重組蛋白tMDC-Ⅲ、SP-10、AEG的免疫原性及其生殖作用.pdf

1、該文用英國葛蘭素公司重組構(gòu)建表達的三種抗原蛋白SP-10,AEG,tMDC-Ⅲ免疫大鼠,通過ELISA實驗、免疫熒光組化實驗、交配實驗對它們的免疫原性、在體內(nèi)的生殖作用、精子表達部位進行了分析,結(jié)果如下：1.三種克隆表達的精子蛋白TMDC-Ⅲ、SP-10和AEG免疫動物可成功產(chǎn)生抗體,并符合抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律.ELISA試驗和免疫熒光組化試驗證明這三種重組蛋白較好地保持了天然蛋白形式的免疫原性,可用于體內(nèi)外實驗進一步研究它們的具體作用.

2、2.通過免疫大鼠交配實驗研究精子蛋白tMDC-Ⅲ、SP-10和AEG在體內(nèi)的生殖作用,發(fā)現(xiàn)對照組、tMDC-Ⅲ、SP-10和AEG免疫組大鼠受精率分別為91.6﹪,83.3﹪,75.0﹪ and 58.3﹪,AEG免疫組大鼠受精率顯著降低.首次表明tMDC-Ⅲ免疫大鼠雖然產(chǎn)生高滴度抗體,但受精率只有微弱下降.3.通過檢查免疫大鼠睪丸、附睪、卵巢、輸卵管的組織形態(tài),未見任何異常,說明三種抗原免疫動物不是通過抑制精子發(fā)育和損傷生殖道而降低受

3、精率的,同時說明了它們對機體的安全性,可作為免疫疫苗開發(fā)的侯選者.4.利用間接免疫熒光法對AEG、SP-10、tMDC-Ⅲ蛋白在人、小鼠、兔子、豬、牛精子上進行了精確定位,AEG、SP-10在頂體部均有表達,確證了它們與精卵融合有關(guān);首次對tMDC-Ⅲ蛋白在人、小鼠、兔子、豬、牛精子進行了精確定位,它主要存在于人精子尾部主段,小鼠和牛精子頂體,豬精子頂體和頸部,兔精子頭部、頸部和尾部的主段及尾段.除人外,其它幾種動物精子頂體均有tMDC