糖尿病腎病腎小球細(xì)胞間相互作用—系膜細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相互作用的分子機(jī)制.pdf

1、目的:(1)人腎小球系膜細(xì)胞的原代培養(yǎng).(2)探討高糖對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的影響及在高糖環(huán)境下兩種細(xì)胞的相互作用.(3)研究茶多酚對(duì)糖尿病腎病的防治作用.方法:(1)按Mackay改良方法培養(yǎng)和鑒定人腎小球系膜細(xì)胞.(2)采用雙層共同培養(yǎng)法建立系膜細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞相互作用研究模型,分為空白對(duì)照組、高糖組、茶多酚干預(yù)組、茶多酚對(duì)照組,并與兩種細(xì)胞分別單獨(dú)培養(yǎng)進(jìn)行比較,培養(yǎng)0、12、36小時(shí)后,用分光光度比色法、放射免疫法及RT-

2、PCR方法觀察超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、Ⅳ型膠原和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β<,1>(TGF-β<,1>)的表達(dá)情況.結(jié)論:(1)培養(yǎng)的細(xì)胞為人腎小球系膜細(xì)胞.(2)建立系膜細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞雙層共同培養(yǎng)模型,與普通單層單獨(dú)培養(yǎng)相比可以更好地反映糖尿病腎病時(shí)腎小球內(nèi)部的病理生理過程.(3)高糖可使腎小球系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞SOD活性下降、MDA含量、Ⅳ型膠原分泌增加并使TGF-β<,1>mRNA表達(dá)增加.(4)在正常培養(yǎng)條件下