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文檔簡(jiǎn)介
1、CDPKs(calcium-dependent protein kinases)是在植物中首先發(fā)現(xiàn)的一種鈣依賴型蛋白激酶,屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶,可以不經(jīng)鈣調(diào)素的作用而直接被鈣信號(hào)激活,在植物生長(zhǎng)發(fā)育和適應(yīng)逆境過程中起重要的調(diào)節(jié)作用。但其作用機(jī)制仍不很清楚。本研究在前期分離獲得應(yīng)答多種逆境的辣椒CaCDPK4全長(zhǎng)cDNA的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步進(jìn)行其亞細(xì)胞定位以及超表達(dá)和RNAi的載體構(gòu)建和遺傳轉(zhuǎn)化,獲得辣椒轉(zhuǎn)基因植株,為進(jìn)一步開展CaCDPK
2、4在辣椒中的功能分析奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:
1、通過構(gòu)建CaCDPK4與YFP融合蛋白的瞬間表達(dá)載體,并利用基因槍轟擊洋蔥表皮進(jìn)行亞細(xì)胞定位,結(jié)果表明,CaCDPK4定位于細(xì)胞質(zhì)中。
2、分別構(gòu)建了辣椒CaCDPK4的超表達(dá)pK7WG2-CaCDPK4、RNAi載體pHELLSGATE12-CaCDPK4,并進(jìn)行了測(cè)序驗(yàn)證。開展了辣椒農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化,在所獲得的轉(zhuǎn)基因植株中,PCR鑒定出3株pK7WG2
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