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文檔簡介
1、本文以山羊?yàn)檠芯繉ο?,采用體外培養(yǎng)、體內(nèi)動物實(shí)驗(yàn)兩種方法研究大豆黃酮、亞麻籽木脂素和伊普異黃酮對反芻動物瘤胃代謝的影響,重點(diǎn)研究了伊普異黃酮對山羊瘤胃代謝及瘤胃液性激素含量的影響,并對亞麻籽木脂素對山羊瘤胃代謝的影響進(jìn)行了初步研究,本研究分三大部分: 第一部分大豆黃酮對山羊瘤胃代謝影響的體外研究 實(shí)驗(yàn)選用3頭健康、體況基本一致裝有永久性瘤胃瘺管的本地成年雌性山羊的瘤胃液,采用簡易人工瘤胃裝置。劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn):各培養(yǎng)瓶分別添
2、加大豆黃酮使其在培養(yǎng)液中濃度為0 mg/L,10 mg/L,50 mg/L,100 mg/L,200 mg/L,39℃恒溫厭氧培養(yǎng),10h后收集培養(yǎng)液。動態(tài)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):按照培養(yǎng)時間設(shè)2h,4h,6h,8h,12h小時5種處理,每個處理分為對照組和實(shí)驗(yàn)組(大豆黃酮組),實(shí)驗(yàn)組濃度為100 mg/L。 結(jié)果表明,大豆黃酮可直接作用于瘤胃微生物,影響瘤胃發(fā)酵,添加大豆黃酮可使培養(yǎng)液中pH值下降,改變瘤胃氨氮濃度和微生物蛋白濃度,促進(jìn)瘤胃
3、氮代謝。TVFA的濃度無明顯變化,但可改變各揮發(fā)性脂肪酸的濃度和組成,特別使乙酸濃度增加,改變了乙酸和丙酸的比例,說明大豆黃酮改變了瘤胃微生物的發(fā)酵類型。在體外條件下,大豆黃酮可被瘤胃微生物降解為雌馬酚。 第二部分.木脂素對山羊瘤胃代謝影響的體外研究 實(shí)驗(yàn)選用3頭健康、體況基本一致裝有永久性瘤胃瘺管的本地成年雌性山羊的瘤胃液,采用簡易人工瘤胃裝置.劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn):各培養(yǎng)瓶分別添加亞麻籽木脂素使其在培養(yǎng)液中濃度為0 mg/L
4、,10 mg/L,50 mg/L,100 mg/L,200 mg/L,39℃恒溫厭氧培養(yǎng),10h后收集培養(yǎng)液.動態(tài)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):按照培養(yǎng)時間設(shè)2h,4h,6h,8h,12h小時5種處理,每個處理分為對照組和實(shí)驗(yàn)組(亞麻籽木脂素組),實(shí)驗(yàn)組濃度為100 mg/L。劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,亞麻籽木脂素50 mg/L、100 mg/L時pH分別下降0.85%(對照組6.27±0.02,VS實(shí)驗(yàn)組6.25±0.02,P<0.05)、2.05%(6.0
5、2±0.01,VS5.89±0.03,P<0.01)。NH3-N濃度分別下降12.31%(1.793±0.032 VS1.572±0.057,P<0.05)、24.29%(1.745±0.043 VS1.321±0.097,P<0.01)。MCP濃度分別上升25.83%(70.595±2.164 VS88.831±2.329,P<0.05)、8.16%(67.312±4.269 VS72.806±4.086,P>0.05)。動態(tài)培養(yǎng)結(jié)果
6、顯示,亞麻籽木脂素組發(fā)酵6h、12h時pH分別下降1.35%(6.49±0.04 VS6.32±0.02,P<0.01)、2.11%(6.49±0.04 VS6.02±0.05,P<0.01)。NH3-N濃度6h時下降11.72%(1.058±0.090 VS0.934±0.061,P<0.01)、12h時上升71.55%(0.952±0.035 VS1.633±0.075,P<0.01)??倱]發(fā)性脂肪酸(TVFA)在6h后顯著高于對照
7、組。乙酸(A)比例下降,丙酸(P)比例上升,結(jié)果P:A比例明顯升高。在體外條件下,亞麻耔木脂素可被瘤胃微生物降解為END和ENL。 第三部分伊普異黃酮對山羊瘤胃代謝及瘤胃液性激素含量的影響。 本部分實(shí)驗(yàn)旨在研究伊普異黃酮(Ipriflavone,Ip,7-異丙基異黃酮)對山羊瘤胃代謝以及瘤胃液雌二醇和睪酮含量的影響.包括兩系列試驗(yàn): 系列1體外試驗(yàn) 瘤胃液來自三只裝有永久性瘤胃瘺管的本地成年雌性山羊,以0
8、.6 g草粉和0.3 g精料為底物,研究不同濃度IP(0 mg/L,10 mg/L,50 mg/L,100 mg/L,200 mg/L),以及IP濃度為100 mg/L時不同培養(yǎng)時間(2h,4h,6h,8h,12h)時對山羊瘤胃代謝的影響。 劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,培養(yǎng)液中IP濃度為100 mg/L和200 mg/L時能顯著加強(qiáng)瘤胃代謝,pH水平顯著下降,氨氮(NH3-N)濃度和微生物蛋白(MCP)濃度顯著升高;動態(tài)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,
9、4h、8h、12 hpH值分別較對照組下降0.68%(P<0.01)、0.49%(P<0.05)、2.05%(P<0.01),對照組NH3-N濃度8h后呈下降趨勢,實(shí)驗(yàn)組持續(xù)上升,在12 h較對照組升高12.50%(P<0.01),對照組和實(shí)驗(yàn)組MCP濃度變化規(guī)律基本一致,均在培養(yǎng)4h后持續(xù)下降,在整個培養(yǎng)過程中,實(shí)驗(yàn)組微生物蛋白含量較對照組有升高的趨勢。 系列2動物試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)選用4只裝有永久性瘤胃瘺管的本地成年山羊,采
10、用自身對照設(shè)計,對照期飼喂精料,實(shí)驗(yàn)期在精料中添加IP(100 mg/100 g精料),于飼喂前及采食后2、4、6、8、10小時采集瘤胃液并測定各相關(guān)指標(biāo);結(jié)果表明,IP有加強(qiáng)瘤胃氮代謝趨勢;使乙酸濃度升高(P<0.01),乙酸比例上升(P<0.01),丙酸比例下降(P<0.05),丙酸/乙酸比值下降(P<0.01);乙酸含量提高了9.66%,乙酸比例上升7.20%,丙酸比例下降5.45%,丙酸/乙酸下降12.31%;瘤胃液中17β雌二
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