GM—CSF基因治療白血病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、白血病是兒童和青少年常見的惡性腫瘤之一,鑒于白血病細(xì)胞的不局限性,其治療方法受到很大的限制.抗腫瘤免疫反應(yīng)主要是由細(xì)胞介導(dǎo)的,T細(xì)胞是主要的效應(yīng)細(xì)胞.腫瘤抗原須經(jīng)過抗原遞呈細(xì)胞的加工、遞呈才能有效激活T淋巴細(xì)胞.樹突狀細(xì)胞是專職的、最重要的抗原遞呈細(xì)胞,在抗腫瘤免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮重要作用.GM-CSF能促進(jìn)樹突狀細(xì)胞分化、成熟,刺激MHC分子和共刺激分子表達(dá),并具有誘導(dǎo)粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用.該研究采用分子克隆技術(shù),構(gòu)

2、建小鼠GM-CSF(mGM-CSF)真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GM-CSF,并用電穿孔法將其導(dǎo)入白血病細(xì)胞系FBL-3,篩選鑒定后,用絲裂霉素滅活制備轉(zhuǎn)GM-CSF基因瘤苗,初步探討其作為瘤苗的有效性,并由此探索白血病免疫治療的可行性.主要研究結(jié)果如下:1.真核表達(dá)重組質(zhì)粒pcDNA3-GM-CSF的構(gòu)建;2.電穿孔法轉(zhuǎn)染FBL-3細(xì)胞及GM-CSF高表達(dá)細(xì)胞克隆的篩選;3.FBL-3-GM-CSF細(xì)胞生物學(xué)特性;4.絲裂霉素滅活FBL