染料木素和亞麻籽木脂素對(duì)青春期雌性大鼠乳腺發(fā)育及相關(guān)性激素影響的研究.pdf

1、本文以青春期雌性大鼠為研究對(duì)象，采用灌飼和日糧添加兩種試驗(yàn)方法分別研究異黃酮染料木素(Genistein, Gen)和亞麻籽木脂素(Flaxseed Lignans，SDG)對(duì)大鼠乳腺發(fā)育及相關(guān)性激素的影響，結(jié)合RP-HPLC、RIA、組織切片、核酸比值等技術(shù)，對(duì)動(dòng)物血清與乳腺發(fā)育相關(guān)的激素水平以及植物雌激素在血清及乳腺組織中代謝產(chǎn)物的濃度進(jìn)行了初步的研究，并在此基礎(chǔ)上探討了兩種植物雌激素對(duì)乳腺發(fā)育的作用機(jī)制，為其新功能的開(kāi)發(fā)研究提供實(shí)

2、驗(yàn)依據(jù)，本試驗(yàn)主要包括以下三章。 1.染料木素對(duì)青春期雌性大鼠乳腺發(fā)育及相關(guān)性激素影響的研究 本試驗(yàn)通過(guò)灌飼和日糧添加染料木素兩種給藥方式，應(yīng)用組織切片技術(shù)、核酸比值、放射免疫分析等方法研究染料木素對(duì)青春期雌性大鼠乳腺發(fā)育及性激素的影響。灌飼染料木素(6mg/100 g體重)結(jié)果表明：試驗(yàn)組大鼠乳腺相對(duì)體重百分比與對(duì)照組比較提高35.41％(P<0.01)；乳腺組織RNA與DNA含量分別提高27.24％(P<0.01)和

3、4.27％(P>0.05)；RNA/DNA值升高22.07％(P<0.01).提示：染料木素主要能夠促進(jìn)大鼠乳腺細(xì)胞體積增大，促進(jìn)乳腺發(fā)育。放射免疫分析結(jié)果顯示：試驗(yàn)組大鼠血清17β-雌二醇水平較對(duì)照組升高26.68％(P<0.01)；孕酮水平提高130.54％(P<0.01)。提示：染料木素可能通過(guò)與下丘腦—垂體—卵巢、子宮的雌性激素的受體結(jié)合，促進(jìn)與乳腺發(fā)育相關(guān)的雌激素和孕酮的生成和釋放，從而增加血清性激素水平。日糧添加染料木素結(jié)果

4、表明：試驗(yàn)組大鼠乳腺相對(duì)體重的百分比增加25.45％(P<0.01)；乳腺組織RNA與DNA含量分別升高24.49％(P<0.01)和10.54％(P<0.05)，RNA/DNA值升高12.63％(P<0.05).試驗(yàn)組大鼠血清17β-雌二醇水平較對(duì)照組提高9.95％(P<0.05)；孕酮水平提高247.92％(P<0.01)。兩系列試驗(yàn)結(jié)果表明，灌飼和日糧添加染料木素結(jié)果基本一致，提示可能通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌途徑促進(jìn)大鼠的乳腺發(fā)育。

5、 2.亞麻籽木脂素對(duì)青春期雌性大鼠乳腺發(fā)育及相關(guān)性激素影響的研究 本試驗(yàn)通過(guò)灌飼和日糧添加亞麻籽木脂素兩種給藥方式，應(yīng)用核酸比值、放射免疫分析、組織切片等方法，研究亞麻籽木脂素對(duì)青春期雌性大鼠乳腺發(fā)育及相關(guān)性激素的影響，并探討其作用機(jī)制。灌飼含20％亞麻籽木脂素粗提物(30 mg/100 g體重)結(jié)果表明：與對(duì)照組比較，大鼠乳腺相對(duì)體重百分比升高23.11％(P<0.01)，乳腺組織RNA含量升高26.34％(P<0.01)，D

