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1、目的:對(duì)玻片表面不同修飾方法進(jìn)行比較,選擇制備蛋白質(zhì)微陣列的表面修飾方法,并建立一種用蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)血清中 TORCH 抗體的新方法。 方法:以玻片為基質(zhì),采用瓊脂糖、多聚賴氨酸、氨基對(duì)玻片表面進(jìn)行修飾,通過(guò)點(diǎn)樣蛋白于修飾后的玻片制備蛋白質(zhì)微陣列,比較不同修飾方法對(duì)蛋白質(zhì)的固定效率:配制不同濃度的瓊脂糖溶液,根據(jù)熒光強(qiáng)度確定最佳瓊脂糖濃度;采用玻片表面修飾瓊脂糖膜制備蛋白質(zhì)抗原芯片,以熒光標(biāo)記二抗,檢測(cè)血清中 TORCH Ig
2、M 抗體。 結(jié)果:瓊脂糖修飾的玻片具有三維表面結(jié)構(gòu),在固定的抗體濃度相同的情況下瓊脂糖修飾玻片熒光強(qiáng)度是多聚賴氨酸修飾玻片的1.4倍,是氨基修飾玻片的4.6倍。當(dāng)瓊脂糖濃度為1.0﹪、蛋白質(zhì)在載體上的固定效率和反應(yīng)活性最高。瓊脂糖修飾玻片作為載體制備的蛋白質(zhì)芯片可檢測(cè)到血清中微量 TORCH 抗體的存在,抗體之間交叉反應(yīng)可忽略不計(jì)。用 30 例陽(yáng)性血清和 30 例陰性血清檢測(cè),蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)的靈敏度為93.3﹪,特異度為100
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