鉑類(lèi)配合物的抗癌作用機(jī)理的研究.pdf

1、順鉑等鉑類(lèi)抗癌藥物是目前在臨床上廣泛應(yīng)用的抗腫瘤藥物，超過(guò)半數(shù)以上化療方案中使用鉑類(lèi)抗癌藥物，但鉑類(lèi)抗癌藥物等應(yīng)用受到自身的毒副作用和腫瘤細(xì)胞固有的和獲得性的耐藥性所限制.近年來(lái)，鉑類(lèi)配合物抗癌機(jī)理的研究備受關(guān)注，通過(guò)抗癌機(jī)理的研究，希望能夠指導(dǎo)合成新型的鉑類(lèi)抗癌藥物，克服腫瘤的耐藥性.本論文首先基于單功能鉑類(lèi)配合物的抗癌作用機(jī)理設(shè)計(jì)了一種新的鉑類(lèi)配合物ampyplatin，并研究ampyplatin抗腫瘤活性以及與生物分子的相互作用;

2、同時(shí)研究順鉑與ATP7AN端的第四個(gè)金屬結(jié)合域(MNK4)的相互作用，并檢測(cè)順鉑從Atox1向MNK4的轉(zhuǎn)移，探索了ATP7A和Atox1在順鉑耐藥機(jī)理中的作用.
　　第一章是對(duì)鉑類(lèi)配合物的抗癌機(jī)理的綜述.主要包括鉑類(lèi)配合物類(lèi)型;鉑類(lèi)配合物與其靶點(diǎn)DNA的相互作用;腫瘤細(xì)胞對(duì)鉑類(lèi)配合物耐藥性的機(jī)理.
　　第二章主要研究ampyplatin細(xì)胞毒性和ampyplatin與生物分子的相互作用.cDPCP是一種研究比較多的單功能鉑

3、類(lèi)配合物,cDPCP在含硫分子作用下可以轉(zhuǎn)化為反式鉑類(lèi)配合物.ampyplatin可以看作cDPCP的代謝的產(chǎn)物.在本章中首先合成表征ampyplatin，得到ampyplatin的晶體結(jié)構(gòu).然后檢測(cè)ampyplatin的細(xì)胞毒性和細(xì)胞攝取量，結(jié)果表明ampyplatin的細(xì)胞毒性與順鉑相當(dāng)，要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于cDPCP，同時(shí)能夠被細(xì)胞有效攝取.Ampyplain與DNA的相互作用表明ampyplatin和DNA的加合物主要是單功能加合物，其對(duì)

4、DNA結(jié)構(gòu)影響比順鉑要小.水解逆反應(yīng)速率較大導(dǎo)致ampyplatin水解量極少.另外通過(guò)HPLC和核磁監(jiān)測(cè)了ampyplatin和GMP反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程.
　　第三章主要研究ATP7A的N端第四個(gè)金屬結(jié)合域(MNK4)與順鉑的相互作用，同時(shí)檢測(cè)了順鉑從Atox1向MNK4轉(zhuǎn)移.順鉑和MNK4的銅結(jié)合區(qū)域的兩個(gè)半胱氮酸結(jié)合，Pt上的兩個(gè)氨仍能保留，順鉑的結(jié)合導(dǎo)致MNK4聚集.通過(guò)陰離子交換色譜，原子吸收，ESI-MS，以及幾丁質(zhì)樹(shù)脂

5、柱上的反應(yīng),驗(yàn)證了順鉑從Atox1向MNK4的轉(zhuǎn)移.這種轉(zhuǎn)移可能和順鉑的細(xì)胞耐藥性相關(guān).說(shuō)明銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白與順鉑的耐藥性是相關(guān)的.
　　第四章主要研究ATP7B上的N端第二個(gè)金屬結(jié)合域(WLN2)與順鉑和Atox1復(fù)合物(Pt/Atox1)的相互作用.WLN2與順鉑的反應(yīng)在不同的還原劑下會(huì)有不同的結(jié)果.其中DTT作為還原劑時(shí)Pt上的氨都保留:而使用TCEP作為還原劑則Pt上的氨不再保留.WLN2與Pt/Atox1反應(yīng)后.WLN2銅結(jié)合

6、區(qū)域的氨基酸殘基的化學(xué)位移發(fā)生變化,表明Pt從Atox1向WLN2轉(zhuǎn)移.
　　第五章研究Pt/Atox1與DNA的相互作用.通過(guò)DNA凝膠電泳和ICP-MS發(fā)現(xiàn)Pt可以從Atox1向超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移.這說(shuō)明Atox1可以將鉑轉(zhuǎn)移向不同的目標(biāo).
　　第六章研究銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Ctr1的C端八肽(C8)與Cu(Ⅰ)的相互作用，以及Cu(Ⅰ)從C8向Atox1轉(zhuǎn)移.結(jié)果表明C8可以與多個(gè)Cu(Ⅰ)結(jié)合，其中和一個(gè)Cu(Ⅰ)解離常數(shù)為