替米沙坦改善高脂飼養(yǎng)OLETF大鼠胰島素抵抗并調(diào)節(jié)大鼠循環(huán)脂肪細(xì)胞因子水平.pdf

1、目的：探討血管緊張素Ⅱ1型受體(angiotensinⅡtype1receptor，AT1R)拮抗劑替米沙坦對(duì)高脂喂養(yǎng)OLETF(otsukalong-evanstokushimafatty，OLETF)大鼠2型糖尿病(Type2DiabetesMellims，T2DM)的預(yù)防作用，以及對(duì)大鼠胰島素抵抗和糖脂代謝的影響。觀察替米沙坦對(duì)高脂喂養(yǎng)OLETF大鼠循環(huán)脂肪細(xì)胞因子水平的調(diào)控作用。
　　方法：4周齡雄性O(shè)LETF(otsuk

2、along-evanstokushimafatty)大鼠47只，同系同周齡LETO(long-ewanstokushimaotsuka)大鼠12只，體質(zhì)量為150～200g，均為日本大冢制藥有限公司研究所惠贈(zèng)，于清潔級(jí)環(huán)境以標(biāo)準(zhǔn)飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)4周。OLETF大鼠于8周齡開(kāi)始給予高脂飼料喂養(yǎng)。至16周齡，進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)，各組大鼠均未出現(xiàn)糖耐量異常，根據(jù)OGTT2h血糖和體重將OLETF大鼠隨機(jī)分為5組：①無(wú)干預(yù)的OLE

3、TF大鼠(IR組)，共10只；②二甲雙胍干預(yù)的OLETF大鼠(MET組)，共10只，給予二甲雙胍(100mg·kg-1·d-1)；③吡格列酮干預(yù)的OLETF大鼠(P組)，共8只，給予吡格列酮(10mg·kg-1·d-1)；④替米沙坦干預(yù)的OLETF大鼠(L組)，共10只，給予替米沙坦(5mg·kg-1·d-1)；⑤低劑量替米沙坦干預(yù)的OLETF大鼠(VL組)，共9只，給予替米沙坦(0.5mg·kg-1·d-1)。LETO大鼠(NC組)，

4、共12只。22周齡時(shí)再次復(fù)查OGTT，全部OLETF大鼠均發(fā)生胰島素抵抗。開(kāi)始藥物干預(yù)共26周，每日1次灌胃，對(duì)照組大鼠以等量蒸餾水灌胃，48周齡處死大鼠。觀察：1.體重變化：自20周齡始每?jī)芍芊Q重一次。2.血清指標(biāo)：生化法測(cè)定血清游離脂肪酸、總膽固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇等代謝指標(biāo)；葡萄糖氧化酶法測(cè)定空腹血糖；ELISA法測(cè)定空腹胰島素、血清視黃醇結(jié)合蛋白4(Retinol-bindingprotein4，

5、RBP4)、網(wǎng)膜素、內(nèi)脂素水平。所有結(jié)果均采SPSS18.0軟件分析處理。
　　結(jié)果：1.各組大鼠2型糖尿病發(fā)病率比較：各組大鼠2型糖尿病發(fā)病率不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=36.501，P=0.000)，且L組與IR組比較有下降趨勢(shì)。2.各組大鼠體重比較：自20周齡開(kāi)始，IR組、MET組、P組、L組和VL組間大鼠體重?zé)o明顯差別，但I(xiàn)R組、MET組、P組、L組和VL組體重均明顯高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。至34周

6、齡開(kāi)始，L組體重較IR組和MET組有下降趨勢(shì)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.809和0.476)；L組體重較P組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。
　　3.各組大鼠糖脂代謝指標(biāo)比較：①IR組與NC組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素和HOMA-IR明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.001、0.036、0.000、0.000、0.011和0.000)；ISI明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義(P=0.000)。
　?、贚組與IR組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖和HOMA-IR明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.005、0.029、0.000、0.031和0.022)；ISI明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.017)。
　　③VL組與IR組比較，游離脂肪酸和低密度脂蛋白膽固醇明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.041和0.000)。
　　④P組與IR組比較，總膽

