血竭素高氯酸鹽能抑制高糖活化的人腎小球系膜細(xì)胞中TGF-β1-SGK1-FN信號(hào)通路.pdf

1、目的：觀察血竭素高氯酸鹽（Dracorhodin Perchlorate，DP）對(duì)高糖環(huán)境下培養(yǎng)的人腎小球系膜細(xì)胞（Human mesangial cells，HMC）中轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-beta 1，TGF-β1)/血清和糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的蛋白激酶1（serum and glucocorticoid inducible kinase 1，SGK1）/纖維連接蛋白（fibronect

2、in，F(xiàn)N）信號(hào)通路的抑制作用，探討其防治糖尿病腎病腎臟纖維化的作用與機(jī)制。
　　 方法：將體外培養(yǎng)的HMC分為正常糖組(NG組，5.5 mmol·L-1D-葡萄糖)、正常糖+DP低劑量組（NG+LDP組，5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖+7.5 μmol·L-1DP）、正常糖+DP高劑量組（NG+HDP組，5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖+15 μmol·L-1DP）、高糖組(HG組,25 mmol·L-1 D-葡萄糖

3、)、高糖+DP低劑量組（HG+LDP組,25 mmol·L-1 D-葡萄糖+7.5 μmol·L-1DP）、高糖+DP高劑量組（HG+HDP組,25 mmol·L-1 D-葡萄糖+15 μmol·L-1DP），作用24 h后，采用RT-PCR和Real-time PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞中TGF-β1、SGK1、FN mRNA的水平，并采用間接免疫熒光和western blot方法檢測(cè)細(xì)胞中TGF-β1、SGK1、FN蛋白的表達(dá)。
　

4、　 結(jié)果：在正常糖組HMC中有基礎(chǔ)量的TGF-β1、SGK1、FNmRNA及蛋白的表達(dá)，經(jīng)7.5 μmol·L-1的DP作用24 h后，TGF-β1、SGK1、FNmRNA水平及蛋白與NG組相比無明顯差異(P>0.05)，但經(jīng)15μmol·L-1L的DP作用24 h后，TGF-β1、SGK1、FNmRNA及蛋白水平較NG組明顯下降（P<0.05或P<0.01）；與NG組相比較，HG組中HMC中的TGF-β1、SGK1、FNmRNA及蛋