一個(gè)新的CIITA-Ⅳ變異體通過表觀遺傳學(xué)機(jī)制抑制IL-4轉(zhuǎn)錄激活.pdf

1、本論文工作意外地發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的Ⅳ型CⅡTA基因變異體，具有阻抑IL-4基因轉(zhuǎn)錄激活的能力，其機(jī)制涉及表觀遺傳學(xué)(epigenetics)調(diào)控?！　”菊撐膹娜藛魏思?xì)胞細(xì)胞株THP1中克隆到全長(zhǎng)Ⅳ型CⅡTA，酶切鑒定其正確后進(jìn)行測(cè)序，對(duì)比發(fā)現(xiàn)其序列與GenBank已經(jīng)報(bào)導(dǎo)的Ⅳ型CⅡTA的序列在287位插入一個(gè)TAG，另外有6處出現(xiàn)單個(gè)堿基的變化，可引起相應(yīng)位置氨基酸的改變。盡管存在這些變異，當(dāng)將此新的Ⅳ型CⅡTA的表達(dá)載體pcDNA3.1-

2、Thp1-CⅡTA-Ⅳ轉(zhuǎn)染原本不表達(dá)HLA-DR分子的Hela細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果可見細(xì)胞表達(dá)HLA-DR，從而在功能上證實(shí)新克隆的Ⅳ型CⅡTA具有Ⅱ類反式激活因子的活性?！　”疚脑谝陨蠈?shí)驗(yàn)條件中加入去乙?；傅囊种苿㏕SA，發(fā)現(xiàn)被抑制的IL-4mRNA又恢復(fù)表達(dá)，初步提示新克隆的Ⅳ型CⅡTA基因可通過表觀遺傳學(xué)的機(jī)制抑制IL-4轉(zhuǎn)錄激活。ChIP實(shí)驗(yàn)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)導(dǎo)入Thp1-CⅡTA-Ⅳ基因后，Stat6和NF-AT不再與IL-4