牙齦卟啉單胞菌感染對兔炎癥免疫反應(yīng)及動脈粥樣硬化形成的影響.pdf

1、目的：建立新西蘭兔Pg感染的牙周炎、微量Pg內(nèi)毒素血癥及Pg菌血癥模型，觀察正常/高脂飲食對新西蘭兔炎癥反應(yīng)及動脈粥樣硬化進程的影響，并探討其中的分子機制。
　　方法：⑴高脂飼料建立兔高脂血癥模型，兔第二前磨牙絲線結(jié)扎加Pg接種建立牙周病模型。分組為----ND組：正常飲食；HD組：高脂飲食；ND+Pg+Ligature組：普通飼料喂養(yǎng)+Pg接種+牙周結(jié)扎；HD+Pg+Ligature組：高脂飼料喂養(yǎng)+Pg接種+牙周結(jié)扎。14周后

2、實施安樂死，行牙周局部的病理形態(tài)學(xué)分析，檢測血脂情況，ELISA檢測外周血中炎癥因子（CRP、TNF-α、IL-6、MCP-1）的水平；主動脈做HE染色，觀察動脈粥樣硬化病理變化，Realtime-PCR檢測主動脈局部TLR-2、TLR-4、TNF-α、CRP、IL-6、MMP-9、MCP-1；Westernblot檢測NF-κB p65、P38-MAPK及JNK-MAPK蛋白的表達。⑵行Pg-LPS兔耳緣靜脈注射建立微量內(nèi)毒素血癥模型

3、。實驗動物分組為----ND組：正常飲食；HD組：高脂飲食；ND+Pg-LPS組：普通飼料喂養(yǎng)+Pg-LPS入血；HD+Pg-LPS組：高脂飼料喂養(yǎng)+Pg-LPS入血。14周后實施安樂死，各項指標的檢測同實驗一。⑶行Pg菌懸液兔耳緣靜脈注射建立微量菌血癥模型。分組為----ND組：正常飲食；HD組：高脂飲食；ND+Pg組：普通飼料喂養(yǎng)+Pg入血；HD+Pg組：高脂飼料喂養(yǎng)+Pg入血。14周后實施安樂死，檢測指標同實驗二。
　　結(jié)果

4、：①在高脂飲食條件下，牙周建模導(dǎo)致的牙周損害更加顯著，動脈粥樣硬化病變也最顯著，同時可見全身及主動脈炎癥因子水平升高、P38-MAPK及JNK-MAPK表達顯著增強。②在高脂飲食條件下，Pg-LPS入血可導(dǎo)致主動脈粥樣硬化改變、全身及主動脈局部炎癥因子、NF-κB p65、P38-MAPK表達明顯增強。③單純Pg入血即可導(dǎo)致主動脈粥樣硬化改變、全身及主動脈局部炎癥因子、NF-κB p65、P38-MAPK及JNK-MAPK表達明顯增強，