CD97-siRNA轉(zhuǎn)染對胃癌細胞株MKN45生物學特性的影響及其分子機制的初步研究.pdf

1、浙江大學醫(yī)學院博士學位論文CD97siRNA轉(zhuǎn)染對胃癌細胞株MKN45生物學特性的影響及其分子機制的初步研究姓名：龔道軍申請學位級別：博士專業(yè)：普通外科學指導教師：陳力20090501浙江大學博士學位論文中文摘要重要作用。然而，CD97對胃癌細胞生物學特性的影響及其內(nèi)在機制仍然有待于闡明。第一章CD97siRNA轉(zhuǎn)染對人胃癌細胞株MKN45增殖、凋亡、遷移及侵襲能力的影響目的：設計合成有效的CD97siRNA，體外轉(zhuǎn)染胃癌細胞株，觀察C

2、D97表達變化及其對體內(nèi)、外胃癌細胞增殖、凋亡、遷移及侵襲能力的影響。方法：1采用人胃癌細胞株MKN45，針對CD97基因設計siRNA，采用化學法合成，篩選出最有效的CD97siRNA。2CD97siRNA轉(zhuǎn)染胃癌細胞48小時后，用RTPCR檢測CD97基因在mRNA水平表達的變化，72小時后用Westernblot和免疫細胞化學方法檢測CD97基因在蛋白水平表達的變化，并用MTT法和流式細胞術檢測胃癌細胞增殖、凋亡的變化，用細胞遷移

3、和侵襲試驗檢測胃癌細胞遷移和侵襲能力的變化。315只裸鼠隨機分為3組，每組5只，分別接種轉(zhuǎn)染siRNACD97細胞(抑制組)，接種轉(zhuǎn)染陰性對照siRNACD97細胞(陰性對照組)，接種未轉(zhuǎn)染細胞(正常對照組)。接種4周后，觀察各組成瘤情況，比較成瘤率。結(jié)果：1CD97一siRNA轉(zhuǎn)染48小時后，RTPCR方法檢測結(jié)果表明CD97在mRNA水平表達下降7012％；72小時后，Westernblot方法檢測結(jié)果表明CD97在蛋白水平的表達下