不同時間灌服氫氯噻嗪對大鼠血壓與內皮源性血管活性物質晝夜節(jié)律的影響.pdf

1、目的：血壓是血管內流動的血液對單位面積血管壁的側壓力，是保證組織器官血液灌注，滿足機體代謝需要，進而維持機體生命的前提。它受心臟每搏輸出量、心率、外周阻力等多種因素的影響，并且隨著這些因素的變化不斷波動。多數(shù)情況下，這種波動不是隨機的，而是呈現(xiàn)出一定的節(jié)律。因其節(jié)律周期大約為24小時，故稱之為晝夜節(jié)律(diurnalrhythm)或近日節(jié)律(circadian rhythm)。根據(jù)血壓的晝夜波動情況可將其分為四型：①杓型(dippers

2、)：即夜間血壓較日間下降10％～20％；②非杓型(non-dippers)：夜間血壓下降0％～10％；③超杓型或深杓型(over-dippers或extreme-dippers)：夜間下降＞20％；④反杓型(reverse-dippers、)：夜間血壓水平高于日間者。一般認為，晝高夜低的杓型血壓對于人類是相對健康的。在高血壓患者、老年人、甚至部分健康人群中，其血壓的晝夜節(jié)律特征可能有所改變。眾所周知，隨著血壓水平的上升，靶器官損害及心腦

3、血管事件發(fā)生率顯著升高。但在血壓整體水平相似的情況下，當其晝夜節(jié)律減弱或消失時，發(fā)生靶器官損害及心腦血管事件的危險性亦明顯增加。因此，在降壓治療的同時維持血壓杓型分布，對減少靶器官損害、降低心腦血管事件的發(fā)生率具有重要臨床意義。雖然積極有效的非藥物治療(如調整飲食結構、減輕體重、改善生方式等)是降壓治療的基石，但目前血壓的控制仍主要依賴于降壓藥物。不同降壓機制與不同用藥時間均可能會影響藥物對血壓及其晝夜節(jié)律的調節(jié)。充分了解不同降壓藥物與

4、不同用藥時間對血壓晝夜節(jié)律的影響，有利于糾正異常的血壓節(jié)律，維持其正常節(jié)律。雖然目前關于血壓晝夜節(jié)律的形成機制尚不完全清楚，但國內外部分學者已證實內皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等內皮源性血管活性物質的血漿濃度或活性存在典型的晝夜節(jié)律，并在調節(jié)血壓及其晝夜節(jié)律方面起著非常重要的作用。不同降壓藥物與不同用藥時間對內皮源性血管活性物質的時間生物學特征及血壓晝夜節(jié)律的影響尚有待深入探討。本研究以大鼠為實驗對象進

5、行了研究，旨在探討血壓及上述內皮源性血管活性物質的晝夜節(jié)律特征及氫氯噻嗪與不同用藥時間對其活性水平及晝夜節(jié)律的影響。 方法：清潔級健康雄性SD大鼠128只，10周齡，體重250-300克，隨機分為四大組：早07:00灌藥組(MT)，晚19:00灌藥組(NT)，早對照組(MC)和晚對照組(NC)。灌藥組給予氫氯噻嗪10mg/Kg/日，對照組分別于早07:00或晚19:00灌等體積安慰劑(蒸餾水)。每大組各32只。每大組又分4小組，

6、每小組各8只。按上述方案飼養(yǎng)喂藥4周后，分別于同日24小時內不同時間點(02:00、08:00、14:00、20:00)用鼠尾測壓計測各組大鼠血壓并處死MT組、NT組、MC組、NC組中的各一小組大鼠。分別檢測大鼠血及心肌組織中NO、eNOS、ET-1的濃度或活性以及心肌組織eNOSmRNA的表達水平。應用余弦擬合法分析四組實驗動物血清及心肌組織中各指標含量或活性的時間生物學特征，采用零振幅檢驗(zeroamplitude test)評價

7、各檢測指標的晝夜節(jié)律是否確實存在，應用方差分析法比較各均值之間差異的顯著性，p＜0.05視為有統(tǒng)計學顯著性差異。 結果：1經(jīng)方差分析顯示，給藥組(MT組與NT組)血及心肌組織中NO含量、eNOS活性、心肌eNOSmRNA表達的平均水平均顯著高于對照組(MC組與NC組)(P＜0.05)，ET-1含量顯著低于對照組(P＜0.05)，而在MT組與NT組間及MC組與NC組間上述血管活性物質水平無顯著差異(P＞0.05)。提示氫氯噻嗪可影

8、響正常大鼠的ET-1、NO、eNOS、eNOSmRNA表達。2對四組大鼠血及心肌ET-1、NO、eNOS、心肌eNOSmRNA結果應用最小二乘法進行余弦擬合，得出各自的擬合曲線及特征值。經(jīng)零振幅檢驗示，血及心肌中各測量值均呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律變化。MC組、NC組、MT組、NT組血心肌組織中ET-1峰值時間分別位于22:28、22:27、21:02、21:33與01:49、02:13、00:34、01:12，NO峰值時間分別位于10:40、

9、10:26、08:53、09:27與14:33、15:03、13:10、13:33，eNOS峰值時間分別位于07:51、08:40、05:56、06:40與12:37、12:26、09:45、10:23，心肌eNOSmRNA表達最高水平出現(xiàn)于11:35、11:54、08:37、08:58左右。與對照組相比，NO含量、eNOS活性、eNOSmRNA表達水平在給藥組的峰值及振幅較大，ET-1含量的峰值及振幅較小，上述各指標的峰值出現(xiàn)時間均有

10、所提前。在MT組與NT組間及MC組與NC組間，上述各指標的峰值、振幅、峰值時間均無明顯差異。提示氫氯噻嗪可影響正常大鼠上述各指標的峰值及振幅，并可使其達峰時間提前，且與用藥時間無關。3方差分析顯示，給藥組血壓平均水平顯著低于對照組(P＜0.05)，而在MT組與NT組間及MC組與NC組間無顯著差異(P＞0.05)，提示不同用藥時間對氫氯噻嗪的降壓作用無顯著影響。4對MC、NC、MT、NT四組大鼠血壓結果應用最小二乘法進行余弦擬合，并經(jīng)零振

11、幅檢驗示，四組大鼠血壓呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律變化，其峰值出現(xiàn)在20:40、21:10、19:28、20:05。與對照組相比，給藥組峰值及振幅顯著降低，峰值出現(xiàn)時間有所提前，而在MC組與NC組間及MT組與NT組間上述指標均無明顯差異。 結論：1四組大鼠血壓及血和(或)心肌組織中NO、eNOS、ET-1、eNOSmRNA水平均呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律。2不同時間灌服氫氯噻嗪后，大鼠血壓及血和心肌組織中ET-1含量顯著降低，血、心肌組織中NO、