圍生期TORCH感染后熒光檢測蛋白質(zhì)芯片制備的初步研究.pdf

1、目的：對玻片表面不同修飾方法進行比較，選擇制備蛋白質(zhì)微陣列的表面修飾方法，并建立一種用蛋白質(zhì)芯片檢測血清中 TORCH 抗體的新方法。 方法：以玻片為基質(zhì)，采用瓊脂糖、多聚賴氨酸、氨基對玻片表面進行修飾，通過點樣蛋白于修飾后的玻片制備蛋白質(zhì)微陣列，比較不同修飾方法對蛋白質(zhì)的固定效率：配制不同濃度的瓊脂糖溶液，根據(jù)熒光強度確定最佳瓊脂糖濃度；采用玻片表面修飾瓊脂糖膜制備蛋白質(zhì)抗原芯片，以熒光標記二抗，檢測血清中 TORCH Ig

2、M 抗體。 結果：瓊脂糖修飾的玻片具有三維表面結構，在固定的抗體濃度相同的情況下瓊脂糖修飾玻片熒光強度是多聚賴氨酸修飾玻片的1.4倍，是氨基修飾玻片的4.6倍。當瓊脂糖濃度為1.0﹪、蛋白質(zhì)在載體上的固定效率和反應活性最高。瓊脂糖修飾玻片作為載體制備的蛋白質(zhì)芯片可檢測到血清中微量 TORCH 抗體的存在，抗體之間交叉反應可忽略不計。用 30 例陽性血清和 30 例陰性血清檢測，蛋白質(zhì)芯片檢測的靈敏度為93.3﹪，特異度為100