8、固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖和HOMA-IR明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.004、0.001、0.001和0.001)；ISI明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。
　　⑤L組與MET組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素和HOMA-IR明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.000、0.039、0.06、0.008和0.006)；ISI明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004)。

9、　?、轑組與P組比較，游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR和ISI比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.各組大鼠循環(huán)脂肪細(xì)胞因子水平的比較：①IR組網(wǎng)膜素明顯低于NC組、MET組、L組和VL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.000、0.026、0.000和0.006)；內(nèi)脂素明顯高于NC組、P組、L組和VL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.001、0.007、0.002和0.026)；R

10、BP4明顯高于NC組和L組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.000和0.000)。
　　②L組網(wǎng)膜素明顯高于MET組和P組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.07和0.024)；內(nèi)脂素明顯低于MET組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.013)；RBP4明顯低于MET組、P組和VL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.000、0.006和0.009)。
　　5.脂肪細(xì)胞因子水平的直線相關(guān)分析：①網(wǎng)膜素與RBP4和內(nèi)脂素呈負(fù)相關(guān)(r分別為

11、-0.418和-0.415，均P<0.01)：②內(nèi)脂素與HOMA-IR、游離脂肪酸和RBP4呈正相關(guān)(r分別為0.332、0.270和0.304，均P<0.05)，與ISI和網(wǎng)膜素呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.316和-0.415，均1<0.05)；③RBP4與空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR、游離脂肪酸和內(nèi)脂素呈正相關(guān)(r分別為0.465、0.400、0.534、0.294和0.304，均P<0.05)，與ISI和網(wǎng)膜素呈負(fù)相關(guān)(r分別

12、為-0.567和-0.148，均P<0.01)。
　　6.多元線性逐步回歸分析：①以網(wǎng)膜素水平為因變量進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，結(jié)果顯示RBP4和內(nèi)脂素是網(wǎng)膜素水平的獨(dú)立影響因素?；貧w方程：Y＾=248.282-0.52XRBP4-0.118Xvisfatin。
　?、谝訰BP4水平為因變量進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，結(jié)果顯示ISI和網(wǎng)膜素是RBP4水平的獨(dú)立影響因素。回歸方程：Y^=84.799-10.955XISI-0.1

13、92Xomentin。
　?、垡詢?nèi)脂素水平為因變量進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，結(jié)果顯示HOMA-IR和網(wǎng)膜素是內(nèi)脂素水平的獨(dú)立影響因素?；貧w方程：Y^=645.924-1.008Xomentin+2.371XHOMA-IR。
　　結(jié)論：1.通過(guò)對(duì)OLETF大鼠的早期高脂飼養(yǎng)，成功建立了具有胰島素抵抗及空腹高血糖的T2DM動(dòng)物模型。
　　2.高脂飼養(yǎng)使OLETF大鼠血清游離脂肪酸、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空

14、腹胰島素和HOMA-IR明顯升高，ISI明顯降低；同時(shí)顯著上調(diào)血清RBP4和內(nèi)脂素水平并下調(diào)網(wǎng)膜素水平。
　　3.經(jīng)過(guò)替米沙坦干預(yù)，可以改善OLETF大鼠的糖脂代謝紊亂和胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，降低OLETF大鼠的T2DM發(fā)病率。替米沙坦對(duì)OLETF大鼠循環(huán)脂肪細(xì)胞因子的表達(dá)具有調(diào)控作用，可能通過(guò)降低血清RBP4和內(nèi)脂素，提高網(wǎng)膜素的表達(dá)改善大鼠胰島素抵抗。
　　4.通過(guò)與二甲雙胍和吡格列酮比較，顯示替米沙坦在對(duì)大鼠循環(huán)脂肪細(xì)胞因子