髓系腫瘤中EphrinB2基因表達(dá)和啟動子甲基化的臨床研究.pdf

1、目的：研究EphrinB2基因在髓系腫瘤急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)、慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia，CML)和骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome，MDS)患者中的表達(dá)水平和啟動子甲基化態(tài)勢，并分析其臨床相關(guān)性。
　　方法：應(yīng)用實(shí)時定量PCR(real-time quantitative PCR，RQ-PCR)技術(shù)和實(shí)時定

2、量甲基化特異性PCR(real-time quantitative methylation-specific PCR，RQ-MSP)技術(shù)分別檢測EphrinB2基因表達(dá)和啟動子的甲基化狀態(tài)。應(yīng)用亞硫酸氫鹽測序(bisulfitesequencing PCR，BSP)分析EphrinB2啟動子甲基化密度。
　　結(jié)果：EphrinB2基因表達(dá)與啟動子甲基化在髓系腫瘤中的研究:
　　(1) AML91例AML患者中EphrinB2

3、表達(dá)水平比對照組顯著下調(diào)（P＜0.001），且高表達(dá)組患者的年齡明顯高于低表達(dá)組(P=0.011)。應(yīng)用接收者操作特征曲線(receiveroperating characteristic，ROC)分析， ROC曲線下面積(area under the ROC curve，AUC)0.776(95％ CI:0.670-0.883, P＜0.001)及0.812(95％CI:0.726-0.898,P＜0.0001)可分別用于區(qū)分細(xì)胞遺傳

4、學(xué)正常的AML患者與對照組及AML患者與對照組。EphrinB2低表達(dá)組患者與高表達(dá)組患者的化療后完全緩解率(complete remission，CR)及總生存時間(OS)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。154例AML患者中甲基化陽性率為17.5％(27/154)，EphrinB2甲基化狀態(tài)與AML患者的性別、年齡、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量、FAB分組、核型分組、WHO分型和基因突變的各組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，但Ep

5、hrinB2高甲基化組血小板計(jì)數(shù)低于低甲基化組(P=0.031)。核型分類中，EphrinB2高甲基化率在正常核型組中明顯高于異常核型組（P=0.001）。EphrinB2基因啟動子高甲基化病人的OS（中位20個月）比EphrinB2基因啟動子低甲基化病人（中位22個月）短，但兩者間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.537)。EphrinB2基因高甲基化水平與EphrinB2表達(dá)水平無相關(guān)性（R=-0.200，P=0.175）。RQ-MSP結(jié)果和亞

6、硫酸鹽測序結(jié)果呈高度相關(guān)(R=0.880，P=0.021)。
　　(2) CML70例CML患者中甲基化陽性率為32.9％(23/70)。EphrinB2基因甲基化與EphrinB2表達(dá)水平無相關(guān)性(R=-0.091，P=0.682)。
　　(3) MDS70例MDS患者中甲基化陽性率為40.0％(28/70)。EphrinB2基因啟動子高甲基化病人的OS（中位33.3個月）明顯短于EphrinB2基因啟動子低甲基化病人（中

7、位41.4個月），但兩者間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.903);在核型正常的MDS中，EphrinB2基因啟動子高甲基化病人的OS（中位41.6個月）明顯短于EphrinB2基因啟動子低甲基化病人（中位50.3個月），但兩者間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.558)。
　　結(jié)論：(1) EphrinB2低表達(dá)是造血系統(tǒng)髓系腫瘤AML患者中的一個常見分子事件，但不影響疾病的預(yù)后。(2) EphrinB2啟動子高甲基化是造血系統(tǒng)髓系腫瘤AML、C