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1、目的：制備鼠抗人的IgE高親和力受體FcεRIα的單克隆抗體并對(duì)其進(jìn)行鑒定,為過(guò)敏性疾病的相關(guān)研究提供條件。 方法：用IgE高親和力受體FcεRIα重組蛋白作為抗原免疫BALB/C小鼠，常規(guī)方法進(jìn)行融合，經(jīng)篩選及克隆化建立可穩(wěn)定分泌抗人FcεRIαMcAb的雜交瘤細(xì)胞株，用ELISA、流式細(xì)胞儀，免疫熒光以及Western－blot方法進(jìn)行抗體的初步鑒定。競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)初步檢測(cè)所制備抗體的生物活性。 結(jié)果：共制備出2株抗人
2、FcεRIα單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為B5B4和B4C2。流式細(xì)胞術(shù)分析此2株抗體與轉(zhuǎn)染人FcεRIα的中國(guó)倉(cāng)鼠細(xì)胞系CHO3D10細(xì)胞的結(jié)合率分別為96.2％、97.4％，與表達(dá)FcεRI、FcγRII的人嗜堿性粒細(xì)胞系KU812E細(xì)胞的結(jié)合率分別為96.7％、95.4％，免疫熒光顯示2株抗體均能與FcεRIα發(fā)生特異性反應(yīng)。Western－blot結(jié)果顯示抗體輕重鏈分別約28Kd與50Kd。競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)顯示所制備出的純化
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