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文檔簡介
1、妊娠期蛻膜化的子宮內膜(蛻膜)和滋養(yǎng)細胞共同構成母-胎界面;來自胚胎的滋養(yǎng)細胞具有一些類似于惡性腫瘤細胞的生物學行為。絨毛內層的細胞滋養(yǎng)細胞經過分裂、增殖后分化為絨外滋養(yǎng)細胞,可侵入母體蛻膜深部,并可取代子宮螺旋動脈血管內皮細胞。滋養(yǎng)細胞侵襲能力對于囊胚植入、胎盤發(fā)育,并建立母-胎循環(huán)至關重要;滋養(yǎng)細胞侵襲功能異常,蛻膜螺旋動脈重塑不良是子癇前期、胎兒宮內生長遲緩、自然流產等妊娠相關疾病的主要因為。因此,滋養(yǎng)細胞的功能調控一直是生殖醫(yī)學
2、工作者研究的熱點。胚胎植入過程涉及母-胎界面各功能細胞間復雜的分子交互作用。滋養(yǎng)細胞侵入子宮內膜受到自分泌和旁分泌調節(jié),如各種細胞因子,妊娠激素的影響。孕期母體內存在高水平雌激素(17β-estrodial)、孕激素(progesterone)以及hCG;孕激素和hCG可以上調滋養(yǎng)細胞的侵襲力,但其確切分子機制不詳。CLEC-2是C型凝集素受體超家族“Dectin-1集群”成員之一,分子量為33kDa的Ⅱ型跨膜糖蛋白。CLEC-2起初被
3、認為局限表達于血小板,但最近研究發(fā)現,人巨核細胞以及鼠類外周中性粒細胞也表達CLEC-2。RT-PCR分析還證明,PBMC、骨髓細胞、單核巨噬細胞,樹突細胞也有轉錄。Rhodocytin和HIV是至今已發(fā)現的CLEC-2的兩個外源性配體。Rhodocytin與CLEC-2的胞外結構域結合,能夠激活CLEC-2胞漿區(qū)ITAM樣基序,啟動細胞活化,導致血小板聚集。HIV與CLEC-2相互作用,可促進HIV-1感染顆粒的遷移。然而,CLEC-
4、2的主要功能可能是通過識別內源配體調節(jié)內環(huán)境穩(wěn)定。Podoplanin已被鑒定為CLEC-2的內源性配體;CLEC-2與podoplanin交互作用促進血小板活化和聚集。CLEC-2與podoplanin相互作用還參與腫瘤細胞的生長和/或轉移。迄今為止,還未見凝集素受體CLEC-2在母-胎界面表達及功能的研究報道。本文對CLEC-2及其內源性配體podoplanin在早孕期母-胎界面的表達進行了研究,探討了妊娠相關激素對CLEC-2表達
5、的調節(jié)。本研究分為兩部分:
第一部分:CLEC-2與podoplanin在人早孕期母-胎界面的表達。
目的:比較分析CLEC-2及及其配體podoplanin在人早孕期和自然流產母-胎界面的表達。
方法:收集人早孕期正常和自然流產絨毛與蛻膜組織,采用免疫組織化學、免疫細胞化學、Western blot檢測CLEC-2及podoplanin在絨毛、蛻膜組織、原代蛻膜基質細胞、原代滋養(yǎng)細胞和滋養(yǎng)細胞
6、系HTR-8/SVneo的表達。
結果:在人早孕期正常絨毛與蛻膜組織中,及在原代培養(yǎng)的蛻膜基質細胞、滋養(yǎng)細胞和HTR-8/SVneo細胞系均有CLEC-2與podoplanin表達。自然流產絨毛較正常絨毛明顯低表達CLEC-2,高表達podoplanin;而自然流產蛻膜的CLEC-2與podoplanin表達與正常蛻膜無顯著差異。
結論:CLEC-2及podoplanin可能參與早孕期母-胎界面的交叉對話。<
7、br> 第二部分:CLEC-2在滋養(yǎng)細胞系HTR-8/SVneo的表達調控。
目的:妊娠相關激素對滋養(yǎng)細胞系HTR-8/SVneo表達CLEC-2的調節(jié)。
方法:應用不同濃度雌激素、孕激素、hCG處理HTR-8/SVneo;Western blot分析CLEC-2在HTR-8/SVneo的表達。
結果:與對照組相比,hCG上調滋養(yǎng)細胞系表達CLEC-2;相反,雌激素以劑量依賴性方式降調節(jié)H
8、TR-8/SVneo表達CLEC-2;孕激素不影響CLEC-2表達。
結論:CLEC-2的表達受到hCG和雌激素雙向調控,以維持正常妊娠。
綜上所述,在人早孕期母-胎界面表達CLEC-2與其內源配體podoplanin。自然流產絨毛CLEC-2表達低于正常絨毛,但其配體podoplanin表達較高。滋養(yǎng)細胞、DSC及HTR-8/SVneo均表達CLEC-2及podoplanin;hCG升調節(jié)、雌激素降調節(jié)CL
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