氨溴索對羅紅霉素在大鼠體內(nèi)外藥代動力學(xué)的影響.pdf

1、背景：羅紅霉素(roxithromycin,RM)為臨床上常用治療由革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌引起的感染的抗生素；氨溴索(Amb)多用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急慢性肺部疾病,促進痰液排出,改善肺功能；Amb能增強RM對肺組織的穿透性,提高后者在感染部位的濃度,兩者在臨床上經(jīng)常聯(lián)合使用治療支氣管肺部細菌性感染。RM主要經(jīng)肝臟代謝失活,有報道稱Amb可能對肝藥酶活性產(chǎn)生影響。經(jīng)文獻檢索,未見Amb合用RM引起后者藥代動力學(xué)參數(shù)改

2、變的相關(guān)報道。本課題探討Amb合用RM對后者藥代動力學(xué)參數(shù)的影響,為臨床合理用藥提供依據(jù)。
　　 目的：研究Amb對RM在游離大鼠肝細胞溫孵液及大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)參數(shù)的影響,評價藥物間的相互作用及聯(lián)合用藥的合理性。
　　 方法：
　　 ①建立游離大鼠肝細胞的分離提取方法。通過光學(xué)顯微鏡、透射電鏡檢查、HE染色對肝細胞的產(chǎn)率、活力、細胞形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)等指標進行測定。
　　 ②建立游離大鼠肝細胞體外溫孵體系。

3、通過MTT方法測定不同濃度RM、Amb對游離大鼠肝細胞活力的影響。
　　 ③研究Amb對RM在游離大鼠肝細胞溫孵液中代謝的影響:對照組單獨在肝細胞溫孵液中加入4μg·ml-1RM；實驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在肝細胞溫孵液中分別加入不同量的Amb,使Amb在各溫孵液中濃度分別為2、4、8μg·ml-1,RM在溫孵液中濃度均為4·μg·ml-1。各組均置于37℃的空氣浴振蕩器中振蕩孵育60 min,樣品處理后HPLC-UV檢測法測定未代謝RM

4、的含量,探明Amb對RM代謝的影響。
　　 ④Amb對RM藥代動力學(xué)影響:72只SD大鼠隨機分為4組,給藥前禁食12h。對照組的大鼠單獨予RM；實驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別預(yù)先予2.7mg·kg-1、5.4mg·kg-1、10.8mg·kg-1劑量的Amb,tidx6d,于第七天予Amb+RM。給藥后經(jīng)眼眶靜脈叢采集血樣,樣品處理后采用反相HPLC-UV檢測法測定RM的血藥濃度,根據(jù)RM在體內(nèi)經(jīng)時過程,用DAS2.1.1統(tǒng)計軟件求算該藥

5、單用及聯(lián)合用藥后的藥動學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 ①建立了成熟的大鼠肝細胞分離方法和游離大鼠肝細胞溫孵體系,肝細胞產(chǎn)率為1～2×108細胞/肝,肝細胞活力和純度均在90％左右。
　　 ②RM的濃度在1～12μg·ml-1范圍內(nèi),Amb的濃度在0.5～16μg·ml-1范圍內(nèi),對游離大鼠肝細胞活力與空白對照組相比,未見顯著影響,肝細胞活力>80％。
　　 ③RM的HPLC-UV檢測方法為流動相:乙腈:水(

6、含0.02mol·L-1磷酸二氫銨)=35:65,加三乙胺調(diào)pH值至7.1；流速:1ml·min-1；檢測波長:210nm；AUFS:0.004。
　　 ④在游離大鼠肝細胞體外溫孵液中,Amb對RM的代謝消除率的影響與對照組相比無明顯區(qū)別(P>0.05)。
　　 ⑤大鼠在體實驗表明:采用隨機區(qū)組的方差分析進行統(tǒng)計學(xué)處理,實驗組與對照組各組間RM的主要藥動學(xué)參數(shù)Tmax、T1/2z、Cmax、Vz、CLz、AUC0～t、A