白血病和消化道腫瘤中ing4和fp248基因表達(dá)檢測(cè)的臨床意義.pdf

1、目的： 研究ing 4和fp248的表達(dá)與消化道腫瘤和白血病的關(guān)系，為消化道腫瘤和白血病的診斷尋找新的指標(biāo)。 方法： 采用RT-PCR和real-time RT-PCR技術(shù)研究細(xì)胞株((成人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(hBM-MSC)、胃腺癌細(xì)胞株(SGC-7901)、結(jié)腸腺癌細(xì)胞株(SW480)、髓系白血病細(xì)胞株(U937)等)和白血病患者骨髓或外周血以及胃癌等部分腫瘤組織中ing4和FP248基因表達(dá)水平；采用RT-PC

2、R和巢式PCR(nested RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)消化道腫瘤患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中ing4和fp248基因表達(dá)，并采用巢式PCR擴(kuò)增ALL、AML、CML白血病標(biāo)本中ING4的第四和第五外顯子接頭附近c(diǎn)DNA和基因組DNA，并對(duì)其產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；采用Western blot技術(shù)和免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)研究消化道腫瘤組織、白血病患者骨髓或外周血中ING4蛋白質(zhì)表達(dá)水平；采用Western印跡技術(shù)研究白

3、血病患者骨髓或外周血中ING4的蛋質(zhì)表達(dá)水平。 結(jié)果： ING4基因在SGC、SW480、PC3細(xì)胞株中未見表達(dá)，在hBM-MMSC中表達(dá)較弱，ALL、AML、CML白血病患者骨髓及外周血中ING4的表達(dá)均低于健康對(duì)照組，76.6％(23/30)胃癌組織、83.3％(5/6)直腸癌組織、100％(7/7)結(jié)腸癌組織中ing4基因表達(dá)下調(diào)，分化較好的癌組織中ing4基因表達(dá)水平高于分化較差的癌組織，兩年內(nèi)復(fù)發(fā)的胃癌、結(jié)腸癌

4、和直腸癌患者癌組織中ing4基因表達(dá)水平低于未復(fù)發(fā)者；在食道癌組織中未能檢測(cè)到ing4表達(dá)，但在癌旁組織中呈陽性。在白血病骨髓單個(gè)核細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn)ing4基因第4和第5外顯子接頭處突變。Western blot結(jié)果顯示，ING4在ALL、AML、CML白血病患者骨髓和外周血以及胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、食道癌中含量較低，免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，胃癌組織中ING4表達(dá)低于癌旁組織。采用RT-PCR研究ing4基因在結(jié)腸癌、直腸癌和胃癌患者外周血單

5、個(gè)核細(xì)胞中表達(dá)水平，結(jié)果患者未見陽性表達(dá)，而健康對(duì)照組中ing4基因呈陽性。SGC細(xì)胞株高表達(dá)FP248基因，但A549和PLA801-95D細(xì)胞株中fp248基因表達(dá)水平很低，U937和SW480細(xì)胞株中fp248基因未見表達(dá)；RT-PCR和real-time RT-PCR結(jié)果顯示，ALL、AML、CML白血病患者骨髓及外周血中FP248基因的表達(dá)水平高于健康對(duì)照組，83.3％(25/30)的胃癌組織、100％(6/6)的直腸癌組織、

6、85.7％(6/7)結(jié)腸癌組織中FP248基因的表達(dá)高于癌旁組織，表達(dá)水平與癌組織分化程度及患者預(yù)后顯著相關(guān)。胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌患者手術(shù)前外周血單個(gè)核細(xì)胞中FP248基因陽性率分別為66.7％、71.4％和100％，手術(shù)l周后陽性率分別為80％、85.7％和100％，根據(jù)nested RT-PCR結(jié)果將患者分成兩組：陽性組和陰性組，陽性組復(fù)發(fā)率高于陰性組。 結(jié)論： ing4基因和fp248基因可能與消化道腫瘤和白血病的