益生菌對(duì)硫代乙酰胺誘導(dǎo)肝纖維化程度的改善作用研究.pdf

1、研究背景：
　　 肝纖維化是指由各種致病因子所致肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，導(dǎo)致肝內(nèi)彌漫性細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度沉積的病理過(guò)程，其發(fā)展的最終結(jié)果即肝硬化。研究已經(jīng)表明，在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，腸源性內(nèi)毒素血癥(Intestinal endotoxemia，IETM)起了重要的促進(jìn)作用，導(dǎo)師劉立新的前期研究發(fā)現(xiàn)，硫代乙酰胺（Thioacetamide，TAA）在引起大鼠肝損傷的同時(shí)出現(xiàn)IETM，其所致肝損傷動(dòng)物模型與人類肝損傷的特點(diǎn)更相符，

2、更能反映人類肝損傷的實(shí)際情況。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，益生菌制劑培菲康（雙歧三聯(lián)活菌膠囊）可調(diào)節(jié)腸道菌群，扶持厭氧菌生長(zhǎng)，減少有害菌比例，從而減少腸腔內(nèi)毒素的產(chǎn)生，已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用。有資料表明，微生態(tài)制劑整腸生（地衣芽孢桿菌活菌膠囊）為兼性厭氧菌，在有氧的狀態(tài)下能迅速消耗環(huán)境中的游離氧，產(chǎn)生強(qiáng)大的生物奪氧作用，促進(jìn)厭氧菌的生長(zhǎng)，代謝過(guò)程中產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)，在臨床上主要用于腹瀉患者的治療，但其在改善肝纖維化程度方面的研究卻很少有報(bào)道。本研究通過(guò)給

3、TAA誘導(dǎo)肝纖維化大鼠益生菌制劑培菲康和整腸生，研究培菲康和整腸生對(duì)肝纖維化的影響和作用，探討整腸生對(duì)肝纖維化程度的影響。
　　 目的：
　　 探討整腸生是否能通過(guò)降低腸源性內(nèi)毒素血癥而起到改善肝纖維化程度的作用。
　　 方法：
　　 將50只SPF級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、TAA模型組、培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組。采用TAA誘導(dǎo)大鼠肝纖維化，HE染色和苦味酸－天狼猩紅染色觀察大鼠肝

4、損傷和膠原纖維沉積情況；同時(shí)測(cè)定血漿內(nèi)毒素水平、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)水平；對(duì)肝組織膠原纖維面積百分比（苦味酸—天狼猩紅染色）和血漿內(nèi)毒素水平進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果：

5、
　　 (1)血漿內(nèi)毒素水平：與正常對(duì)照組相比，TAA模型組大鼠血漿內(nèi)毒素水平顯著升高（P＜0.01）；與TAA模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠血漿內(nèi)毒素水平顯著降低（P＜0.05）。
　　 (2)血清ALT、AST、LDH水平：與正常對(duì)照組相比，TAA模型組大鼠血清ALT、AST、LDH水平顯著升高(P＜0.05)；與TAA模型組相比，培菲康組大鼠血清ALT、AST、LDH水平顯著降低（P＜0.

6、05），整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠血清AST、LDH水平顯著降低(P＜0.05)，ALT水平?jīng)]有降低(P＞0.05)。
　　 (3)血清MDA水平：與正常對(duì)照組相比，TAA模型組大鼠血清MDA水平顯著升高(P＜0.05)；與TAA模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠血清MDA水平顯著降低(P＜0.05)。
　　 (4)HE染色：與正常對(duì)照組相比，TAA模型組大鼠肝小葉正常結(jié)構(gòu)被破壞，肝細(xì)胞索排

7、列紊亂，中央靜脈周圍可見(jiàn)片狀壞死及大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，并且有纖維隔形成，肝纖維化明顯形成(P＜0.01)；與TAA模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠肝小葉正常結(jié)構(gòu)存在，肝細(xì)胞有少量壞死，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較少，肝纖維化程度明顯改善(P＜0.05)。
　　 (5)苦味酸．天狼猩紅染色：與正常對(duì)照組相比，TAA模型組大鼠肝組織見(jiàn)大量紅色的膠原纖維，并且有假小葉形成，肝纖維化明顯形成(P＜0.05)；與TAA模型組相比，