分枝桿菌噬菌體D29與巨噬細(xì)胞的相互作用及其分布研究.pdf

1、目的:探討分枝桿菌噬菌體D29與巨噬細(xì)胞的相互作用，并分析D29在巨噬細(xì)胞內(nèi)結(jié)核分枝桿菌內(nèi)外的滴度變化，為探討D29用于治療結(jié)核病的機制及確定給藥劑量提供實驗參考。
　　 方法:將體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞在加入D29不同時間后裂解，測定D29滴度，同時在加入D2912 h后收集細(xì)胞上清液，ELISA法檢測一氧化氮(NO)和白細(xì)胞介素12(IL-12)水平;將D29加入到已吞噬結(jié)核菌的巨噬細(xì)胞中，于不同時間采用熒光定量PCR測定D29在

2、結(jié)核菌內(nèi)外分布的滴度。
　　 結(jié)果:1×108噬菌斑形成單位(PFU) D29加入巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基后，20 min時有2.5×104PFU被巨噬細(xì)胞吞噬，180 min后D29大量失活，190min時巨噬細(xì)胞內(nèi)已無存活的D29;細(xì)胞上清液中NO和IL-12水平與巨噬細(xì)胞空白組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但明顯少于LPS陽性對照組; D29與吞噬了結(jié)核菌的巨噬細(xì)胞作用30 min時，即有D29進入結(jié)核菌內(nèi)，作用40 min和50 min時