龍須菜活性多糖提取、分離純化、結(jié)構(gòu)及其活性的研究.pdf

1、本文首次以免疫活性為篩選指標(biāo)、用凍溶除膠法分離活性多糖，運(yùn)用化學(xué)和色譜雙重分析方法系統(tǒng)深入地研究了龍須菜(Gracilaria lemaneiformis)活性多糖的提取優(yōu)化、分離純化以及粗多糖和均一多糖的化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)和活性。研究結(jié)果表明： 1、通過(guò)凍溶法得到龍須菜膠體多糖(NGF)和非膠體多糖(SGF)，其中SGF的溶出率和多糖含量均顯著高于NGF，但NGF的免疫活性極顯著高于SGF(P<0.01)； 2、不同提取水

2、溫對(duì)龍須菜非膠體粗多糖的得率影響顯著(n=24，P<0.01)，50℃水溫提取時(shí)，龍須菜非膠體粗多糖的得率最高9.11±0.31％，蛋白含量最低僅為4.38±0.13％，當(dāng)提取水溫超過(guò)60℃時(shí)，非膠體粗多糖的得率顯著下降；龍須菜非膠體粗多糖均表現(xiàn)出顯著的體外免疫活性，其中50℃提取水溫組的活性顯著高于其它各溫度組，各組沒(méi)有表現(xiàn)出抗HSV-I型和II型病毒活性；各組非膠體粗多糖的3，6內(nèi)醚半乳糖含量在15-20％之間，而半乳糖的含量則在3

3、0-40％之間，其中內(nèi)醚半乳糖和半乳糖之和占已知總糖的90％以上，50℃提取水溫組硫酸基含量略高于其它組。 3、對(duì)50℃水溫提取條件進(jìn)行了優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)提取次數(shù)對(duì)溶出率有著較大的影響，提取3次得率最高為13.63％，提取1次僅為7.63％，但提取次數(shù)、料水比和提取時(shí)間對(duì)非膠體粗多糖的多糖含量、蛋白含量、免疫活性均無(wú)顯著影響，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)和結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)能耗因素，確定最佳提取工藝為：提取水溫為50℃，料水比為1:40(質(zhì)量比)，提取2次

4、，每次浸提3小時(shí)。 4、用離子色譜法對(duì)NGF進(jìn)行分離得到鹽相(NGFS)和水相(NGFW)，NGFS的得率、3，6內(nèi)醚半乳糖和半乳糖含量分別為：51.10±4.10％、27.83±0.23％和62.10±1.88％顯著高于水相的0.60±0.13％、17.98±0.23％和29.31±0.34％(P<0.01)，水相的多糖種類、多糖含量、蛋白含量和免疫活性要高于鹽相：從得率和純度兩方面考慮選擇NGFS繼續(xù)研究。 5、NG