PAX2在單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎小管間質(zhì)纖維化中的作用.pdf

1、目的:通過檢測全長配對盒基因2(pairedbox2，PAX2)和α-平滑肌肌動蛋白(α-smoothmuscleactin，α-SMA)在單側(cè)輸尿管梗阻(unilateralureteralobstruction，UUO)大鼠腎臟組織中的表達(dá)，初步探討PAX2在腎小管間質(zhì)纖維化(renaltubulointerstitialfibrosis，RIF)中的作用機(jī)制。 方法： 48只雄性6周齡Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組

2、和對照組，每組24只。模型組在無菌條件下左側(cè)背部肋下切口行左側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)，對照組只探及腎包膜，不結(jié)扎輸尿管。于造模后第7、14、21、28天各處死大鼠6只，取左側(cè)腎臟組織做HE和Masson染色觀察腎臟病理改變，計算腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)。采用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,RQ-RTPCR)方法檢測腎臟組織PA

3、X2mRNA表達(dá)，免疫組織化學(xué)方法檢測腎臟組織纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)、IV型膠原(collagen-IV，Col-IV)、α-SMA和PAX2的蛋白表達(dá)。 結(jié)果： (1)病理結(jié)果顯示：對照組大鼠各時間點腎小管及間質(zhì)均無明顯變化。與對照組比較，模型組大鼠各時間點腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)均顯著增高(P<0.05)，梗阻時間越長，腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)越高。 (2)與對照組比較，模型組大鼠各時間點腎臟組

4、織FN及Col-IV的蛋白表達(dá)均顯著增高(P<0.01)，梗阻時間越長，F(xiàn)N及Col-IV的蛋白表達(dá)越高，于第28天表達(dá)最高。 (3)對照組大鼠在腎血管平滑肌肌層有α-SMA蛋白表達(dá)，偶在腎小管間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)。模型組大鼠除在腎血管平滑肌肌層有α-SMA蛋白表達(dá)外，主要在腎小管基底膜側(cè)和腎間質(zhì)細(xì)胞胞漿中表達(dá)。與對照組比較，模型組大鼠各時間點腎臟組織α-SMA的蛋白表達(dá)均顯著增高(P<0.01)，梗阻時間越長，α-SMA的蛋白表達(dá)越高

5、，于第28天表達(dá)最高。 (4)對照組大鼠腎臟組織僅有少量PAX2mRNA表達(dá)，腎小管上皮細(xì)胞未見PAX2蛋白表達(dá)，偶在腎小球囊細(xì)胞內(nèi)有微量PAX2蛋白表達(dá)。與對照組比較，模型組大鼠各時間點PAX2的mRNA及其蛋白表達(dá)均顯著增高(P<0.01)，梗阻時間越長，腎臟組織PAX2的mRNA及其蛋白表達(dá)越高，于第28天表達(dá)最高。 (5)直線相關(guān)分析顯示：模型組大鼠腎小管上皮細(xì)胞PAX2的蛋白表達(dá)與腎間質(zhì)的α-SMA、FN及Co

6、l-IV的蛋白表達(dá)均呈顯著正相關(guān)(r=0.880，0.67，0.75，均P<0.05)，PAX2、α-SMA的蛋白表達(dá)均與腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)呈顯著正相關(guān)(r=0.886，0.918，均P<0.05)。 結(jié)論： UUO所致RIF大鼠腎臟組織PAX2的mRNA及其蛋白表達(dá)顯著增高，可能參與了腎小管上皮細(xì)胞-肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(tubularepithelial-myofibroblasttransdifferentiati