超聲引導(dǎo)瘤內(nèi)注射卡鉑緩釋微球治療兔VX2肝移植瘤的適宜劑量研究.pdf

1、背景： 原發(fā)性肝癌是消化道常見的惡性腫瘤，具有發(fā)病率高、手術(shù)切除率低、術(shù)后復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)。肝癌治療方法繁多，各有利弊。超聲引導(dǎo)經(jīng)皮穿刺瘤內(nèi)注射藥物治療肝癌在該病治療手段中占比較重要的地位，也是目前研究的熱點(diǎn)之一。瘤內(nèi)注射利用微型成球技術(shù)制備的載化療藥緩釋微球，通過改變藥物劑型和給藥途徑能達(dá)到靶向給藥、緩慢釋放、持久作用的目的，明顯改善化療藥物對(duì)腫瘤的治療效果。前期試驗(yàn)研究表明瘤內(nèi)注射卡鉑/乳酸羥基乙酸共聚物緩釋微球(簡稱卡鉑微球

2、)治療兔VX2肝移植瘤與卡鉑原藥相比，增強(qiáng)其抑瘤作用、降低其毒副作用，但還沒有發(fā)揮其最佳治療效果。最關(guān)鍵問題是瘤內(nèi)注射卡鉑微球治療肝癌的臨床應(yīng)用劑量仍需要進(jìn)行深入細(xì)致的研究。 目的： 本研究擬通過觀察瘤內(nèi)注射不同劑量卡鉑微球治療兔VX2肝移植瘤的療效，探索瘤內(nèi)注射卡鉑微球治療兔VX2肝移植瘤的適宜劑量，以求充分發(fā)揮其抑瘤作用；并將其與無水乙醇治療兔VX2肝移植瘤進(jìn)行療效對(duì)比。為化療藥物緩釋微球瘤內(nèi)注射治療腫瘤應(yīng)用于臨床奠

3、定理論基礎(chǔ)。 方法： 1.制備卡鉑微球并觀察其物理特性采用O/O型乳化溶劑揮發(fā)法制備卡鉑微球，觀察其形態(tài)特征、粒徑分布、載藥量。 2.建立兔VX2肝移植瘤動(dòng)物模型采用開腹瘤塊包埋法建立兔VX2肝移植瘤動(dòng)物模型，超聲動(dòng)態(tài)觀察腫瘤體積大小、二維聲像圖和彩色多普勒特征以及荷瘤兔自然生存時(shí)間。 3.探索卡鉑微球瘤內(nèi)注射治療兔VX2肝移植瘤的適宜劑量由低到高設(shè)A、B、C、D、E、F六個(gè)卡鉑微球劑量組，卡鉑劑量分別為

4、9.00mg/cm3、13.50mg/cm3、20.25mg/cm3、30.38mg/cm3、45.56mg/cm3、68.34mg/cm3。并設(shè)注射用大豆油對(duì)照組，每組荷瘤新西蘭大白兔8只，依據(jù)治療前后腫瘤體積、血常規(guī)變化情況及病理改變等多項(xiàng)指標(biāo)，進(jìn)行綜合分析初步確立卡鉑微球的適宜劑量。 4.比較卡鉑微球與無水乙醇瘤內(nèi)注射治療兔VX2肝移植瘤的療效將荷瘤兔分為適宜劑量卡鉑微球組、無水酒精組、注射用大豆油對(duì)照組，每組12只，以相

5、應(yīng)藥物進(jìn)行超聲引導(dǎo)瘤內(nèi)注射治療。二維超聲動(dòng)態(tài)監(jiān)測腫瘤大小、聲像圖變化，并計(jì)算其體積。三維彩色血管能量成像超聲觀察腫瘤治療前后腫瘤血管變化情況，計(jì)算血管指數(shù)，量化評(píng)價(jià)治療效果。超聲造影觀察腫瘤治療前后血流灌注情況，視頻密度分析造影前后灰階；治療2w后每組處死4只動(dòng)物，取腫瘤標(biāo)本作病理檢查，對(duì)比分析各組腫瘤壞死程度，余下的動(dòng)物觀察生存時(shí)間。 結(jié)果： 1.本研究發(fā)現(xiàn)腫瘤于4～5w后腫瘤中心可出現(xiàn)變性壞死，并有腹膜轉(zhuǎn)移，晚期常發(fā)

6、生肺轉(zhuǎn)移。荷瘤兔自然存活42.71+1.50d。 2.自制的卡鉑微球光滑圓整，粒徑100～180μm的微球產(chǎn)出率為74.2％，載藥量為10.6％；體外釋藥無突釋效應(yīng)，呈平緩釋放，時(shí)間長達(dá)14d。 3.超聲引導(dǎo)瘤內(nèi)注射不同劑量卡鉑微球，隨劑量的不斷加大，腫瘤體積逐漸減小，F(xiàn)組即卡鉑微球量為644.72mg/cm3(卡鉑劑量為68.34mg/cm3)的最高劑量微球組腫瘤生長曲線最為平緩，腫瘤體積最小，有最大的抑瘤作用，但與卡

7、鉑微球量為429.81mg/cm3(卡鉑劑量為45.56mg/cm3)的E組比較，兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；瘤內(nèi)注射后第14d血常規(guī)檢查A～E組白細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)略有下降，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與對(duì)照組比較也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；F組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)略有下降，與其余各組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)下降顯著，與其余各組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；病理學(xué)檢查E、F組腫瘤均為重度壞死。 4.適宜劑量卡鉑微球與無水乙醇分組治療兔VX2肝移植瘤，其結(jié)果

8、包括治療后腫瘤體積、血管指數(shù)、視頻密度差值比較兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；生存時(shí)間卡鉑微球組明顯長于無水乙醇組和對(duì)照組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。治療后第14d解剖發(fā)現(xiàn)卡鉑微球組腫瘤局限于肝內(nèi)，未見轉(zhuǎn)移，無水乙醇組有1個(gè)出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移，對(duì)照組均有轉(zhuǎn)移。病理學(xué)檢查卡鉑微球組與無水乙醇組均可見腫瘤廣泛壞死。 結(jié)論： 1.包埋法建立VX2肝癌動(dòng)物模型成功率高，腫瘤生物學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在肝內(nèi)呈局灶性生長，適合于介入超聲治療實(shí)驗(yàn)研究及療效評(píng)價(jià)。 2