龍血竭及其成分龍血素B鎮(zhèn)痛機(jī)理的研究.pdf

1、傣藥龍血竭是一味傳統(tǒng)藥物，兼有活血化瘀和收斂止血之功效，并且具有明顯的鎮(zhèn)痛和抗炎作用，在臨床上應(yīng)用極為廣泛，近幾年來，本實(shí)驗(yàn)小組對(duì)龍血竭的鎮(zhèn)痛機(jī)理做了較多的研究，通過膜片鉗技術(shù)在大鼠初級(jí)感覺神經(jīng)元(包括DRG和TG神經(jīng)元)上研究了龍血竭對(duì)TTX-S和TTX-R鈉通道電流及辣椒素受體電流的影響。另外，還采用細(xì)胞外微電極記錄技術(shù)，研究了龍血竭及其成分對(duì)大鼠脊髓背角廣動(dòng)力范圍神經(jīng)元誘發(fā)放電的影響，以上研究結(jié)果說明了龍血竭從不同水平、不同機(jī)制調(diào)

2、制痛覺信息的中樞傳入，從而達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。龍血竭對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞上鈉通道的調(diào)制以及龍血竭抑制大鼠脊髓背角廣動(dòng)力范圍神經(jīng)元的誘發(fā)放電頻率的結(jié)果表明，龍血竭能夠通過中樞和外周對(duì)痛覺信息進(jìn)行調(diào)制，但缺少對(duì)龍血竭鎮(zhèn)痛活性類型的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。之前的研究提出了龍血竭通過干預(yù)痛覺信息阻滯神經(jīng)傳導(dǎo)發(fā)揮其鎮(zhèn)痛效應(yīng)，而DRG細(xì)胞胞體軸突的一個(gè)分支與外周坐骨神經(jīng)相連，若能對(duì)坐骨神經(jīng)部分進(jìn)行相應(yīng)的研究，則龍血竭阻滯神經(jīng)信息的傳導(dǎo)就更具有說服力。
　　

3、 因此，本文首先對(duì)小鼠進(jìn)行一系列的藥理實(shí)驗(yàn)，主要采用熱板法、熱輻射法和扭體法，來判定龍血竭的鎮(zhèn)痛活性類型，通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，0.5g/L的龍血竭在熱板法和光熱輻射甩尾法實(shí)驗(yàn)中，能顯著延長小鼠的舔足潛伏期和甩尾潛伏期；在小鼠扭體法實(shí)驗(yàn)中，則能顯著減小15min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，龍血竭既有良好的中樞鎮(zhèn)痛活性，也具有良好的外周鎮(zhèn)痛活性。
　　 其次，為驗(yàn)證龍血竭產(chǎn)生鎮(zhèn)痛效應(yīng)的藥理機(jī)制，本文將制作牛蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本，觀察龍

4、血竭對(duì)坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位的影響。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，0.5g/L的龍血竭使得牛蛙坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位幅值降低，神經(jīng)興奮不應(yīng)期延長和興奮傳導(dǎo)速度減慢，這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步確定了龍血竭阻滯神經(jīng)傳導(dǎo)的功能，也更進(jìn)一步證實(shí)了龍血竭對(duì)痛覺信息傳導(dǎo)的干預(yù)作用。
　　 另外，通過膜片鉗實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，龍血竭及其主要成分龍血素B對(duì)與疼痛傳遞密切相關(guān)的鈉通道和辣椒素受體均有調(diào)制作用，據(jù)已有文獻(xiàn)報(bào)道，辣椒素能夠調(diào)制電壓門控鈉通道，抑制鈉電流，并且這種調(diào)制作用與

5、辣椒素受體有關(guān)，由于龍血素B與辣椒素具有相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，而龍血素B對(duì)鈉通道電流也具有抑制作用，由此推測龍血素B對(duì)鈉通道電流的影響也很可能與辣椒素受體有關(guān)。弄清上述問題將使所得研究結(jié)果更具有價(jià)值，根據(jù)以上分析，本文設(shè)計(jì)以下膜片鉗實(shí)驗(yàn)對(duì)龍血竭及其成分龍血素B的鎮(zhèn)痛機(jī)理進(jìn)行深入研究。
　　 基于龍血素B在調(diào)制辣椒素受體和鈉通道上與辣椒素的相似性。本文最后采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，在DRG細(xì)胞上進(jìn)行龍血素B調(diào)制鈉通道與辣椒素受體的關(guān)系研究，

6、并探討龍血素B和辣椒素的相互作用關(guān)系。通過實(shí)驗(yàn)得到以下結(jié)果：
　　 1、龍血素B和辣椒素的組合對(duì)鈉電流的抑制率比各自單獨(dú)作用時(shí)要高。
　　 2、龍血素B和辣椒素共同作用時(shí)，當(dāng)固定其中任何一種藥物的濃度，而改變另一種藥物的濃度時(shí)，激活曲線向去極化方向偏移的程度和加速鈉通道失活的程度都會(huì)隨著這種藥物濃度的增大而減小。
　　 3、通過藥物相互作用分析得出龍血素B和辣椒素調(diào)制鈉通道時(shí)具有拮抗作用。以上結(jié)果也表明龍血素B對(duì)