嗜肺軍團(tuán)菌LysR型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子lpg0173的功能研究.pdf

1、嗜肺軍團(tuán)菌(Legionella pneumophila)是一種能引起軍團(tuán)病的胞內(nèi)條件致病菌。人能夠通過(guò)吸入含軍團(tuán)菌的氣溶膠而感染嗜肺軍團(tuán)菌。在感染人體以后，該菌首先被巨噬細(xì)胞吞噬，通過(guò)其Dot/IcmⅣ型分泌系統(tǒng)分泌效應(yīng)蛋白募集宿主的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體膜偽裝成含有軍團(tuán)菌的小泡(Legionella-containingvacuole，LCV)從而逃避宿主免疫系統(tǒng)的識(shí)別和清除。軍團(tuán)菌在LCV中進(jìn)行復(fù)制增殖后裂解宿主細(xì)胞，再開(kāi)始新一輪的感染

2、，最終導(dǎo)致宿主患軍團(tuán)病。調(diào)節(jié)軍團(tuán)菌應(yīng)對(duì)各種各樣的外界及胞內(nèi)環(huán)境不同基因表達(dá)的調(diào)控因子對(duì)于研究軍團(tuán)菌如何適應(yīng)復(fù)雜的胞內(nèi)胞外環(huán)境尤為重要。
　　 LysR型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子(LysR-Type of Transcriptional Regulators，LTTRs)在細(xì)菌的很多生物過(guò)程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。在軍團(tuán)菌基因組中鑒定到了十多種LTTRs，然而其功能卻研究得很少。本論文對(duì)軍團(tuán)菌中一個(gè)LTTR，即lpg0173進(jìn)行了系統(tǒng)研究。運(yùn)用

3、比較蛋白質(zhì)組學(xué)比較了在lpg0173表達(dá)最高時(shí)期野生型菌株和lpg0173缺失突變株中蛋白組的差異情況，鑒定了三類(lèi)表達(dá)差異的蛋白。結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)，鑒定了14個(gè)差異表達(dá)蛋白，其中2個(gè)與細(xì)菌毒力相關(guān)，12個(gè)與代謝途徑相關(guān)。通過(guò)熒光光度分析確證了lpg0173是一個(gè)負(fù)的轉(zhuǎn)錄自調(diào)控因子，對(duì)Mip、flgE也有負(fù)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。生理功能研究表明lpg0173對(duì)軍團(tuán)菌在貧營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(Modified Ristroph Medium，MRM)中的生長(zhǎng)及