脂聯(lián)素對高糖環(huán)境下腎小球系膜細胞增殖及TGF-β-,1-、ICAM-1表達的影響.pdf

1、研究背景：糖尿病的并發(fā)癥-糖尿病腎病(Diabetic Nephropathy，DN)是糖尿病病人主要死亡原因之一，嚴重威脅著糖尿病患者的生命。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和細胞間粘附分子-1(ICAM-1)在DN的發(fā)生發(fā)展中起主要作用，脂聯(lián)素(ADPN)是近年來發(fā)現(xiàn)的有多種生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)，但ADPN在腎臟中的作用尚不明確。因此，本實驗利用體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細胞，研究高糖和ADPN對腎小球系膜細胞TGF-β1和ICAM-

2、1表達的影響，以探討脂聯(lián)素在腎小球疾病中的作用。 目的：研究高糖環(huán)境下大鼠腎小球系膜細胞(RMC)的增殖、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)的表達、細胞間粘附分子-1(ICAM-1)的表達以及脂聯(lián)素(ADPN)的干預(yù)作用。以闡明ADPN對腎臟可能具有的保護作用。 方法：①將體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細胞(RMC)，隨機分為正常對照組(5.5mmol/L葡萄糖，NG組)，高糖組(25.0mmol/L葡萄糖，HG組)，高糖+A

3、DPN組(25.0mmol/L葡萄糖，2.5μg/ml ADPN)，加入相應(yīng)培養(yǎng)液培養(yǎng)不同時間(24小時，48小時，96小時)。運用MTT法測定細胞的增殖情況。②再將RMC分為三組：正常對照組(5.5mmol/L葡萄糖，NG組)，高糖組(25.0mmol/L葡萄糖，HG組)，高糖+不同濃度的ADPN組(25.0mmol/L葡萄糖2.5，5.0，7.5，10.0，15.0，20.0μg/ml ADPN)，加入相應(yīng)培養(yǎng)液培養(yǎng)48小時，用酶聯(lián)

4、免疫吸附技術(shù)雙抗體夾心法(ABC-ELISA)測定細胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1和ICAM-1的含量。 結(jié)果：①與正常對照組相比，高糖組抑制細胞增殖，加入低濃度脂聯(lián)素(2.5μg/ml)后促進細胞增殖；且呈時間依賴性。②作用48h后，TGF-β1和ICAM-1在高糖組表達較高，加入低劑量脂聯(lián)素對于TGF-β1和ICAM-1表達影響不大，而隨著脂聯(lián)素濃度的升高，TGF-β1和ICAM-1的表達明顯下降，脂聯(lián)素濃度為10.0～20.0