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文檔簡介
1、研究目的:
檢測健康成年女性外周血T細(xì)胞與不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)后的MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞上清共培養(yǎng)后,T細(xì)胞亞群(CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg)的分布改變;探究白術(shù)內(nèi)酯I是否可以下調(diào)MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制作用。
研究方法:
不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞,獲得培養(yǎng)上清后,與健康成年女性外周血分離的T細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí),用
2、流式細(xì)胞儀測定T細(xì)胞亞群CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg百分比,并計(jì)算CD4+/ CD8+比值。
研究結(jié)果:
1、SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的CD3+CD4+表達(dá)(40.453±0.270)低于正常T細(xì)胞組(48.247±0.385),而 CD3+CD8+表達(dá)(30.233±0.258)高于正常 T細(xì)胞組(26.580±0.295),其 CD4+/CD8+比值(1.338±0.016)顯著低于正常
3、T細(xì)胞組(1.815±0.029),且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);SKOV-3細(xì)胞上清處理 T細(xì)胞組的Foxp3表達(dá)(10.260±0.782)明顯高于正常T細(xì)胞組(7.340±0.458),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
2、不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的CD4+/ CD8+比值,100umol/L(1.742±0.063)、50umol/L(1.434±0.032)、10umol/L(
4、1.358±0.018)均高于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(1.338±0.016),且白術(shù)內(nèi)酯I的濃度越高,比值越高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的Foxp3表達(dá),100umol/L(2.667±0.180)、50umol/L(3.547±0.309)、10umol/L(4.573±0.191)均低于SKOV-3細(xì)胞組(10.260±0.782),且白術(shù)內(nèi)酯I的濃度越高,
5、Foxp3值越低;差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
3、LPS誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的CD3+CD8+表達(dá)(33.573±0.828)高于 SKOV-3細(xì)胞上清處理 T細(xì)胞組(30.233±0.258),而 CD3+CD4+表達(dá)(29.740±0.675)低于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(40.453±0.270),CD4+/ CD8+值(0.890±0.028)也明顯低于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(
6、1.338±0.016),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);LPS誘導(dǎo) SKOV-3細(xì)胞上清處理 T細(xì)胞組的 Foxp3值(10.807±0.430)高于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(10.260±0.782),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1. MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞培養(yǎng)上清內(nèi),存在大量免疫抑制因子,其上清處理T細(xì)胞后,能夠抑制 CD3+CD4+T細(xì)胞表達(dá),相對增加CD3+CD8+T
7、細(xì)胞表達(dá),從而降低CD4+/CD8+比值,并促進(jìn)Treg表達(dá),使機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài);而LPS可以促進(jìn)其免疫抑制作用;
2.白術(shù)內(nèi)酯 I可能通過阻斷 TLR4/MyD88通路,在一定濃度范圍內(nèi),以濃度依賴方式,下調(diào)MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞分泌的免疫抑制因子,從而促進(jìn)T細(xì)胞亞群CD3+CD4+表達(dá),增加其分布百分比,相對抑制CD3+CD8+表達(dá),減少其分布百分比,從而升高CD4+/CD8+比值,激發(fā)機(jī)體免疫功能;抑制
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