Tau蛋白過度磷酸化相關(guān)的七氟醚麻醉后老年小鼠認知功能障礙的機制研究.pdf

1、目的：老年患者在手術(shù)麻醉后易罹患術(shù)后認知功能障礙(postoperative cognitivedysfunction，POCD)，但其發(fā)病機制仍不清楚。最近有動物研究顯示海馬tau蛋白的過度磷酸化可能在全麻藥物誘發(fā)的認知功能損傷中扮演重要的角色，但其具體機制尚不明確。本研究的目的是探討成熟神經(jīng)元細胞重新進入細胞周期是否參與七氟醚暴露后海馬神經(jīng)元內(nèi)tau蛋白過度磷酸化誘發(fā)認知功能損傷的過程。
　　方法：
　　第一部分:30只

2、12月齡雄性C57BL/6J小鼠隨機分為兩組:七氟醚組（SEV組，n=15），吸入2.5％七氟醚+100％氧氣2h;對照組（CON組，n=15），吸入100％氧氣2h。七氟醚吸入結(jié)束后第七天，每組選取10只小鼠進行水迷宮實驗，最終每組各有8只小鼠完成水迷宮試驗;同時每組選取5只小鼠，取海馬行western blot，測定其海馬中總tau蛋白、磷酸化tau蛋白、cyclin D1、p27kip1及c-caspase-3的表達水平。

3、　　第二部分:取40只出生24h之內(nèi)的C57BL/6J小鼠，用于海馬細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)滿15天后，將其分為四組:對照組（CON組），暴露于含95％O2+5％CO2的新鮮氣體2h;七氟醚組（SEV組），在輸入培養(yǎng)箱的以上新鮮氣流中加入2％的七氟醚，暴露2h; LiCl組（Li組），在暴露于含95％O2+5％CO2的新鮮氣體前1h加入LiCl(20mmol/L)進行預(yù)處理; LiCl+七氟醚組（Li+SEV組），在暴露于含2％七氟醚的新鮮氣體前

4、1h加入LiCl(20mmol/L)進行預(yù)處理。氣體暴露結(jié)束后收取細胞樣本，采用western blot法測定各組磷酸化tau蛋白及cyclin D1的表達量。
　　結(jié)果：
　　第一部分:七氟醚暴露可導致老年小鼠出現(xiàn)空間學習記憶能力損傷，同時增加了其海馬中總tau蛋白、磷酸化tau蛋白、裂解的caspase-3和cyclin D1的表達，但對p27kip1的表達水平?jīng)]有影響。
　　第二部分:與CON組相比，SEV組磷酸

5、化tau蛋白和cyclin D1表達水平明顯升高，提示2h的七氟醚暴露可促進小鼠海馬細胞tau蛋白的過度磷酸化，并增加cyclin D1的表達;與SEV組相比，Li+SEV組的磷酸化tau蛋白明顯下降的同時，cyclin D1的表達亦下降，提示當tau蛋白的磷酸化被GSK-3β抑制劑阻斷后，cyclinD1的表達隨之下降，cyclinDi可能是磷酸化tau蛋白作用的靶點。
　　結(jié)論：七氟醚可引起老齡小鼠認知功能的損傷，這可能與其引