2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、伏馬菌素(FB1)是一族主要由幾種真菌產(chǎn)生的真菌毒素,廣泛存在并污染各種農(nóng)產(chǎn)品及谷物飼料,尤其以玉米及其制品中含量最大,對人類和動(dòng)物的危害較大,其毒性主要有急性毒性、亞急性毒性、神經(jīng)毒性、致癌性等。
   由于FB1的危害嚴(yán)重,每年因其造成的損失引起了全世界的普遍重視和關(guān)注。常見的檢測FB1的方法有:薄層層析法(TLC),高效液相法(HPLC)、氣相色譜法(GC),氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)等。
   蛋白質(zhì)芯片

2、是近年來蛋白質(zhì)組學(xué)研究中興起的一種新方法,它是在基因芯片的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,其原理是:抗原抗體都是蛋白質(zhì),利用芯片點(diǎn)樣儀把能和抗體特異性結(jié)合的抗原高密度地固定到玻片或其他載體上,將待測樣品和特異性抗體混合加入到芯片表面的抗原上,再加入熒光二抗染料,通過洗脫把非特異性結(jié)合的蛋白洗掉,利用間接競爭原理,當(dāng)檢測物含量高時(shí),和抗原特異反應(yīng)的抗體就少(熒光二抗也少),反之抗體就多(熒光二抗也多),再利用芯片掃描儀對芯片進(jìn)行掃描,利用軟件分析熒光信

3、號及信噪比,測定檢測物的含量;與傳統(tǒng)的研究方法相比具有微型化、集成化、高通量化、靈敏度高、所需樣品極少等優(yōu)點(diǎn)。
   本實(shí)驗(yàn)制備了人工抗原FB1-OVA,并對其進(jìn)行了鑒定和濃度測定,為FB1蛋白質(zhì)芯片的制備提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ):利用間接競爭的檢測原理,以熒光信號強(qiáng)度和信噪比對FB1蛋白質(zhì)芯片進(jìn)行研究。主要研究內(nèi)容和方法如下:
   1、利用戊二醛(GA)一步法將FB1偶聯(lián)到載體蛋白-卵清蛋白(OVA)上。偶聯(lián)后的抗原(FB1-

4、OVA)通過聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)鑒定證明偶聯(lián)成功,測定其濃度為1.08mg·mol-1。
   2、在蛋白質(zhì)芯片的制備時(shí),利用芯片點(diǎn)樣儀在醛基化玻片上先點(diǎn)上制備的人工抗原FB1-OVA(點(diǎn)樣環(huán)境:25℃,75%濕度),經(jīng)過固定、封閉、加上已經(jīng)制備好的的FB1抗體、加羊抗鼠IgG-CY3二抗等步驟,并用激光共聚焦掃描儀在激發(fā)波長553nm讀取熒光信號,采用GenePixpro6.0對采集圖象進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,從熒光信

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