AT-158的抗癌作用機制研究（Ⅱ）.pdf

1、為了探討DHA復合物(AT-158)的抗腫瘤效應及作用機制,該文以H22肝癌細胞、S180肉瘤細胞移植瘤的荷瘤小鼠為體內實驗模型,以Hela人宮頸癌細胞、HT-29人結腸癌細胞、BEL-7402人肝癌細胞為體外培養(yǎng)實驗模型,研究了AT-158在體內和體外對各種癌細胞的抑制作用.通過動物模型的建立和細胞培養(yǎng),利用SDS-PAGE和Western-Blot、切片和免疫組織化學技術、吖啶橙熒光染色技術等研究了AT-158對腫瘤的抑制作用,對腫

2、瘤細胞核形態(tài)和DNA結構的影響;AT-158對腫瘤細胞內Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達的影響等,以闡明AT-158的抗癌作用與機制.Caspase-3是Caspase家族蛋白中最為重要的凋亡執(zhí)行者之一.在凋亡執(zhí)行階段,負責對全部或者部分關鍵性蛋白的酶切(激活或者滅活).它經由死亡受體途徑和線粒體—細胞色素C途徑激活,激活后的Caspase-3通過酶切凋亡抑制劑、直接破壞細胞結構以及對DNA復制和修復的影響,造成染色質凝集

3、、DNA降解、凋亡小體形成等細胞凋亡的改變,最終導致細胞凋亡的發(fā)生.Bcl-2和Bax蛋白分別是Bcl-2家族中最有代表性的抑制凋亡和促進凋亡的蛋白,在腫瘤細胞的凋亡過程中有重要的調控作用.死亡信號能激活Bax,使Bax從細胞漿移位到線粒體膜上,并很快形成同源二聚體,促進凋亡發(fā)生.而Bcl-2則在Bax誘發(fā)凋亡的過程中對其功能進行限制.該實驗發(fā)現(xiàn)在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中,細胞凋亡起著重要作用.腫瘤的形成不僅是因為細胞過度增生,也是細胞死