紅芪多糖對(duì)糖尿病腎病db-db小鼠腎組織VEGF與PEDF表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本研究通過觀察紅芪多糖(HPS)對(duì)糖尿病腎病(DN)db/db小鼠腎組織中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與色素細(xì)胞衍生因子(PEDF)mRNA及蛋白表達(dá)水平的影響,客觀評(píng)價(jià)HPS對(duì)DN小鼠腎臟保護(hù)作用,進(jìn)一步探討其治療本病的可能機(jī)制。
　　方法:SPF級(jí)11周齡BKS背景雄性小鼠60只,其中db/db小鼠50只,db/m小鼠10只。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,于12周齡時(shí)將db/db小鼠用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組,每組10只:HPS高劑量組(

2、400mg.kg-1.d-1)、中劑量組(200mg.kg-1.d-1)、低劑量組(100mg.kg-1.d-1)、依那普利組(10mg.kg-1.d-1)、模型組(等體積生理鹽水)。db/m小鼠作為正常對(duì)照組給予等體積生理鹽水灌胃。連續(xù)灌胃8周,于治療前及治療后每2周檢測(cè)體重。第8周末,框后靜脈取血,留取血標(biāo)本用于部分血液生化檢測(cè)。處死小鼠,立即剝離腎臟,右腎皮質(zhì)用于腎臟病理學(xué)檢測(cè);左腎速凍于-80℃冰箱保存,用于RT-PCR、Wes

3、tern blotting檢測(cè)腎組織VEGF及PEDF mRNA和蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果:至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),模型組小鼠精神萎靡,毛色晦暗無澤,明顯多飲、多尿、多食;體重、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、血清尿素氮(BUN)及肌酐(SCr)值明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01);腎組織病理切片Masson染色顯示:模型組小鼠腎小球明顯肥大,系膜區(qū)增寬,毛細(xì)血管基底膜增厚,大量膠原纖維呈絮團(tuán)樣分布;電鏡下可見模型組小鼠腎組織足突大片融

4、合、細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)沉積,腎小球基底膜(GBM)濾孔增大,厚度明顯增加;模型組小鼠腎組織中VEGF mRNA及蛋白表達(dá)量增高,PEDF mRNA及蛋白的表達(dá)下降。而正常對(duì)照組無上述變化。治療8周后,與模型組比較, HPS中、高劑量組及依那普利組小鼠體重、TG、TC、BUN及SCr明顯下降(P<0.05);腎間質(zhì)纖維化、GBM增厚程度均減輕(P<0.05);腎組織中VEGF mRNA及蛋白表達(dá)量明顯下降(P<0.05),PEDF mR

5、NA及蛋白表達(dá)量明顯升高(P<0.05),相關(guān)性分析顯示:VEGF與PEDF之間相互呈負(fù)線性相關(guān)。HPS各劑量組間呈量效關(guān)系,以HPS高劑量組各項(xiàng)觀察指標(biāo)改善最為明顯,且療效優(yōu)于依那普利組(P<0.05)。
　　結(jié)論:HPS能夠治療db/db小鼠DN。其作用機(jī)理可能是通過HPS扶正祛邪的獨(dú)特功效,使VEGF與PEDF在DN小鼠腎臟中的表達(dá)水平趨于平衡,從而抑制了腎臟血管增生,延緩了腎小球硬化和腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展,起到保護(hù)腎臟的作用