百草枯急性中毒大鼠肺組織炎癥因子的變化及二巰丙磺鈉的干預.pdf

1、目的： 探討百草枯急性中毒大鼠肺組織TNF-α、IL-10的基因表達，肺組織HMGB-的基因及蛋白水平的表達及二巰丙磺鈉的干預。 方法： 1.清潔級雄性SD大鼠100只，隨機分成4組：(1)正常對照組(NC組)：10只；(2)Na-DMPS對照組：10只，以200mg/kg Na-DMPS腹腔注射；(3)PQ染毒組(PQ組)：40只，予1％的PQ劑量20mg/kg一次性左腹腔注射染毒；(4)二巰丙磺鈉保護組(Na

2、-DMPS組)，40只，右腹腔注射200mg/kgNa-DMPS后15min，予1％的PQ，20mg/kg一次性左腹腔注射染毒。NC組及Na-DMPS對照組于染毒后1d，PQ組及Na-DMPS組于染毒后6h，1d，3d，7d各取10只活殺，取部分肺組織行病理觀察及電鏡檢查，余肺組織于液氮中保存待用。 2.觀察PQ組和Na-DMPS組大鼠在染毒后行為學改變，肺組織病理及電鏡改變。 3.RT-PCR法檢測各組大鼠肺組織TNF

3、-α、IL-10、HMGB-1基因的相對表達量，Western blot法測定肺組織HMGB-1蛋白的表達。 結果： 1.PQ組大鼠于染毒后1h即出現(xiàn)少動、萎靡和厭食，癥狀進行性加重，5h后出現(xiàn)呼吸急促、四肢無力等表現(xiàn)，1～3d為最明顯，3d后大鼠開始進食，精神狀態(tài)、呼吸困難及四肢無力等表現(xiàn)好轉，7d時中毒癥狀明顯減輕，進食正常，無明顯呼吸困難等。Na-DMPS組大鼠精神狀態(tài)、呼吸困難等癥狀均明顯輕于PQ組，7d時大鼠基

4、本恢復正常。 2.PQ組大鼠6h、1d及3d肺泡及肺血管充血水腫明顯，肺泡腔見紅細胞滲出，肺間質大量炎癥細胞浸潤，7d時肺炎性細胞、充血等輕。Na-DMPS組亦出現(xiàn)了肺炎性細胞、充血等上述表現(xiàn)，但程度明顯減輕。電鏡下PQ組大鼠肺組織上皮細胞核固縮，板層小體空泡化，間質炎性細胞浸潤，Na-DMPS組上述改變明顯減輕。 3.PQ組及Na-DMPS組大鼠染毒后肺組織TNF-α mRNA、IL-10 mRNA及HMGB-1 mR

5、NA表達量升高，TNF-α mRNA以染毒后6h最高，IL-10 mRNA及HMGB-1 mRNA以染毒后1d最高，后逐漸降低。與同時間點PQ組相比，Na-DMPS組TNF-α mRNA明顯下降，以染毒后6h及1d明顯(P<0.05)，IL-10 mRNA明顯升高，以染毒后6h、1d及3d明顯(P<0.05)，HMGB-1 mRNA明顯下降，以染毒后1d及3d明顯(P<0.05)。 4.PQ組染毒后6h HMGB-1蛋白表達開始

6、升高，3d達高峰，在染毒后1d、3d、7d HMGB-1蛋白表達量均明顯高于NC組(P<0.05)；Na-DMPS組染毒后6h HMGB-1蛋白表達亦開始升高，3d達高峰，1d、3d HMGB-1蛋白表達量明顯高于NC組(P<0.05)，與同時間PQ組相比較，Na-DMPS組HMGB-1蛋白表達量均減少，以1d、3d明顯(P<0.05)。 結論： 1.大鼠急性百草枯中毒后肺損傷明顯，肺組織早晚期炎癥因子表達增多。