6、NA含量增加不顯著，乳腺組織RNA/DNA值升高23.11％(P<0.01)。提示：亞麻籽木脂素能夠促進(jìn)大鼠乳腺細(xì)胞體積增大，乳腺呈肥大型發(fā)育。試驗(yàn)組大鼠血清17β雌二醇和孕酮水平均較對(duì)照組升高(P<0.01)。提示：亞麻籽木脂素可能通過(guò)下丘腦—垂體—生腺軸，促進(jìn)與乳腺發(fā)育相關(guān)的雌激素和孕酮的生成和釋放。日糧添加含20％亞麻籽木脂素粗提物100 mg/kg；試驗(yàn)組II在每kg基礎(chǔ)日糧中添加亞麻籽木脂素粗提物100 mg，并以桿菌肽鋅、硫

7、酸粘桿菌素預(yù)混劑，用于抑制消化道微生物。組織切片結(jié)果表明：試驗(yàn)組I和試驗(yàn)組II大鼠的乳腺導(dǎo)管增粗，腺泡體積增大，乳腺發(fā)育水平均高于對(duì)照組，而試驗(yàn)I組高于II組；乳腺組織DNA、RNA含量和RNA/DNA值均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。提示：亞麻籽木脂素能夠促進(jìn)乳腺細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞體積增大。血清放免檢測(cè)結(jié)果顯示：試驗(yàn)組I17β雌二醇和孕酮水平較對(duì)照組分別顯著(P<0.05)、極顯著增加(P<0.01)；與試驗(yàn)組II相比，17β雌二醇

8、和孕酮分別增加(P>0.05)、極顯著增加(P<0.01)。提示：亞麻籽木脂素可能通過(guò)與下丘腦、垂體、性腺的雌激素受體結(jié)合，促進(jìn)雌二醇和孕酮的生成和釋放。兩系列試驗(yàn)表明：灌飼和日糧添加20％亞麻籽木脂素粗提物結(jié)果基本一致，均能夠促進(jìn)青春期雌性大鼠乳腺發(fā)育。 3.亞麻籽木脂素及其代謝產(chǎn)物在大鼠血清及乳腺組織中含量的測(cè)定 木脂素類(lèi)化舍物廣泛存在于自然界植物中，能通過(guò)動(dòng)物消化道微生物及相關(guān)酶的作用轉(zhuǎn)化成動(dòng)物木脂素，二者均具有雌

9、激素樣和抗雌激素樣生物活性。本試驗(yàn)應(yīng)用RP-HPLC檢測(cè)大鼠血清及乳腺組織中亞麻籽木脂素及其兩種主要代謝產(chǎn)物腸二醇和腸內(nèi)脂的含量，樣品為第五章兩系列試驗(yàn)動(dòng)物的血清及乳腺組織。 灌飼含20％亞麻籽木脂素粗提物(30 mg/100 g體重)結(jié)果表明：試驗(yàn)組大鼠血清三種木脂素，即SDG、腸二醇(END)、腸內(nèi)脂(ENL)含量分別為：30，17，39)μg/ mL，均較對(duì)照組升高(P<0.01)。在大鼠乳腺組織三種木脂素含量分別為：0.

10、364，0.174，0.102 mg/g，亦均較對(duì)照組極顯著升高(P<0.01)。日糧添加含20％亞麻籽木脂素粗提物100 mg/kg，結(jié)果表明：試驗(yàn)I組血清和乳腺組織亞麻籽木脂素及其代謝產(chǎn)物腸二醇( END)和腸內(nèi)脂(ENL)含量均極顯著增加(P<0.01)；而添加抗生素抑制消化道微生物作用后，木脂素在血清及乳腺組織的含量極顯著降低。結(jié)論：亞麻籽木脂素通過(guò)消化道微生物作用能夠轉(zhuǎn)化成動(dòng)物木脂素，可以被吸收入血，到達(dá)乳腺組織。提示：亞麻籽