雌激素改善皮瓣再灌注損傷和血供的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究在不同的劑量下，雌激素對(duì)兔背部皮瓣的組織損傷、皮瓣血供及皮瓣存活面積的影響，并探討其可能的作用機(jī)制及效應(yīng)變化規(guī)律，為臨床應(yīng)用開(kāi)拓新的思路及提供理論基礎(chǔ)。 方法：選3～4月齡新西蘭大耳白兔30只，雌雄不限，隨機(jī)分為A、B、O三組，每組10只。以3％戊巴比妥鈉經(jīng)耳緣靜脈注射進(jìn)行麻醉。于兔背部做蒂在近端，以兔背中線為軸線的超長(zhǎng)型皮瓣一個(gè)，大小3cm×12cm。皮瓣兩側(cè)相對(duì)縫合，制成管狀，蒂部無(wú)明顯旋轉(zhuǎn)或壓迫，遠(yuǎn)端原位縫合。供

2、區(qū)創(chuàng)面直接縫合。術(shù)后第2、4、6天于皮瓣蒂部注射雌激素(苯甲酸雌二醇注射液)，A組應(yīng)用劑量為100ug/kg體重，B組應(yīng)用劑量為50 ug/kg體重，O組為對(duì)照組，不予注射。于術(shù)后第4、7天，在皮瓣近側(cè)部位取少量組織作組織切片，光鏡下觀察，計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞個(gè)數(shù)，并采用免疫組化法檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)。術(shù)后第5天，于皮瓣近側(cè)部位采血，用放射免疫法檢測(cè)皮瓣血清丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量。于術(shù)后第7天皮瓣斷蒂，用硫酸紙描繪

3、、計(jì)算機(jī)分析法測(cè)量皮瓣存活面積。 結(jié)果： 1、大體觀察：由于麻醉的原因各組均有1只動(dòng)物死亡(由于滿足統(tǒng)計(jì)需要，未予補(bǔ)全)，麻醉過(guò)后各組動(dòng)物健康成活，皮瓣均未出現(xiàn)感染現(xiàn)象，各組皮瓣遠(yuǎn)側(cè)部位自術(shù)后第三天起，開(kāi)始出現(xiàn)面積不同的壞死區(qū)域。 2、皮瓣存活面積： (1)、A組皮瓣存活面積較O組皮瓣存活面積增加35.47％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.018)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異；B組皮瓣存活面積

4、較O組皮瓣存活面積增加26.48％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015)，可以認(rèn)為組問(wèn)存在顯著性差異；A組與B組皮瓣存活面積比較，差別不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.823)。 (2)、以性別作為分組因素，對(duì)雌、雄不同性別的存活面積之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析， P=0.705，P>0.05，表明雌雄不同性別的皮瓣存活面積之間不存在顯著性差異。 3、皮瓣血清丙二醛(MDA)含量測(cè)定結(jié)果：A組MDA較O組MDA降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢

5、驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.028)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異；B組MDA較O組MDA降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.023)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異； A組與B組MDA含量之間，差別不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.927)。 4、皮瓣血清一氧化氮(NO)含量測(cè)定結(jié)果：A組NO較O組NO增高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.02)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異； B組NO較O組NO增高，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義(P=0.025)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異；A組與B組NO含量之間，差別不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.917)。 5、皮瓣VEGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)表達(dá)結(jié)果：A組比O組VEGF表達(dá)增強(qiáng)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.02)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異；B組比O組VEGF表達(dá)增強(qiáng)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異；A組與B組VEGF表達(dá)之間，差別不存在統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義(P=0.718)。 6、皮瓣組織中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(NEU)結(jié)果：A組NEU較O組NEU降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異； B組NEU較O組NEU降低，差別存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，可以認(rèn)為組間存在顯著性差異； A組與B組NEU之間，差別不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.393)。 7、直線相關(guān)分析： (1)、皮瓣存活面積S與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VE

8、6F表達(dá)之間相關(guān)系數(shù)r=0.697，表明二者之間呈正相關(guān)，P=0.002，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)、皮瓣存活面積S與血清NO含量之間相關(guān)系數(shù)r=0.755，表明二者之間呈正相關(guān)，P=0.001，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (3)、皮瓣存活面積S與血清丙二醛MDA含量之間相關(guān)系數(shù)r=-0.414，表明二者之間相關(guān)關(guān)系成立，為負(fù)相關(guān)，P=0.032，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)、皮瓣存活面積S與皮瓣中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)NEU計(jì)數(shù)之間相關(guān)系數(shù)r=-

9、0.579，表明二者之間相關(guān)關(guān)系成立，為負(fù)相關(guān)，P=0.002，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1、雌激素注射處理可使皮瓣VEGF表達(dá)上調(diào)，VEGF表達(dá)上調(diào)則可促進(jìn)皮瓣新生血管生成，有利于皮瓣血供重建。 2、雌激素注射處理可使皮瓣NO含量增加，可使皮瓣血管擴(kuò)張，增加血流量。 3、雌激素注射處理可使皮瓣MDA降低，使皮瓣中性粒細(xì)胞NEU浸潤(rùn)減少，表明雌激素可以減輕皮瓣組織損傷以及缺血再灌注損傷。 4、應(yīng)用