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討IL-37通過(guò)促進(jìn)巨噬細(xì)胞M2型極化在H/R誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷中的保護(hù)作用及其相關(guān)分子機(jī)制。
方法:
實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)IL-37 mRNA和蛋白在不同極化類型的人單核巨噬細(xì)胞THP-1中的表達(dá)情況。通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染構(gòu)建穩(wěn)定過(guò)表達(dá)IL-37的細(xì)胞株,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)CD206和CD86 mRNA表達(dá)情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD163、CD86蛋白表達(dá)情況。通過(guò)tran
2、swell法將THP-1細(xì)胞與人肝細(xì)胞LO2細(xì)胞共培養(yǎng)并構(gòu)建H/R模型,CCK-8法及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)LO2細(xì)胞存活率及凋亡率,ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中ALT和AST含量,HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化。Western blot檢測(cè)THP-1細(xì)胞中STAT6及其磷酸化蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
M2型巨噬細(xì)胞中IL-37 mRNA及蛋白表達(dá)上調(diào)。IL-37促進(jìn)巨噬細(xì)胞M2型極化。IL-37誘導(dǎo)的M2型巨噬細(xì)胞與LO2細(xì)胞共培養(yǎng)
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