MBD2缺失通過減少M(fèi)2型巨噬細(xì)胞的極化保護(hù)博來霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化.pdf

1、特發(fā)性肺纖維化(IPF)是慢性進(jìn)行性肺疾病，以肺間質(zhì)與肺泡腔內(nèi)纖維化和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)混合存在為病理特征，會(huì)導(dǎo)致過度的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)累積，并最終造成呼吸衰竭。盡管已經(jīng)確認(rèn)遺傳因素與環(huán)境因素是其危險(xiǎn)因素，但具體病因與致病機(jī)制還不清楚。表觀遺傳學(xué)是與DNA序列無關(guān)的基因表達(dá)可遺傳變化，DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學(xué)機(jī)制，其改變通常發(fā)生于機(jī)體對(duì)外界環(huán)境作出反應(yīng)時(shí)調(diào)控基因表達(dá)。DNA甲基化組的改變通過一種保守的甲基-CpG-結(jié)合域(MBD

2、)蛋白家族解讀，如 MBD2，其與甲基化 DNA的結(jié)合能力最強(qiáng)。
　　目的：探討MBD2在肺纖維化中的作用及其可能的機(jī)制。
　　方法：在人體組織中運(yùn)用免疫熒光檢測(cè)IPF患者的支氣管肺泡灌洗液(BALF)中MBD2的表達(dá)。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中以氣道滴注博來霉素(BLM)的方法建立肺纖維化模型。WT小鼠與MBD2-/-小鼠隨機(jī)分為四組：WT小鼠+生理鹽水組，WT小鼠+BLM組，MBD2-/-小鼠+生理鹽水組，MBD2-/-小鼠+BLM組

3、。用HE，天狼星紅與Masson染色評(píng)價(jià)肺損傷與纖維化程度。qPCR和Western Blot分別檢測(cè)野生型小鼠和MBD2-/-小鼠中MBD2的表達(dá)。qPCR與Western Blot檢測(cè)肺組織中collagen I， fibronectin，TGF-β1，F(xiàn)IZZ1，CD206，Arg-1，SOCS1與 SOCS3的表達(dá)量。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，提取WT小鼠與MBD2-/-小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞，IL-4或PBS分別刺激24小時(shí)，qPCR檢測(cè)刺激前

4、后FIZZ1，CCL17，SOCS1與SOCS3的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：IPF患者的BALF中，MBD2高表達(dá)于浸潤(rùn)的M2型巨噬細(xì)胞。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn) MBD2在肺纖維化模型中明顯升高，組織學(xué)分析顯示 BLM處理組中MBD2-/-小鼠的肺損傷與纖維化程度輕于 WT小鼠；MBD2-/-小鼠肺組織中collagen I，fibronectin，TGF-β1，F(xiàn)IZZ1，CD206，Arg-1的表達(dá)水平低于WT小鼠，而SOCS1與SOC